Teste de neutralização

O Teste de Neutralização baseia-se na determinação da infecciosidade do vírus e na capacidade do soro imunitário para neutralizar o vírus, com base na comparação da infecciosidade residual do vírus após neutralização pelo soro imunitário. Quando um animal é infectado com um vírus, um anticorpo neutralizante específico é produzido no corpo e se liga especificamente ao virion correspondente, evitando assim que o vírus adsorve à célula sensível ou inibindo sua invasão, de modo que o vírus perde sua capacidade de infectar. Informação básica Classificação do especialista: Exame e classificação das doenças infecciosas: exame imunológico Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: não jejuar Resultados da análise: Abaixo do normal: Valor normal: Não Acima do normal: Negativo: Menos de 10 é negativo e não tem vírus. 10 a 49 são suspeitos. Positivo: Geralmente, um índice de neutralização maior que 50 é considerado positivo e um vírus está presente. Dicas: Preste atenção aos hábitos alimentares normais e preste atenção à higiene pessoal. Valor normal Método do vírus de diluição do soro fixo: Para vírus, geralmente o índice de neutralização é maior que 50, e 10 a 49 são suspeitos, e menos de 10 é negativo. Valor normal do teste de neutralização: o corpo humano está em equilíbrio dinâmico e estado saudável. Significado clínico Este teste é usado principalmente para detectar anticorpos do soro a ser testado, ou para detectar vírus do material da doença, diagnosticando infecções virais, 2 para verificar as toxinas nos materiais com soro antitoxina ou para identificar o tipo de toxinas na bactéria; Soro viral ou título de antitoxina; 4 Identificação e tipificação de vírus recém-isolados; o teste de neutralização pode ser realizado não apenas em animais experimentais suscetíveis, mas também em culturas de células ou embriões de galinha. Os métodos de teste incluem principalmente teste qualitativo simples, método do vírus de diluição do soro fixo, método do soro de diluição de vírus fixo e método de redução de placa. Os resultados positivos podem ser doenças: caxumba, AIDS, dengue, encefalite japonesa, erupção do vírus Coxsackie, febre aftosa, precauções contra a raiva Proibido antes do exame: Preste atenção aos hábitos alimentares normais e preste atenção à higiene pessoal. Exigências para inspeção: cooperar ativamente com o doutor. Processo de inspeção (1) Teste qualitativo de neutralização simples Este método é usado principalmente para detectar o vírus no material da doença e também pode ser inicialmente identificado ou finalizado. Os animais de teste (ou embriões de galinha, cultura de células) e as rotas de inoculação são primeiro seleccionados com base na susceptibilidade viral. O material é moído e diluído até uma certa concentração (cerca de 100 LD50 ~ 1000 LD50 ou TCID50). Os materiais contaminados precisam ser adicionados antibióticos (200 a 1000 unidades de penicilina e estreptomicina) ou filtrados com um filtro bacteriano, misturados com anti-soro conhecido (adequadamente diluído ou não diluído) e diluídos com soro normal Para comparação. Após a mistura, as células foram inoculadas a 37 ° C durante 1 h e pelo menos 3 animais em cada grupo. Isolamento alimentar, observação de morbidade e mortalidade. Os animais de controlo morreram, enquanto os animais no grupo de neutralização não morreram, o que confirmou que a doença continha o vírus correspondente ao anti-soro. Este método também pode ser usado para a identificação e digitação de toxinas (como toxinas). (2) Método do vírus de diluição do soro fixo Neste método, o vírus foi diluído 10 vezes em incrementos, e dois tubos foram colocados, a primeira coluna foi adicionada com soro normal (grupo de controlo) e a segunda coluna foi adicionada com soro a ser testado (grupo de teste). Após a mistura, as células foram inoculadas a 37 ° C durante 1 h, e cada mistura de tubos foi inoculada separadamente nos animais de teste seleccionados e foram utilizados 3 a 5 animais para cada diluição. Após a inoculação, observar diariamente e registrar o número de mortes e, após a observação, calcular o LD50 e o índice de neutralização (Tabela 7-1, Tabela 7-2), método aplicável para a detecção de um grande número de amostras. Este método é usado principalmente para detectar anticorpos neutralizantes no soro a ser testado.Para vírus, o índice de neutralização é geralmente superior a 50 e é positivo, 10 a 49 é suspeito, e menos de 10 é negativo. (3) método de soro de diluição de vírus fixo Este método é usado para determinar o preço de neutralização do soro antiviral, o soro a ser testado é diluído 2 vezes e a solução do vírus com o mesmo valor tóxico adicionado (misturado com o soro, cada dose contém o vírus 100LD50), agitar bem. Os animais de teste foram inoculados a 37 ° C durante 1 h. Nota: [1] Dose de inoculação 0,1 ml, contendo vírus 100LD50. [2] refere-se à diluição após a mistura com o vírus. [3] O denominador é o número de inoculações, e o numerador é o número de proteção. [4] PD50 é meia proteção, e seu método de cálculo é o mesmo que o cálculo LD50. (4) método de redução de placa O teste de neutralização do vírus foi realizado em cultura de células e, nos últimos anos, o método de redução de placa foi utilizado com freqüência. Primeiro, o vus diluo para uma concentrao apropriada, de modo que 80 a 100 PFU (unidade formadora de placas) por 0,2 ml sejam misturados com as diferentes diluies do soro a ser testado e colocados a 37 durante 1 h a 2 h para medir PFU, respectivamente. Uma diluição de 50% no soro da placa é o preço de neutralização do soro. Veja a Tabela 7-4. Tabela 7-4 Exemplo de teste de neutralização para método de redução de placa Nota: [1] O soro foi diluído em incrementos de 4 vezes. [2] A placa é reduzida em 50% da diluição do soro e o método de cálculo é o mesmo que o cálculo do LD50. Não é adequado para a multidão Pessoas com função hematopoiética reduzida, como leucemia, anemia variada, síndrome mielodisplásica ou pessoas com trombocitopenia devem prestar atenção à coleta de sangue e não devem tomar mais ou mais sangue. Reações adversas e riscos 1. Depois de retirar o sangue, não pressione o orifício da agulha para evitar o hematoma subcutâneo. Se houver um pequeno pedaço de hematoma no sangue, é ligeiramente sensível, por favor não entre em pânico, você pode fazer compressa quente após 24 horas para promover a absorção do sangue. A pequena quantidade geral de congestionamento irá gradualmente absorver em 3 a 5 dias e a cor ficará mais clara e retornará ao normal. 2. Após a coleta de sangue, sintomas como tontura, vertigem, fadiga, etc. devem estar imediatamente em posição supina, beber uma pequena quantidade de xarope e depois passar por um exame físico após o alívio dos sintomas.