β-N-อะซิติลกลูโคซามินิเดส

hydro-N-acetylglucosaminidase (NAG) ไฮโดรไลซ์β-N-acetylglucosaminide และยังไฮโดรไลซ์β-N-acetylgalactosamine เอนไซม์นี้มีอยู่อย่างกว้างขวางในเนื้อเยื่ออวัยวะของเหลวในร่างกายและเซลล์เม็ดเลือดต่างๆและเป็นกรดไฮโดรเลสในไลโซโซม วิธีการวัด ได้แก่ colorimetry และ fluorometry ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกการตรวจปัสสาวะ: การตรวจทางชีวเคมี บังคับเพศ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: การอดอาหาร ผลการวิเคราะห์: ต่ำกว่าปกติ: หายาก ค่าปกติ: เซรั่มβ-N-acetylglucosaminidase: 15.14-27.94 U / L เหนือปกติ: โรคไตท่อโลหะหนัก (ปรอท, ตะกั่ว, แคดเมียม ฯลฯ ) และความเสียหายของไตที่เกิดจากยา, ขาดเลือด, ขาดออกซิเจน, การสูญเสียเลือด, การกระแทก, ฯลฯ อาจทำให้กิจกรรมของ NAG เพิ่มขึ้น เชิงลบ: บวก: เคล็ดลับ: ตามภาวะโภชนาการของร่างกายนมไข่ผลไม้นมถั่วเหลือง ฯลฯ จะได้รับในมื้ออาหาร ค่าปกติ 1, p-nitrophenol วิธีการวัดสี: เซรั่ม NAG21.54 ± 6.4U / L, NAG ปัสสาวะมีการกระจายตามปกติค่ามัธยฐานคือ 9.13U / g creatinine, ขีด จำกัด ของเปอร์เซ็นไทล์ 95th คือ 16.10U / g creatinine 2. วิธีการเรืองแสง: เซรั่มสำหรับผู้ใหญ่: 9.94 ± 2.O7U / ลิตร ปัสสาวะผู้ใหญ่: 6.39 ± 3.19 U / LC ความสำคัญทางคลินิก ความมุ่งมั่นของกิจกรรม NAG ในเลือดและปัสสาวะมีความไวต่อการเปลี่ยนแปลงของรอยโรคเนื้อเยื่อไตโดยเฉพาะอย่างยิ่งการบาดเจ็บเฉียบพลันและโรคที่ใช้งานและส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการตรวจสอบการบาดเจ็บของไตในช่วงต้นและการสังเกตโรค 1, โรคไตท่อโลหะหนัก (ปรอท, ตะกั่ว, แคดเมียม ฯลฯ ) และความเสียหายของไตที่เกิดจากยา, ขาดเลือด, ขาดออกซิเจน, การสูญเสียเลือด, การกระแทก, ฯลฯ สามารถทำให้กิจกรรม NAG เพิ่มขึ้น 2, กลุ่มอาการของโรคไต NAG ปัสสาวะมักจะเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญระยะเวลาการให้อภัยลดลงกู้คืนอย่างรวดเร็วเมื่อเกิดขึ้นอีกก็สามารถใช้เป็นข้อบ่งชี้สำหรับการสังเกตทางคลินิก ระยะเฉียบพลันของ glomerulonephritis มีความแตกต่างกันอย่างมาก แต่การเปลี่ยนแปลงนั้นเล็กกว่าการบาดเจ็บของท่อไต 3 สถานที่ตั้งของการวินิจฉัยการติดเชื้อทางเดินปัสสาวะของ pyelonephritis เฉียบพลันและเรื้อรังปัสสาวะ NAG เพิ่มขึ้นสามารถแตกต่างจากโรคกระเพาะปัสสาวะอักเสบที่เรียบง่าย สามารถใช้สำหรับการวินิจฉัยการติดเชื้อทางเดินปัสสาวะส่วนบน 4 การปฏิเสธการปลูกถ่ายไตการตรวจสอบการปฏิเสธการปลูกถ่ายไตต้น NAG สามารถเพิ่มขึ้นได้ไวกว่าโปรตีนในปัสสาวะ, creatinine เซรั่มกวาดล้าง creatinine 5, การวินิจฉัยในช่วงต้นของโรคไตโรคเบาหวาน, โรคไตโรคเบาหวาน, ปัสสาวะ NAG สูง, การวินิจฉัยในช่วงต้นของโรคนี้จะดีกว่า albumin ปัสสาวะและβ2-microglobulin ผลลัพธ์ที่สูงอาจเป็นโรค: กลุ่มอาการของโรคไต, การติดเชื้อทางเดินปัสสาวะ (1) วิธีการวัดสี p-nitrophenol: 1 p-nitrophenol สารตั้งต้นควรได้รับการทำให้บริสุทธิ์และผ่านการขึ้นรูปล่วงหน้าที่ 50 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ความเข้มข้นถูกปรับเป็น 0.04 mmol / L โดย 10 mmol / L NaOH และสแกนเส้นโค้งการดูดกลืนด้วยเครื่องสเปกโทรโฟโตมิเตอร์แบบแบนด์วิธแคบλmax = 401 นาโนเมตรตามมาตรฐาน IFCC, Aλmax = 0.7316 ถึง 0.7388 และEλmax = 18380 ± 90 (25 ° C) 2 ความสามารถในการละลายของสารตั้งต้นมีขนาดเล็กเมื่อทำการเตรียมควรปรับให้เป็นครีมที่มีบัฟเฟอร์ pH 4.6 ในปริมาณที่เหมาะสมจากนั้นค่อยๆเพิ่มบัฟเฟอร์ลงในปริมาณที่ต้องการ 3 เมื่อผลการวัดอยู่ในช่วงอัลตร้าเชิงเส้นตัวอย่างจะต้องเจือจางด้วยน้ำเกลือทางสรีรวิทยาและทดสอบซ้ำผลลัพธ์จะถูกคูณด้วยปัจจัยเจือจาง 4 ความเข้มข้นของเอนไซม์ในปัสสาวะได้รับผลกระทบอย่างมากจากปริมาตรของปัสสาวะควรเก็บรักษาปริมาณปัสสาวะ 24 ชั่วโมง หากอัตราการขับถ่ายของเอนไซม์คำนวณโดยอัตราส่วนของ NAG / g creatinine นั่นคือจะไม่ได้รับผลกระทบจากความเข้มข้นหรือการเจือจางของปัสสาวะและไม่จำเป็นต้องออกจากปัสสาวะ 24 ชั่วโมง (2) วิธีการเรืองแสง: 1 วิธีการเรืองแสงสำหรับการวัด NAG มีชุดในประเทศซึ่งมีความไวสูงและไม่ได้รับผลกระทบจากปัสสาวะ 2 นอกจากนี้ยังสามารถใช้กับโรงงานเครื่องมือวิเคราะห์เซี่ยงไฮ้หมายเลข 3 เพื่อผลิตโฟโตมิเตอร์ฟลูออเรสเซนต์ 930 ตัวกรองการกระตุ้น 360 และตัวกรองการปล่อย (400 + 450) คอมโพสิตด้วยผลลัพธ์ที่น่าพอใจ 3 ความเข้มข้นของแต่ละองค์ประกอบในสารละลายปฏิกิริยาเอนไซม์คือ: 1.33 มิลลิโมล / ลิตรของสารตั้งต้น, กรดซิตริก 20 มิลลิโมล / ลิตรและ Na2HPO 432 มิลลิโมล / ลิตร 4 ตัวทำละลายที่ใช้ในรีเอเจนต์ควรเป็นน้ำกลั่นสารตั้งต้นควรปราศจาก 4-MU, BSA ควรปราศจากเอนไซม์หรือให้ความร้อนที่ 50 ° C เป็นเวลา 2 ชั่วโมง 5 NAG ในซีรัมมีความเสถียรเป็นเวลาหลายชั่วโมงถึงหลายวันที่ 4 ° C และคงที่เป็นเวลาหลายเดือนที่ -20 ° C ตัวอย่างปัสสาวะมีความเสถียรที่ 4 ° C เป็นเวลา 1 สัปดาห์และใช้ anticoagulated plasma ซิเตรตเช่นกัน 6β-N-acetylglucosaminide สามารถเร่งปฏิกิริยาได้โดยเอนไซม์สองตัวอันแรกคือβ-N-acetylglucosaminidase (EC 3.2.1.30) และอีกอันคือ is-N-acetylglucosidase (EC3) .2.1.52) สามารถกำหนดได้เฉพาะ EC3.2.1.30 หรือ EC3.2.1.52 สำหรับเอนไซม์บริสุทธิ์ NAG ซึ่งมักถูกอ้างถึงในวรรณกรรมในประเทศนั้นได้รับการตั้งชื่ออย่างเข้มงวดหลังจากใช้สารตั้งต้นมากกว่าความจำเพาะของเอนไซม์สำหรับสารตั้งต้น ดังนั้นวรรณคดีต่างประเทศในปัจจุบันจึงมักเรียกว่าβ-N-acetylglucosaminidase กระบวนการตรวจสอบ (1) การผสมสี p-nitrophenol ที่ความยาวคลื่น 405 นาโนเมตร, เส้นทางแสง 1 ซม., ศูนย์น้ำกลั่น, อ่านค่าการดูดกลืนแสงของแต่ละหลอดและตรวจสอบเส้นโค้งมาตรฐานด้วยความแตกต่างของ (AU-AC) 1 p-nitrophenol สารตั้งต้นควรได้รับการทำให้บริสุทธิ์และผ่านการขึ้นรูปล่วงหน้าที่ 50 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ความเข้มข้นถูกปรับเป็น 0.04 mmol / L โดย 10 mmol / L NaOH และสแกนโค้งด้วยการดูดกลืนแสงด้วยสเปกโทรโฟโตมิเตอร์แบนด์วิธแคบλmax = 401 นาโนเมตรตามมาตรฐาน IFCC, Aλmax = 0.7316 ถึง 0.7388 และEλmax = 18380 ± 90 (25 ° C) สัมประสิทธิ์การดูดกลืนของเม็ดกรามตาม p-nitrophenol 2 ความสามารถในการละลายของสารตั้งต้นมีขนาดเล็กเมื่อทำการเตรียมควรปรับให้เป็นครีมที่มีบัฟเฟอร์ pH 4.6 ในปริมาณที่เหมาะสมจากนั้นค่อยๆเพิ่มบัฟเฟอร์ลงในปริมาณที่ต้องการ 3 เมื่อผลการวัดอยู่ในช่วงอัลตร้าเชิงเส้นตัวอย่างจะต้องเจือจางด้วยน้ำเกลือทางสรีรวิทยาและทดสอบซ้ำผลลัพธ์จะถูกคูณด้วยปัจจัยเจือจาง 4 ความเข้มข้นของเอนไซม์ในปัสสาวะได้รับผลกระทบอย่างมากจากปริมาตรของปัสสาวะควรเก็บรักษาปริมาณปัสสาวะ 24 ชั่วโมง หากอัตราการขับถ่ายของเอนไซม์คำนวณโดยอัตราส่วนของ NAG / g creatinine นั่นคือจะไม่ได้รับผลกระทบจากความเข้มข้นหรือการเจือจางของปัสสาวะและไม่จำเป็นต้องออกจากปัสสาวะ 24 ชั่วโมง (2) สเปคโตรโฟโตสโคปสเปกโตรโฟโตมิเตอร์: ซีรั่มเจือจางหรือปัสสาวะในตอนแรกโดยไม่มีบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยบูวีนเซรั่มอัลบูมิน (BSA), ผสมความยาวคลื่นกระตุ้นคือ 364 นาโนเมตรความยาวคลื่นการปล่อยคือ 448 นาโนเมตรเพื่อหยุดการปรับศูนย์ของเหลวและความเข้มของการเรืองแสงของหลอด 6 μmol / L 4-MU ถูกปรับให้เป็น 100 และความเข้มของแสงของหลอดเปล่าและหลอดวัด 1 วิธีการเรืองแสงสำหรับการวัด NAG มีชุดในประเทศซึ่งมีความไวสูงและไม่ได้รับผลกระทบจากปัสสาวะ 2 นอกจากนี้ยังสามารถใช้กับโรงงานเครื่องมือวิเคราะห์เซี่ยงไฮ้หมายเลข 3 เพื่อผลิตโฟโตมิเตอร์ฟลูออเรสเซนต์ 930 ตัวกรองการกระตุ้น 360 และตัวกรองการปล่อย (400 + 450) คอมโพสิตด้วยผลลัพธ์ที่น่าพอใจ 3 ความเข้มข้นของแต่ละองค์ประกอบในสารละลายปฏิกิริยาเอนไซม์คือ: 1.33 มิลลิโมล / ลิตรของสารตั้งต้น, กรดซิตริก 20 มิลลิโมล / ลิตรและ Na2HPO 432 มิลลิโมล / ลิตร 4 ตัวทำละลายที่ใช้ในรีเอเจนต์ควรเป็นน้ำกลั่นสารตั้งต้นควรปราศจาก 4-MU, BSA ควรปราศจากเอนไซม์หรือให้ความร้อนที่ 50 ° C เป็นเวลา 2 ชั่วโมง 5 NAG ในซีรัมมีความเสถียรเป็นเวลาหลายชั่วโมงถึงหลายวันที่ 4 ° C และคงที่เป็นเวลาหลายเดือนที่ -20 ° C ตัวอย่างปัสสาวะมีความเสถียรที่ 4 ° C เป็นเวลา 1 สัปดาห์และใช้ anticoagulated plasma ซิเตรตเช่นกัน 6β-N-acetylglucosaminide สามารถเร่งปฏิกิริยาได้โดยเอนไซม์สองตัวอันแรกคือβ-N-acetylglucosaminidase (EC 3.2.1.30) และอีกอันคือ is-N-acetylglucosidase (EC3) .2.1.52) สามารถกำหนดได้เฉพาะ EC3.2.1.30 หรือ EC3.2.1.52 สำหรับเอนไซม์บริสุทธิ์ NAG ซึ่งมักถูกอ้างถึงในวรรณกรรมในประเทศนั้นได้รับการตั้งชื่ออย่างเข้มงวดหลังจากใช้สารตั้งต้นมากกว่าความจำเพาะของเอนไซม์สำหรับสารตั้งต้น ดังนั้นวรรณคดีต่างประเทศในปัจจุบันจึงมักเรียกว่าβ-N-acetylglucosaminidase