Test immunofluorescencji pośredniej na malarię

Istnieje wiele serologicznych metod diagnostycznych w odniesieniu do malarii. W tej części przedstawiono jedynie powszechnie stosowany pośredni test immunofluorescencyjny. Osoby, które należy zbadać: osoby z oczywistymi dreszczami, drżeniem ciała, bladą cerą, sinicowymi wargami, suchą skórą, drażliwością, bólem głowy, dyskomfortem, anoreksją i innymi objawami. Podstawowe informacje Klasyfikacja specjalistyczna: Badanie chorób zakaźnych i klasyfikacja: badanie krwi Obowiązująca płeć: czy mężczyźni i kobiety stosują post: post Wyniki analizy: Poniżej normy: Wartość normalna: Nie Powyżej normalnego: Negatywne: Negatywny <1:20, wskazujący brak zakażenia malarią. Pozytywne: Dodatni wskaźnik wykrywalności metody fluorescencyjnego przeciwciała jest na ogół wyższy niż wskaźnik wykrywalności pierwotniaków. Miano przeciwciał u pacjentów z malarią falciparum wynosi 1:80 lub więcej i może być uważane za marker dla nosicieli lub niedawnej infekcji malarią. Wskazówki: Nie jedz zbyt tłustych, wysokobiałkowych potraw na dzień przed pobraniem krwi, unikaj intensywnego picia. Zawartość alkoholu we krwi wpłynie bezpośrednio na wyniki testu Po godzinie 20:00 w dniu poprzedzającym badanie lekarskie należy rozpocząć post na 12 godzin, aby uniknąć wpływu na wyniki testu. Wartość normalna Negatywne <1:20. Znaczenie kliniczne Dodatni wskaźnik wykrywalności metody fluorescencyjnego przeciwciała jest na ogół wyższy niż wskaźnik wykrywalności pierwotniaków. Miano przeciwciał u pacjentów z malarią falciparum wynosi 1:80 lub więcej i może być uważane za marker dla nosicieli lub niedawnej infekcji malarią. Pozytywnymi wynikami mogą być choroby: malaria, malaria mózgowa, malaria płucna, malaria Przed inspekcją: 1, nie jedz tłustych, wysokobiałkowych pokarmów dzień przed krwią, aby uniknąć intensywnego picia. Zawartość alkoholu we krwi wpływa bezpośrednio na wyniki testu. 2. Po godzinie 20:00 na dzień przed badaniem lekarskim powinieneś zacząć pościć przez 12 godzin, aby uniknąć wpływu na wyniki testu. 3, powinien rozluźnić się podczas pobierania krwi, aby uniknąć skurczu naczyń krwionośnych spowodowanego strachem, zwiększyć trudność pobierania krwi. Po inspekcji: 1. Po pobraniu krwi konieczne jest miejscowe uciśnięcie w otworze przez 3-5 minut, aby zatrzymać krwawienie. Uwaga: Nie pocieraj, aby nie spowodować krwiaka podskórnego. 2, czas prasowania powinien wystarczyć. Każda osoba ma różny czas krzepnięcia, a niektóre osoby potrzebują trochę dłużej na krzepnięcie. Dlatego, gdy wydaje się, że powierzchnia skóry krwawi, ucisk zostaje natychmiast zatrzymany, a krew może zostać wniknięta do skóry z powodu niepełnej hemostazy. Dlatego czas kompresji jest dłuższy, aby całkowicie zatrzymać krwawienie. Jeśli występuje tendencja do krwawienia, czas kompresji należy wydłużyć. 3, po pobraniu krwi objawy omdlenia, takie jak: zawroty głowy, zawroty głowy, zmęczenie itp., Należy natychmiast położyć się, wypić niewielką ilość syropu, a następnie przejść badanie fizykalne po ustąpieniu objawów. 4. Jeśli wystąpi miejscowe przekrwienie, użyj ciepłego ręcznika po 24 godzinach, aby przyspieszyć wchłanianie. Proces kontroli 1. Zasada pośredniego testu immunofluorescencyjnego na malarię Przeciwciało anty-Plasmodium w surowicy testowej łączy się z antygenem Plasmodium na skrawku krwi, a następnie fluorescencyjnie znakowanym przeciwciałem przeciw ludzkim IgG, które działa na ludzką IgG na skrawku krwi i wykazuje fluorescencję w miejscu antygenu. 2, odczynniki (1) Film krwi antygenu jest cienką warstwą krwi Plasmodium cynomolgus i cienką warstwą krwi Plasmodium falciparum. Dostępne są profesjonalne instytucje badawcze. Przechowywać w 4 ° C lub zamrażarce niskotemperaturowej. (2) Fluorescencyjnie znakowane anty-ludzkie IgG, które jest dostępne w handlu w tym kraju. 3, metoda działania (1) Surowicę zebrano konwencjonalną metodą lub na bibule filtracyjnej wyciśnięto okrągły filtr przy użyciu rurki szklanej (żelaznej) o średnicy 1,2 cm. Krew pobierana jest z ucha lub palca pacjenta i wypełniana kołem. Objętość krwi wynosi około 20 μl (około 10 μl surowicy). Po wysuszeniu liczby umieszcza się ją w szczelnej plastikowej torbie ze środkiem pochłaniającym wilgoć i transportuje do laboratorium w temperaturze 4 ° C. Za wyjątkiem pół roku, -20 ° C można przechowywać przez 2 lata. Podczas testu wysuszone krople krwi wycięto w studzienkach płytki reakcyjnej, dodano 0,2 ml (pH 7,2) 0,01 mol / L buforu fosforanowego i rozcieńczenie surowicy odpowiadające 1:20 uzyskano przez namoczenie przez noc w 4 ° C. (2) Wyjmij film krwi antygenu z lodówki i natychmiast zdmuchnij go za pomocą wentylatora elektrycznego. Podziel każdy arkusz antygenu na kilka małych komórek za pomocą specjalnej kredki. Wypróbuj 1 próbkę lub 1 miano na komórkę i dodaj 1 surowicę na komórkę. Krople Negatywna, pozytywna surowica referencyjna i ślepa próba kontrolna PBS były wymagane dla każdej partii prób. Natychmiast po dodaniu surowicy mieszaninę przeniesiono do mokrej skrzynki i po inkubacji w 37 ° C przez 30 minut powoli przemyto 0,01 mol / l PBS (pH 7,2), a następnie zanurzono w cylindrze PBS na 5 do 10 minut. (3) Rozcieńczyć przeciwciało fluorescencyjne przeciw ludzkiej IgG rozcieńczone 1:10 0,01 mol / l PBS (pH 7,2) i umieścić w wilgotnej komorze w 37 ° C na 30 minut Po przemyciu tą samą metodą dodać glicerol i PBS do każdej komórki. Równą ilość zmieszanego roztworu lub wody destylowanej nałożono na arkusze pokrywające, a wyniki reakcji zbadano pod mikroskopem fluorescencyjnym. (4) Interpretacja wyników: Wyróżnia się intensywność fluorescencji i przejrzystość struktury cytoplazmy Schizonta i trofozoitu, brak fluorescencji (-), fluorescencja jest słaba, struktura morfologiczna jest niejasna (±), fluorescencja jest słaba, a struktura morfologiczna Jest nadal wyraźny (+) i jest dalej dzielony na (2+) do (4+) zgodnie ze wzrostem jasności fluorescencji i definicji strukturalnej. Ogólnie, intensywność fluorescencji (+) lub więcej ocenia się jako dodatnią przy rozcieńczeniu surowicy 1:20. Nie nadaje się dla tłumu Ci, którzy nie mają wskazań do badania, nie powinni tego sprawdzać. Działania niepożądane i ryzyko Zasadniczo bez komplikacji i szkód.