การทดสอบอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ทางอ้อมสำหรับมาลาเรีย

มีวิธีการวินิจฉัยทางซีรัมวิทยาหลายประการสำหรับไข้มาลาเรียส่วนนี้แนะนำการทดสอบอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ทางอ้อมที่ใช้กันทั่วไปเท่านั้น ผู้ที่ต้องได้รับการตรวจ: ผู้ที่มีอาการหนาวสั่นอย่างเห็นได้ชัดร่างกายสั่นผิวซีดริมฝีปากริมฝีปากสีเขียวผิวแห้งหงุดหงิดปวดศีรษะปวดศีรษะไม่สบายเบื่ออาหารและอาการอื่น ๆ ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การตรวจโรคติดเชื้อและการจำแนกประเภท: การตรวจเลือด บังคับเพศ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: การอดอาหาร ผลการวิเคราะห์: ต่ำกว่าปกติ: ค่าปกติ: ไม่ เหนือปกติ: เชิงลบ: ติดลบ <1:20 แสดงว่าไม่มีการติดเชื้อมาลาเรีย บวก: อัตราการตรวจจับในเชิงบวกของวิธีแอนติบอดีฟลูออเรสเซนต์โดยทั่วไปนั้นสูงกว่าอัตราการตรวจจับโปรโตซัว แอนติบอดี titer สำหรับผู้ป่วยมาลาเรีย falciparum คือ 1:80 หรือสูงกว่าและถือเป็นเครื่องหมายสำหรับผู้ให้บริการหรือการติดเชื้อมาลาเรียเมื่อเร็ว ๆ นี้ เคล็ดลับ: อย่ากินอาหารที่มันโปรตีนสูงเกินไปวันก่อนที่จะเจาะเลือดหลีกเลี่ยงการดื่มหนัก ปริมาณแอลกอฮอล์ในเลือดจะมีผลโดยตรงต่อผลการทดสอบหลัง 20.00 น. ในวันก่อนการตรวจสุขภาพการอดอาหารควรเริ่มต้นเป็นเวลา 12 ชั่วโมงเพื่อหลีกเลี่ยงผลกระทบต่อผลการทดสอบ ค่าปกติ ติดลบ <1:20 ความสำคัญทางคลินิก อัตราการตรวจจับในเชิงบวกของวิธีแอนติบอดีฟลูออเรสเซนต์โดยทั่วไปนั้นสูงกว่าอัตราการตรวจจับโปรโตซัว แอนติบอดี titer สำหรับผู้ป่วยมาลาเรีย falciparum คือ 1:80 หรือสูงกว่าและถือเป็นเครื่องหมายสำหรับผู้ให้บริการหรือการติดเชื้อมาลาเรียเมื่อเร็ว ๆ นี้ ผลลัพธ์ในเชิงบวกอาจเป็นโรค: มาลาเรียมาลาเรียในสมองไข้มาลาเรียมาลาเรียมาลาเรีย ก่อนการตรวจสอบ: 1 อย่ากินมันมากเกินไปอาหารโปรตีนสูงวันก่อนเลือดเพื่อหลีกเลี่ยงการดื่มหนัก ปริมาณแอลกอฮอล์ในเลือดมีผลโดยตรงต่อผลการทดสอบ 2. หลัง 20.00 น. ในวันก่อนการตรวจสุขภาพคุณควรเริ่มอดอาหารเป็นเวลา 12 ชั่วโมงเพื่อหลีกเลี่ยงผลกระทบต่อผลการทดสอบ 3 ควรผ่อนคลายเมื่อถ่ายเลือดเพื่อหลีกเลี่ยงการหดตัวของหลอดเลือดที่เกิดจากความกลัวเพิ่มความยากลำบากในการเก็บเลือด หลังจากการตรวจสอบ: 1. หลังจากเจาะเลือดจำเป็นต้องใช้การบีบอัดที่รูเข็มประมาณ 3-5 นาทีเพื่อหยุดเลือด หมายเหตุ: อย่าถูเพื่อไม่ให้เกิดห้อใต้ผิวหนัง 2 เวลากดควรเพียงพอ มีความแตกต่างในการแข็งตัวของเวลาสำหรับแต่ละคนและบางคนต้องใช้เวลานานกว่าในการแข็งตัว ดังนั้นเมื่อพื้นผิวของผิวหนังมีเลือดออกการบีบอัดจะหยุดลงทันทีและเลือดอาจถูกแทรกซึมเข้าสู่ผิวหนังเนื่องจากการแข็งตัวของเลือดที่ไม่สมบูรณ์ ดังนั้นเวลาในการบีบอัดจึงยาวกว่าเพื่อหยุดเลือดอย่างสมบูรณ์ หากมีแนวโน้มตกเลือดเวลาบีบอัดควรยืดออก 3 หลังจากมีอาการเลือดเป็นเลือดเช่น: เวียนศีรษะวิงเวียนอ่อนเพลียและอื่น ๆ ควรนอนลงทันทีดื่มน้ำเชื่อมในปริมาณเล็กน้อยและจากนั้นจะได้รับการตรวจร่างกายหลังจากบรรเทาอาการ 4. หากมีการแปลเป็นภาษาท้องถิ่นให้ใช้ผ้าขนหนูอุ่น ๆ หลังจากผ่านไป 24 ชั่วโมงเพื่อส่งเสริมการดูดซึม กระบวนการตรวจสอบ 1. หลักการทดสอบอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ทางอ้อมสำหรับมาลาเรีย แอนติบอดีต่อต้านพลาสโมเดียมในซีรัมทดสอบจะรวมกับแอนติเจนพลาสโมเดียมบนชิ้นเลือดตามด้วยแอนติบอดี IgG แอนติบอดีที่มีการเรืองแสงซึ่งทำหน้าที่เกี่ยวกับ IgG ของมนุษย์บนชิ้นเลือดและแสดงการเรืองแสงที่บริเวณแอนติเจน 2 น้ำยา (1) ฟิล์มเลือดแอนติเจนเป็นฟิล์มเลือดบางของ Plasmodium cynomolgus และฟิล์มเลือดบางของ Plasmodium falciparum มีสถาบันการวิจัยระดับมืออาชีพ เก็บใน 4 ° C หรือช่องแช่แข็งที่อุณหภูมิต่ำ (2) การติดฉลากเรืองแสง IgG ต่อต้านมนุษย์ซึ่งมีขายทั่วไปในประเทศ 3 วิธีการใช้งาน (1) ซีรั่มถูกเก็บรวบรวมโดยวิธีการทั่วไปหรือกดเป็นก้อนกลมบนกระดาษกรองด้วยหลอดแก้วขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 1.2 ซม. (เหล็ก) เลือดถูกนำมาจากหูหรือนิ้วของตัวแบบและเต็มไปด้วยวงกลมปริมาตรของเลือดประมาณ 20 ไมโครลิตร (ประมาณ 10 ไมโครลิตรของซีรัม) หลังจากแห้งแล้วก็วางลงในถุงพลาสติกปิดผนึกด้วยสารดูดความชื้นและนำไปยังห้องปฏิบัติการที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส ประหยัดได้ครึ่งปี -20 ° C สามารถเก็บไว้ได้ 2 ปี ในระหว่างการทดสอบหยดเลือดแห้งจะถูกตัดลงในหลุมของแผ่นปฏิกิริยา 0.2 มล. (pH 7.2) ของบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 0.01 mol / L ได้รับการเพิ่มและการเจือจางในซีรั่มที่สอดคล้องกับ 1:20 ได้รับการแช่ค้างคืนที่ 4 ° C (2) นำฟิล์มเลือดแอนติเจนออกจากตู้เย็นแล้วเป่าให้แห้งด้วยพัดลมไฟฟ้าแบ่งแผ่น antigen แต่ละแผ่นออกเป็นเซลล์เล็ก ๆ หลายแท่งด้วยดินสอสีพิเศษลอง 1 ตัวอย่างหรือ 1 titer ต่อเซลล์และเพิ่ม 1 ซีรั่มต่อเซลล์ ยาหยอด จำเป็นต้องมีซีรัมการอ้างอิงเชิงบวกและการควบคุมเชิงบวก PBS ที่ว่างสำหรับการทดลองแต่ละชุด ทันทีหลังจากเพิ่มเซรั่มส่วนผสมจะถูกถ่ายโอนไปยังกล่องเปียกและหลังจากการบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 30 นาทีมันถูกล้างอย่างช้า ๆ ด้วย 0.01 mol / L PBS (pH 7.2) แล้วแช่ในถัง PBS เป็นเวลา 5 ถึง 10 นาที (3) เจือจางแอนติบอดี IgG ฟลูออเรสเซนส์แอนตี้ - มนุษย์เจือจางด้วย 0.01mol / L PBS (pH 7.2) และวางไว้ในห้องชื้นที่ 37 ° C เป็นเวลา 30 นาทีหลังจากล้างด้วยวิธีเดียวกันเพิ่มกลีเซอรอลและ PBS ลงในแต่ละเซลล์ สารละลายผสมหรือน้ำกลั่นในปริมาณที่เท่ากันถูกนำไปใช้กับแผ่นปิดคลุมและตรวจสอบผลลัพธ์ของปฏิกิริยาภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ (4) การตีความผลลัพธ์: ความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์และความชัดเจนของโครงสร้างของไซโตต์และไซโตพลาสซึมของ Trophozoite นั้นโดดเด่นไม่มีการเรืองแสง (-), ฟลูออเรสเซนต์อ่อน มันยังคงชัดเจน (+) และแบ่งออกเป็น (2+) ถึง (4+) ตามการเพิ่มขึ้นของความสว่างของแสงและการกำหนดโครงสร้าง โดยทั่วไปความเข้มการเรืองแสง (+) หรือมากกว่านั้นถูกตัดสินว่าเป็นค่าบวกที่การเจือจางในซีรั่ม 1:20 ไม่เหมาะกับฝูงชน ผู้ที่ไม่มีข้อบ่งชี้ในการตรวจไม่ควรทำการตรวจสอบนี้ ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ โดยทั่วไปไม่มีภาวะแทรกซ้อนและอันตราย