ensaio de imunofluorescência indireta

Um ensaio de imunofluorescência indireta é um anticorpo que se liga a um anticorpo (aqui referido como anticorpo primário) que se liga a um antígeno e usa um anticorpo correspondente ao anticorpo primário (isto é, um anti- anticorpo) (aqui referido como anticorpo secundário, anticorpo secundário). A molécula de fluoresceína acoplada a ela foi incubada com as células e observada sob um microscópio de fluorescência. Informação básica Classificação do especialista: Exame e classificação das doenças infecciosas: exame imunológico Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: não jejuar Dicas: Não coma alimentos gordurosos e com muita proteína no dia anterior à coleta de sangue, evite beber muito. Valor normal <1:64. Significado clínico Resultados anormais: Um único título sérico de ≥1: 64 ou um aumento de dobra dupla no título sérico ou a presença de anticorpos IgM podem ser diagnosticados como infecção rickettsial. Este método não distingue entre os tipos de rickettsia infectados pelos pacientes. A presença de anticorpos IgM específicos contra as rickettsias sugere uma infecção recente. Pessoas que precisam ser testadas: Infecção congênita por toxoplasma, tifo endêmico, febre, pneumonia por micoplasma pediátrico, brucelose, etc. Precauções Antes da inspeção: Não coma alimentos gordurosos e com muita proteína no dia anterior à coleta de sangue, evite beber muito. O teor de álcool no sangue afeta diretamente os resultados do teste. Após as 20 horas do dia anterior ao exame médico, o jejum deve ser feito para evitar a detecção de indicadores como glicose no segundo céu. Ao verificar: Deve relaxar, evitar a contração dos vasos sanguíneos causada pelo medo, aumentar a dificuldade de coleta de sangue. Processo de inspeção 1. Adicione 0,01 mol / L, pH 7,4 PBS à amostra a ser testada e descarte-a após 10 minutos para manter a amostra em uma determinada umidade. 2. Adicione a solução de anticorpo adequadamente marcada fluorescentemente diluída para cobrir completamente a amostra e coloque-a em uma caixa de esmalte coberta por um determinado período de tempo (referência: 30 min). 3. Remova a lâmina e coloque-a no porta-lâminas, enxágue com 0,01 mol / L, pH 7,4 PBS e mergulhe em PBS de três cilindros com 0,01 mol / L, pH 7,4, 3-5 min por cilindro. , de tempos em tempos oscilar. 4. Remova a lâmina e use um papel de filtro para remover o excesso de água, mas não seque a amostra, adicione uma gota de glicerina tamponada e cubra com uma lamínula. 5. Observe imediatamente com um microscópio de fluorescência. Observe a intensidade de fluorescência específica da amostra, que geralmente pode ser expressa por "+": (-) sem fluorescência; (±) fluorescência suspeita muito fraca; (+) fluorescência fraca, mas claramente visível; (++) fluorescente brilhante; (+++ - ++++) fluorescente brilhante. A intensidade de fluorescência específica da amostra a ser testada é "++" ou mais, e os vários controles são (±) ou (-), que podem ser julgados como positivos. Não é adequado para a multidão Não há tabus. Reações adversas e riscos Não há complicações e perigos relacionados.