Telomeraza

Telomeraza jest specjalną odwrotną transkryptazą składającą się z RNA i białka biorącego udział w syntezie telomerów (specyficznej sekwencji i struktury nukleotydowej) na końcach DNA komórek eukariotycznych. Długość telomerów normalnych komórek somatycznych jest stopniowo skracana w miarę podziału komórki, a aktywność telomerazy jest zwiększona, a długość telomeru można utrzymać bez skracania, tak aby komórki mogły się namnażać i stać się rakowe. Dlatego wykrywanie telomerazy i jej inhibitory mogą być stosowane do diagnozowania i leczenia nowotworów. Podstawowe informacje Klasyfikacja specjalistyczna: Klasyfikacja badań onkologicznych: badanie immunologiczne Obowiązująca płeć: czy mężczyźni i kobiety stosują post: nie na czczo Wyniki analizy: Poniżej normy: Wartość normalna: Nie Powyżej normalnego: Negatywne: Zwykle negatywny. Pozytywne: Rak drobnokomórkowy płuc zwiększył aktywność telomerazy we wczesnym stadium, a niedrobnokomórkowy rak płuc ma więcej zmian aktywności niż w środkowym stadium. Wskazówki: zachowaj normalny sposób myślenia. Wartość normalna Negatywne Znaczenie kliniczne Nadaje się do diagnozowania i diagnostyki różnicowej różnych chorób nowotworowych. Podniesienie: rak wątroby (93,88 OD / 30 μg białka), rak otaczający tkankę (24,09 OD / 30 μg białka). Rak drobnokomórkowy płuc zwiększył aktywność telomerazy we wczesnym stadium, a niedrobnokomórkowy rak płuc ma więcej zmian aktywności niż w środkowym stadium. Pozytywnymi wynikami mogą być choroby: środki ostrożności w przypadku raka trzustki i raka tarczycy 1. Zwróć uwagę, aby zapobiec zanieczyszczeniu laboratoryjnemu i wynikowi fałszywie dodatniemu lub fałszywie ujemnemu. 2. Zwróć uwagę, aby usunąć inhibitor polimerazy zawarty w próbce tkanki, aby zmniejszyć liczbę fałszywie ujemnych wyników. 3. Technologia analizy scyntylacyjnej, metoda ELISA, metoda hybrydyzacji in situ są bardziej niezawodne niż metoda TRAP. Proces kontroli Natychmiast po pobraniu próbek krwi są one wysyłane do badania i testu immunologicznego na nowotwór. Operacja wykrywania: Genomowy DNA wynosił 0,1 μg, bufor zawierający 50 mmol / l chlorku potasu, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8,4), 1,5 mmol / l chlorku magnezu, 100 μg żelatyny, każdy starter wynosił 0,25 μmol / l; dATP, dCTP, dGTP Każdy dTIP wynosił 200 μmol / L, polimeraza DNA wynosiła 2,5 U, a końcowa objętość wynosiła 100 μl. Dodaj kilka kropel ciekłej parafiny, aby zapobiec parowaniu. Cykl reakcji: 1 Denaturacja: 90 ° C przez 30-60 s, temperatura wyżarzania 2 podkładów i matrycy: 40-60 ° C 30-60 s, 3 wydłużenie: 72 ° C 1-2 min. Po powtarzanych cyklach 30 do 40 razy ostatnie wydłużanie startera w 7 ° 72 ° C zostało zakończone na 7 minut. Po usunięciu ciekłej parafiny produkt jest dostępny do analizy. Po elektroforezie na żelu agarozowym wybarwiono go bromkiem etydyny i zaobserwowano pasek fluorescencyjny o oczekiwanej długości amplifikacji przez napromieniowanie lampą UV. Produkt można także hybrydyzować z metodą Southern blot lub spot blot z radioznakowaną lub nieroznakowaną radioaktywnie sondą oligonukleotydową. Bardziej wygodne jest użycie automatycznego urządzenia PCR Po dodaniu odczynnika reakcyjnego, matrycy DNA i polimerazy Taq-DNA do probówki poddaje się ją skorygowanej procedurze, tj. Wymaganej temperaturze, czasowi i przedłużeniu odpowiedniej temperatury i czasu oraz liczby cykli. Reakcja jest przeprowadzana w automatycznym urządzeniu, aby uzyskać zadowalający produkt amplifikacji. Nie nadaje się dla tłumu Ci, którzy nie mają wskazań do badania, nie powinni być badani. Działania niepożądane i ryzyko 1. Zakażenie: Podczas pobierania krwi należy zwrócić uwagę na aseptyczne działanie, unikać zanieczyszczenia wody i innych części w miejscu pobierania krwi, aby uniknąć miejscowego zakażenia. 2, krwawienie: po podaniu pełnego czasu kompresji, szczególnie koagulopatii, tendencji do krwawień, w celu uniknięcia miejscowego podskórnego sączenia, zasinienia i obrzęku.