Telomerase

A telomerase é uma transcriptase reversa especial que consiste de RNA e proteína envolvidos na síntese de telômeros (uma seqüência e estrutura de nucleotídeos específicos) nas extremidades de DNA das células eucarióticas. O comprimento dos telômeros das células somáticas normais é gradualmente reduzido à medida que a célula se divide, e a atividade da telomerase é aumentada, e o comprimento do telômero pode ser mantido sem encurtar, de modo que as células possam proliferar e se tornar cancerosas. Portanto, a detecção da telomerase e seus inibidores podem ser usados ​​para o diagnóstico e tratamento de tumores. Informação básica Classificação do especialista: Classificação do exame de oncologia: exame imunológico Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: não jejuar Resultados da análise: Abaixo do normal: Valor normal: Não Acima do normal: Negativo: Normalmente negativo. Positivo: O câncer de pulmão de pequenas células tem aumentado a atividade da telomerase no estágio inicial, e o câncer de pulmão de não pequenas células tem mais alterações de atividade do que no estágio intermediário. Dicas: Mantenha uma mentalidade normal. Valor normal Negativo Significado clínico É adequado para o diagnóstico e diagnóstico diferencial de várias doenças tumorais. Elevação: cancro do fígado (93,88 DO / 30 μg de proteína), tecido circundante do cancro (24,09 DO / 30 μg de proteína). O câncer de pulmão de pequenas células tem aumentado a atividade da telomerase no estágio inicial, e o câncer de pulmão de não pequenas células tem mais alterações de atividade do que no estágio intermediário. Resultados positivos podem ser doenças: precauções para câncer de pâncreas e câncer de tireoide 1. Preste atenção para evitar contaminação laboratorial e falso positivo ou falso negativo. 2. Preste atenção para remover o inibidor da polimerase contido na amostra de tecido para reduzir falsos negativos. 3. A tecnologia de análise de cintilação, o método ELISA, o método de hibridização in situ são mais confiáveis ​​do que o método TRAP. Processo de inspeção Imediatamente após a coleta das amostras de sangue, elas são enviadas para exame e imunoensaio do tumor. Operação de detecção: O DNA genômico foi de 0,1 μg, tampão contendo 50 mmol / L de cloreto de potássio, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8,4), 1,5 mmol / L de cloreto de magnésio, 100 μg de gelatina, cada iniciador foi 0,25 μmol / L; dATP, dCTP, dGTP O dTIP foi de 200 μmol / L cada, a DNA polimerase foi de 2,5 U e o volume final foi de 100 μl. Adicione algumas gotas de parafina líquida para evitar a evaporação. Ciclo de reac�o: 1 Desnatura�o: 90� durante 30-60 s, temperatura de emparelhamento de 2 iniciadores e matriz: 40-60� 30-60 s, 3 extens�: 72� 1-2 min. Após ciclos repetidos de 30 a 40 vezes, a última extensão de iniciador de 7 ° 72 ° C foi terminada durante 7 minutos. Após a remoção da parafina líquida, o produto está disponível para análise. Após eletroforese em gel de agarose, foi corado com brometo de etídio, e uma faixa fluorescente de comprimento esperado de amplificação foi observada por irradiação com uma lâmpada UV. O produto tamb� pode ser hibridado para uma transfer�cia Southern ou uma mancha com uma sonda oligonucleot�ica radiomarcada ou n� radiomarcada. É mais conveniente usar o instrumento automático PCR Após adicionar o reagente de reação, molde de DNA e polimerase Taq-DNA ao tubo de ensaio, é colocado no procedimento ajustado, isto é, a temperatura, tempo e extensão da temperatura e tempo respectivos e o número de ciclos. A reação é realizada em um instrumento automático para obter um produto de amplificação satisfatório. Não é adequado para a multidão Aqueles que não têm uma indicação para o exame não devem ser testados. Reações adversas e riscos 1. Infecção: Preste atenção à operação asséptica ao coletar sangue, evite a contaminação da água e de outras partes no local da coleta de sangue para evitar infecção local. 2, sangramento: após o sangue é dado um tempo de compressão total, especialmente coagulopatia, tendência a sangramento, para evitar o subcutâneo local oozing, hematomas e inchaço.