Neutraliseringstest

Neutraliseringstestet är baserat på bestämningen av virusets infektivitet och immunserumets förmåga att neutralisera viruset baserat på jämförelsen av virusets resterande infektivitet efter neutralisering av immunserumet. När ett djur är infekterat med ett virus, produceras en specifik neutraliserande antikropp i kroppen och binder specifikt till motsvarande virion, vilket förhindrar viruset från att adsorbera till den känsliga cellen eller hämma dess invasion, så att viruset förlorar sin förmåga att infektera. Grundläggande information Specialklassificering: Undersökning och klassificering av infektionssjukdomar: immunologisk undersökning Tillämpligt kön: om män och kvinnor tillämpar fasta: inte fasta Analysresultat: Under normala: Normalt värde: ingen Över normal: negativt: Mindre än 10 är negativa och inget virus. 10 till 49 är misstänkta. positivt: I allmänhet anses ett neutraliseringsindex större än 50 vara positivt och ett virus finns. Tips: Var uppmärksam på normala matvanor och var uppmärksam på personlig hygien. Normalt värde Fast serumutspädningsvirusmetod: För virus är vanligtvis neutraliseringsindex större än 50 och 10 till 49 är misstänkta och mindre än 10 är negativt. Neutraliseringstestens normala värde: människokroppen är i en dynamisk jämvikt och ett hälsosamt tillstånd. Klinisk betydelse Detta test används huvudsakligen för att upptäcka antikroppar från serumet som ska testas, eller för att upptäcka virus från sjukdomsmaterialet och därigenom diagnostisera virusinfektioner; 2 för att kontrollera toxinerna i materialen med antitoxinserum eller för att identifiera typen av toxiner i bakterierna; Viralt serum eller antitoxintiter; 4 Identifiering och typning av nyligen isolerade virus, neutraliseringstest kan utföras inte bara på mottagliga försöksdjur, utan också på cellodling eller kycklingembryon. Testmetoderna innefattar huvudsakligen enkelt kvalitativt test, metod med fast serumutspädningsvirus, serummetod med fixerad virusutspädning och metod för reducering av plack. Positiva resultat kan vara sjukdomar: kusma, AIDS, denguefeber, japansk encefalit, Coxsackievirusutslag, mul- och klövsjuka, rabiesåtgärder Förbjudet före undersökning: Var uppmärksam på normala matvanor och var uppmärksam på personlig hygien. Krav för inspektion: Samarbeta aktivt med läkaren. Inspektionsprocess (1) Enkelt kvalitativt neutraliseringstest Denna metod används huvudsakligen för att upptäcka viruset i sjukdomsmaterialet och kan också initialt identifieras eller slutföras. Testdjur (eller kycklingembryon, cellodling) och inokuleringsvägar väljs först baserat på viral känslighet. Materialet males och utspädes till en viss koncentration (cirka 100 LD50 ~ 1000 LD50 eller TCID50). Kontaminerade material måste tillsättas antibiotika (200 till 1000 enheter penicillin och streptomycin) eller filtreras med ett bakteriefilter, blandas med känt antiserum (lämpligt utspädd eller inte utspädd) och spädas med normalt serum För jämförelse. Efter blandning ympades cellerna vid 37 ° C under 1 timme och minst 3 djur i varje grupp. Isolering utfodring, observation av sjuklighet och dödlighet. Kontrolldjuren dog medan djuren i neutraliseringsgruppen inte dog, vilket bekräftade att sjukdomen innehöll viruset motsvarande antiserumet. Denna metod kan också användas för identifiering och typ av toxiner (t.ex. toxiner). (2) Fast serumutspädningsvirusmetod I denna metod späddes viruset 10 gånger i steg och två rör placerades, den första kolonnen tillsattes med normalt serum (kontrollgrupp) och den andra kolonnen tillsattes med serum som skulle testas (testgrupp). Efter blandning ympades cellerna vid 37 ° C under 1 timme, och varje rörblandning ympades separat i de utvalda testdjuren och 3 till 5 djur användes för varje utspädning. Efter inokulering, observera dagligen och registrera antalet dödsfall. Beräkna LD50 och neutraliseringsindexet efter observationen (tabell 7-1, tabell 7-2). Denna metod är tillämplig för detektering av ett stort antal prover. Denna metod används mest för att detektera neutraliserande antikroppar i serumet som ska testas. För virus är neutraliseringsindexet vanligtvis större än 50 och är positivt, 10 till 49 är misstänkta och mindre än 10 är negativt. (3) Serummetod för fixerad virusspädning Denna metod används för att bestämma neutraliseringspriset för antiviralt serum. Serumet som ska testas utspädes 2 gånger och viruslösningen med samma toxiska värde tillsätts (blandat med serum, varje dos innehåller virus 100LD50), skaka väl. Testdjuren ympades vid 37 ° C under 1 timme. Obs! [1] Inokuleringsdos 0,1 ml, innehållande virus 100LD50. [2] hänvisar till utspädningen efter blandning med viruset. [3] Nämnaren är antalet ympningar, och täljaren är antalet skydd. [4] PD50 är halvskyddat, och dess beräkningsmetod är densamma som LD50-beräkning. (4) plackreduktionsmetod Virusneutralisationstestet utfördes på cellkultur, och under senare år användes ofta plackreduktionsmetoden. Först utspädes viruset till en lämplig koncentration, så att 80 till 100 PFU (plackbildande enhet) per 0,2 ml blandas med de olika spädningarna av serumet som ska testas och placeras vid 37 ° C under 1 timme till 2 timmar för att mäta PFU. En 50% serumutspädning av plack är serumets neutraliseringspris. Se tabell 7-4. Tabell 7-4 Exempel på neutralisationstest för metod för reduktion av plack Obs! [1] Serum späddes i steg om fyra gånger. [2] Plaket reduceras med 50% av serumutspädningen, och beräkningsmetoden är densamma som beräkningen av LD50. Inte lämplig för publiken Personer med nedsatt hematopoietisk funktion såsom leukemi, olika anemi, myelodysplastiskt syndrom eller personer med trombocytopeni bör uppmärksamma bloddragningen och bör inte ta mer eller mer blod. Biverkningar och risker 1. Tryck inte på nålhålet efter att blodet har dragits för att undvika subkutant hematom. Om det finns en liten bit blåmärke i blodet, är det något ömt, vänligen inte få panik, du kan göra en varm komprimering efter 24 timmar för att främja absorptionen av blod. Den allmänna lilla trängseln absorberas gradvis inom 3 till 5 dagar och färgen blir ljusare och återgår till det normala. 2. Efter att blodet har dragits, bör symtom som yrsel, svindel, trötthet etc. omedelbart ligga på ryggen, dricka en liten mängd sirap och sedan genomgå en fysisk undersökning efter att symtomen har lindrats.