Ensaio de imunoabsorção enzimática

O ensaio imunoenzimático é um ensaio imunoenzimático. É usado para detectar o antígeno (ou anticorpo) a ser testado que é revestido no poço da placa de fase sólida. Ou seja, o anticorpo é marcado com uma enzima, e o antígeno ou anticorpo conhecido é adsorvido na superfície do veículo de fase sólida, e a reação antígeno-anticorpo é realizada na superfície do veículo de fase sólida, e o componente livre na fase líquida é lavado e finalmente atuado pela enzima. A cor é desenvolvida após o substrato para avaliar o resultado. A profundidade da reação de cor é proporcional à quantidade do anticorpo ou antígeno correspondente na amostra. Esta reação de cor pode ser quantitativamente determinada por um detector de ELISA, que combina a sensibilidade da reação química da enzima com a especificidade da reação antígeno-anticorpo, tornando o método ELISA um método de detecção específico e sensível. Informação básica Classificação especializada: classificação de verificação de crescimento e desenvolvimento: exame imunológico Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: não jejuar Resultados da análise: Abaixo do normal: Valor normal: Não Acima do normal: Negativo: Normal Positivo: O corpo humano está em equilíbrio dinâmico e estado insalubre. Dicas: Relaxe enquanto verifica. Valor normal O tipo e a proporção da flora no corpo são normais e o corpo humano está em estado de equilíbrio dinâmico e saúde. Significado clínico O ensaio imunoenzimático é a técnica mais utilizada em imunoensaio enzimático. Os métodos ELISA comumente usados ​​incluem um método sanduíche de duplo anticorpo e um método indireto, o primeiro para detectar antígenos macromoleculares e o último para medir anticorpos específicos. Em termos de doenças parasitárias, é usado para diagnóstico sorológico de Plasmodium, Amoeba, Liegemann, Trypanosoma, Esquistossomose, cisticercose, Toxoplasma, Esquistossomose, Artéria hepática, Bloodworm, Triquinose Isso é importante para os médicos e veterinários. Ele tem sido usado para detectar anticorpos contra Streptococcus, Salmonella, Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Haemophilus, Vibrio cholerae, Neisseria gonorrhoeae, Candida, etc., e também pode ser usado para antitoxina tetânica e antitoxina Vibrio cholerae. A determinação e detecção de anticorpos contra a infecção por rickettsia rickettsia pode ser diagnosticada. A Rickettsia também pode ser usada para identificar espécies intimamente relacionadas. Há também relatos de exames de anticorpos contra Chlamydia psittaci. Vírus da gripe, vírus da caxumba, sarampo, rubéola, rotavírus, vírus do herpes, citomegalovírus, vírus da EB, adenovírus, enterovírus, vírus da encefalite, vírus da febre amarela, raiva Tóxico e poliovírus, etc., são mais sensíveis que os métodos de inspeção atualmente utilizados. Em doens imunolicas, existem testes para a deteco de doens auto-imunes e o diagntico de alergias, tais como anticorpos contra vios alergios, anticorpos de ADN e anticorpos de tiroglobulina, anticorpos eritematosos e semelhantes. Na higiene, pode ser usado para detectar a enterotoxina estafilocócica e a toxina da salmonela nos alimentos. Os resultados positivos podem ser doenças: epidermólise bolhosa adquirida, tripanossomíase, esquistossomose e doenças hepatobiliares, esclerite por toxoplasmose, síndrome de Gestman, toxoplasmose congênita neonatal, derrame de fígado, Febre malhada de rickettsia siberiana, piriflagelado intestinal, precauções de diarreia turística 1. Substrato: Várias enzimas têm especificidade para o substrato, portanto o uso de diferentes tipos de enzimas requer diferentes substratos. Uma vez determinado o conjugado enzimático (por exemplo, AP ou HRP), a gama de substratos disponíveis para seleção é muito limitada. Como selecionar um substrato adequado dentro do escopo deste substrato limitado deve ser selecionado de acordo com as seguintes condições: (1) O substrato deve ser incolor antes de ser catalisado pela enzima, e ter cor óbvia após ser catalisado pela enzima. Mudança, para que os resultados possam ser claramente distinguidos, (2) a cor é fácil de secar e eluir, (3) o produto após o desenvolvimento da cor é necessário para ser estável, a substância colorida produzida na determinação quantitativa deve ser solúvel; Barato, fácil de obter e não-tóxico. Portanto, para o conjugado de enzima AP, o nitrofenil fosfato é geralmente usado, e a cor é alaranjada após o desenvolvimento da cor, a cor é estável, a reação é terminada com NaOH 2 mol / L e o valor OD pode ser medido em um comprimento de onda de 403 nm. 2. detergente e mais fino: A fim de maximizar a quantidade de anticorpo especificamente ligado, o antígeno revestido no poço da microplaca deve estar ligeiramente em excesso. No entanto, durante a incubação ou lavagem, alguns dos antígenos adsorvidos podem ser removidos do suporte sólido. Portanto, é provável que a proteína que não seja o anticorpo específico adicionado ao soro teste seja adsorvida ao branco da cavidade revestida com antígeno original, aumentando a cor de fundo e gerando uma reação positiva falsa, que é um fator que limita a especificidade do ELISA. Muitos estudiosos acrescentaram vários agentes protetores aos diluentes e detergentes para inibir a adsorção competitiva de proteínas não específicas. Processo de inspeção O método básico é adsorver um antígeno ou anticorpo conhecido na superfície de um transportador de fase sólida (placa de micro-reação de poliestireno), reagir a reação de antígeno-anticorpo marcada com enzima na superfície da fase sólida e lavar os componentes livres na fase líquida por lavagem. Exceto De acordo com o transportador de fase sólida usado no ELISA, ele é dividido em três tipos: um é ELISA usando microplacas de poliestireno como transportador, que é o ELISA (microplate ELISA) que geralmente se refere, o outro está usando membrana de nitrocelulose como carreador. O ELISA é chamado de ELISA spot (Dot-ELISA), o outro é o ELISA, que utiliza tecido de poliéster hidrofóbico como transportador, chamado ELISA de tecido (C-ELISA). No ELISA da microplaca, divide-se ainda em ELISA indirecto, ELISA em sanduhe de duplo anticorpo, ELISA em sanduhe duplo, ELISA de competio, ELISA de bloqueio e ELISA de captura de anticorpo de acordo com as suas propriedades. Não é adequado para a multidão Não há tabus especiais. Reações adversas e riscos Não há complicações e perigos relacionados.