Enzym kombinerad sorptionsanalys

Enzymbunden immunosorbentanalys (nedan kallad ELISA) är den mest använda tekniken för enzymimmunoanalys. Det används för att detektera antigenet (eller antikroppen) som ska testas som är belagt i brunnen på den fasta fasplattan. Det vill säga antikroppen är märkt med ett enzym, och den kända antigenen eller antikroppen adsorberas på ytan av fastfasbäraren, och antigen-antikroppsreaktionen utförs på ytan av fastfasbäraren, och den fria komponenten i vätskefasen tvättas bort genom tvättning och slutligen påverkas av enzymet. Färgen utvecklas efter underlaget för att bedöma resultatet. Grundläggande information Specialistklassificering: klassificering av tillväxt och utveckling: biokemisk undersökning Tillämpligt kön: om män och kvinnor tillämpar fasta: fasta Tips: Följ läkarens instruktioner när du kontrollerar. Normalt värde Förhållandet mellan serumet som skulle testas och det kända negativa serumet (P / N) var <2,1 och OD-värdet för serumet som skulle testas var <0,4, vilket bedömdes vara negativt. Klinisk betydelse Onormala resultat: förhållandet mellan serum som ska testas och känt negativt serum (P / N) ≥ 2,1, och OD-värdet för serum som ska testas är 0,4, det anses positivt. Behöver kontrollera publiken: upptäck antigen och antikropp. försiktighetsåtgärder Kontraindikationer före inspektion: Förbered olika förpackningslösningar och ställ in koncentrationen. Tabu vid kontroll: 1. Strikt kontrollfaktorer som påverkar märkningens effektivitet såsom temperatur, tid, pH, enzym och antikroppsmängd. 2. När du installerar kolonnen, gör kolonnen enhetlig, cylinderytan är plan, inga bubblor eller sprickor. Inspektionsprocess Vanligt använda ELISA-metoder inkluderar en dubbel antikroppssandwichmetod och en indirekt metod, den förra för att detektera makromolekylära antigener och den senare för att mäta specifika antikroppar. Indirekt ELISA Denna metod används huvudsakligen för att detektera antikroppar. Förfarandet för indirekt ELISA är som följer. (1) Material 1 beläggningsvätska, tvättvätska, värmeskyddsvätska, substratvätska och stoppvätska. 2DVH-belagt antigen, enzymmärkt antikropp, negativt och positivt DVH-referensserum. 3 ELISA-detektor, provtagare, polystyrenmikroplatta. (2) Metodsteg 1 plus antigenbeläggning → 4 ° C över natt, tvättas tre gånger, kasta torrt. 2 plus serum som ska testas → 37 ° C i 2 timmar, tvättas tre gånger, kasta torrt. 3 Tillsätt den enzymmärkta antikroppen → 37 ° C i 2 timmar, tvätta tre gånger, kasta torrt. 4 Lägg till substratlösning → 37 ° C i 30 minuter, tillsätt stopplösning. 5 OD-värdet mättes med en ELISA-detektor, och P / N-förhållandet beräknades. 2. ELISA med dubbel antikroppsmörgås Denna metod används huvudsakligen för att detektera makromolekylära antigener. 1 Tillsätt antikroppsbeläggning → 4 ° C över natt, tvätta tre gånger, kasta torrt. 2 Tillsätt antigenet som ska testas → 37 ° C i 30 minuter, tvätta tre gånger, kasta torrt. 3 Tillsätt den enzymmärkta antikroppen → 37 ° C i 30 minuter, tvätta tre gånger, kasta torrt. 4 Lägg till substratlösning → 37 ° C i 15 minuter, tillsätt stopplösning. 5 OD-värdet mättes med en ELISA-testare. Inte lämplig för publiken Inte lämplig för publiken: nej. Biverkningar och risker Inga relaterade komplikationer eller faror.