Telomeras

Telomeras är ett speciellt omvänt transkriptas som består av RNA och protein involverat i syntesen av telomerer (en specifik nukleotidsekvens och struktur) vid DNA-ändarna av eukaryota celler. Telomerlängden för normala somatiska celler förkortas gradvis när cellen delar sig, och telomerasaktiviteten förbättras, och telomerens längd kan bibehållas utan att förkortas, så att cellerna kan spridas och bli cancerösa. Därför kan telomerasdetektering och dess hämmare användas för tumördiagnos och behandling. Grundläggande information Specialklassificering: Klassificering av onkologiundersökningar: immunundersökning Tillämpligt kön: om män och kvinnor tillämpar fasta: inte fasta Analysresultat: Under normala: Normalt värde: ingen Över normal: negativt: Normalt negativt. positivt: Litencells lungcancer har ökat telomerasaktiviteten i ett tidigt skede, och icke-småcellig lungcancer har mer aktivitetsförändringar än i mitten. Tips: Håll ett normalt tankesätt. Normalt värde Negativ. Klinisk betydelse Det är lämpligt för diagnos och differentiell diagnos av olika tumörsjukdomar. Höjd: levercancer (93,88 OD / 30 μg protein), cancer omgivande vävnad (24,09 OD / 30 μg protein). Litencells lungcancer har ökat telomerasaktiviteten i ett tidigt skede, och icke-småcellig lungcancer har mer aktivitetsförändringar än i mitten. Positiva resultat kan vara sjukdomar: försiktighetsåtgärder mot bukspottkörtelcancer och sköldkörtelcancer 1. Var uppmärksam på att förhindra laboratoriekontaminering och falskt positivt eller falskt negativt. 2. Var uppmärksam på att ta bort polymerasinhibitorn i vävnadsprovet för att minska falska negativa effekter. 3. Scintillationsanalyssteknologi, ELISA-metod, hybridiseringsmetod in situ är mer tillförlitliga än TRAP-metoden. Inspektionsprocess Omedelbart efter att blodproverna har samlats in skickas de för undersökning och tumörimmunoanalys. Detekteringsoperation: Genomiskt DNA var 0,1 μg, buffert innehållande 50 mmol / L kaliumklorid, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8,4), 1,5 mmol / L magnesiumklorid, 100 μg gelatin, varje primer var 0,25 μmol / L; dATP, dCTP, dGTP DTIP var 200 mikromol / l vardera, DNA-polymeraset var 2,5 U och den slutliga volymen var 100 ul. Tillsätt några droppar flytande paraffin för att förhindra avdunstning. Reaktionscykel: 1 Denaturering: 90 ° C i 30-60 s, glödgningstemperatur för 2 primrar och mall: 40-60 ° C 30-60 s, 3 förlängning: 72 ° C 1-2 min. Efter upprepade cykler av 30 till 40 gånger avslutades den sista 7 ° 72 ° C-förlängningen i 7 minuter. Efter avlägsnande av det flytande paraffinet är produkten tillgänglig för analys. Efter elektrofores på agarosgel färgades den med etidiumbromid, och en fluorescerande remsa med förväntad amplifieringslängd observerades genom bestrålning med en UV-lampa. Produkten kan också hybridiseras till en Southern blot eller en spot blot med en radiomärkt eller icke-radiomärkt oligonukleotidsond. Det är mer bekvämt att använda det automatiska PCR-instrumentet. Efter tillsats av reaktionsreagens, DNA-mall och Taq-DNA-polymeras i provröret sätts det in i den justerade proceduren, det vill säga den erforderliga temperaturen, tiden och förlängningstiderna krävs. Reaktionen utförs i ett automatiskt instrument för att erhålla en tillfredsställande amplifieringsprodukt. Inte lämplig för publiken De som inte har en indikation för undersökning bör inte testas. Biverkningar och risker 1. Infektion: Var uppmärksam på aseptisk operation vid uppsamling av blod, undvik förorening av vatten och andra delar på bloduppsamlingsplatsen för att undvika lokal infektion. 2, blödning: efter att blodet har fått en fullständig komprimeringstid, särskilt koagulopati, blödningstendens, för att undvika lokal subkutan oser, blåmärken och svullnad.