Serum Lipoprotein และ Serum Lipoprotein Electrophoresis

ไลโปโปรตีนส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการจำแนกประเภทของไขมันในเลือดสูงและมันยังเป็นประโยชน์ในการทำความเข้าใจสถานะไขมันในเลือดของโรคหลอดเลือดหัวใจและการวินิจฉัยทางคลินิกและการรักษาที่ดีกว่า ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกการตรวจหัวใจและหลอดเลือด: การตรวจสอบทางชีวเคมี บังคับเพศ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: การอดอาหาร ผลการวิเคราะห์: ต่ำกว่าปกติ: พบในไลโปโปรตีนต่ำและอื่น ๆ ค่าปกติ: ไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำมาก: 0.06-0.3g / ลิตร ไลโปโปรตีนชนิดความหนาแน่นต่ำ: 0-7g / L ไลโปโปรตีนความหนาแน่นสูง (ชาย): 0.41-0.63g / L เจิ้งความหนาแน่นสูง?. 42-0.68g / ลิตร เหนือปกติ: พบได้ในไขมันในเลือดสูงปฐมภูมิและอื่น ๆ เชิงลบ: บวก: เคล็ดลับ: ก่อนการตรวจอาหารจะเบาและห้ามดื่มแอลกอฮอล์ ตรวจสอบท้องว่างในตอนเช้า ค่าปกติ เซลลูโลสอะซิเตทเยื่ออิเล็กโทร Milk thistle particles 0g / L (0 มก. / ดล); ไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำมาก 0.06 ~ 0.3g / L (6 ~ 30mg / dl); ไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำ <7g / L (<700mg / dl); ไลโปโปรตีนความหนาแน่นสูง: เพศชาย 0.52 ± 0.11g / L (43 ± 18mg / dl); หญิง 0.55 ± 0.13g / L (47 ± 2 มก. / ดล) ความสำคัญทางคลินิก 1 เพิ่มขึ้น: เห็นในหลักไขมันในเลือดสูง 2, ล่าง: เห็นใน lipoproteine ​​mia ต่ำ ผลลัพธ์ที่สูงอาจเป็นโรค: ไขมันในเลือดสูง, ไขมันในเลือดสูงประเภท II, การพิจารณาโรคหลอดเลือดหัวใจ 1. ตัวอย่าง: ไลโปโปรตีนสามารถแยกได้จากซีรั่มสดที่ไม่ละลาย พลาสมาไม่เหมาะสำหรับ lipoprotein electrophoresis เนื่องจากจะมีแถบ fibrinogen เกิดขึ้น 2. โปรไฟล์ไลโปโปรตีนที่มีส่วนประกอบแยกชัดเจนเป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการตีความที่ถูกต้อง หากเงื่อนไขเหล่านี้เป็นไปด้วยดีไลโปโปรตีนชนิดนี้และวิธีการอ้างอิง (ultracentrifugation) นั้นค่อนข้างคงที่ ความแม่นยำของแต่ละองค์ประกอบมีความแตกต่างกันและประเมินโดยค่าสัมประสิทธิ์การเปลี่ยนแปลงซึ่งโดยทั่วไปแล้วจะน้อยกว่า 5% 3. บางครั้งอัลฟาไลโปโปรตีนจะหายไปและ / หรือวงแคบอัลฟาไลโปโปรตีนจะปรากฏขึ้น เนื่องจากกรดไขมันอิสระมีอยู่ การสะสมของอัลฟาไลโปโปรตีนทำให้อนุภาคเหล่านี้มีประจุเท่ากัน เมื่อความหนาแน่นของโซนαเพิ่มขึ้นผลลัพธ์จะสูง เมื่อเปรียบเทียบกับเทคนิคการตกตะกอนไลโปโปรตีนชนิดอิเล็กโตรโฟรีซิสเชิงปริมาณนั้นมีราคาสูง กระบวนการตรวจสอบ ทันทีหลังจากการเจาะเลือดดำการดำเนินการทดสอบ: 1. เพิ่มบัฟเฟอร์ลงในถังอิเล็กโทรโฟเรซิสและปรับบัฟเฟอร์ในถังทั้งสองด้านเพื่อให้อยู่ในระนาบเดียวกัน 2. การเตรียมฟิล์มเซลลูโลสอะซิเตท: ใช้ฟิล์มเซลลูโลสอะซิเตท (2 ซม. x 8 ซม.) และวาดเส้นแนวนอนด้วยดินสอที่ 1.5 ซม. (ด้านหนึ่งของด้านลบ) ของพื้นผิวขรุขระเพื่อทำเครื่องหมายประ หลังจากกำหนดหมายเลขและระบุขั้วไฟฟ้าบวกและลบฟิล์มจะจุ่มลงในสารละลายบัฟเฟอร์โซเดียม barbiturate-barbital และหลังจากที่อิ่มตัวอย่างเพียงพอ (ปกติ 20 นาที) บัฟเฟอร์ส่วนเกินจะถูกลบออกโดยประกบกระดาษกรองที่สะอาด 3. ขนฟิล์มเซลลูโลสอะซิเตทติดอยู่กับที่ยึดถังอิเล็กโตรโฟรีซิสและยืดให้ตรง ปิเปต 3 ~ 5μlของเซรุ่มที่ไม่ใช่ hemolytic ด้วย micropipette และเพิ่มตามแนวนอนที่เส้นแนวนอนตัวอย่างควรเก็บไว้ในระยะห่างจากขอบของฟิล์มเพื่อหลีกเลี่ยงการเสียรูปของโปรตีนในรูปแบบอิเล็กโตรโฟรีซีส เมื่อด้านที่มีแสงหงายขึ้นให้ติดมันราบกับโครงตัวถังอิเล็กโทรโฟรีซิสและเชื่อมต่อปลายทั้งสองของฟิล์มเข้ากับบัฟเฟอร์ด้วยกระดาษกรองสองชั้นหรือผ้าโปร่งสี่ชั้นและรอสักครู่ 4 เปิดไฟให้ความสนใจกับขั้วบวกและขั้วบวกบนฟิล์มเซลลูโลสอะซิเตทไม่ได้เชื่อมต่อที่ไม่ถูกต้อง แรงดันไฟฟ้า 90 ~ 150V ปัจจุบัน 0.4 ~ 0.6mA / cm (อิเล็กโทรที่แตกต่างกันที่ต้องการแรงดันไฟฟ้าในปัจจุบันอาจจะแตกต่างกันควรมีความยืดหยุ่น) ฤดูร้อนพลังงาน 45 นาทีเวลาเปิดฤดูหนาวเวลานานเล็กน้อยประมาณ 60 นาทีขยายโซนอิเล็กประมาณ 25 ~ 35 มม. สามารถ 5, การย้อมสี: หลังจากเสร็จสิ้นการใช้พลังงาน, เอาฟิล์มและแช่ในสารละลายสีย้อม Lichunhong S หรือสารละลายย้อมสีอะมิโนสีดำ 10B, ย้อมเป็นเวลา 5 ถึง 10 นาที (โดยโซนอัลบูมิน) จากนั้นล้างส่วนที่เหลือในการล้าง ย้อมจนกระทั่งพื้นหลังไม่มีสี 6 เชิงปริมาณ: 1 วิธีสี: หยดฟิล์มล้างตัดพื้นที่สีย้อมลงไปในหลอดที่เกี่ยวข้องเพิ่ม 0.6ml / L โซเดียมไฮดรอกไซด์ 6ml ในหลอดอัลบูมิน (คำนวณค่าการดูดซับคูณ 2) ส่วนที่เหลือ เติม 3 มิลลิลิตรลงในหลอดแต่ละหลอดเขย่าหลาย ๆ ครั้งแล้ววางในถังเก็บน้ำ 37 ° C เป็นเวลา 20 นาทีเพื่อให้สีล้างออก การย้อมสีอะมิโนแบล็ก 10B การดูดกลืนแสงของหลอดแต่ละหลอดอ่านที่ 620 นาโนเมตรโดยใช้เครื่องสเปคโทรโฟโตมิเตอร์แล้วคำนวณหาเนื้อหาของหลอดแต่ละหลอด (การควบคุมหลอดเปล่าแบบพร้อมกัน) เมื่อ Lichunhong S ถูกย้อมสีน้ำชะขยะจะได้รับการบำบัดด้วยโซเดียมไฮดรอกไซด์ 0.1 mol / L และปริมาณก็เหมือนกันกับด้านบน หลังจากผ่านไป 10 นาทีให้เติมกรดอะซิติกขนาด 0.6 มล. 400 มล. / ลิตรลงในหลอดอัลบูมิน (เพิ่มการดูดซับ 2 เท่า) และเพิ่ม 0.3ml ลงในหลอดอื่น ๆ เพื่อปรับโซเดียมไฮดรอกไซด์ให้เป็นกลาง อ่านค่าการดูดกลืนแสงของแต่ละหลอดที่ 520 นาโนเมตรโดยสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ (การควบคุมช่องว่างพร้อมกัน) จากนั้นทำการคำนวณเนื้อหาที่เกี่ยวข้อง 2 วิธีการสแกน Densitometer: A. โปร่งใส: ดูดของเหลวที่ล้างออกบนฟิล์ม (เพื่อป้องกันไม่ให้ของเหลวใสเจือจางเพื่อส่งผลกระทบต่อผลลัพธ์ที่โปร่งใส) จุ่มฟิล์มลงในของเหลวใสเป็นเวลา 2 ถึง 3 นาทีจากนั้นนำออกมาและทำให้แบนในลักษณะกลิ้ง ทำความสะอาดและปราศจากรอยขีดข่วนของกระจก (อย่าสร้างฟองอากาศ), สร้างแผ่นสไลด์ออกไปครู่หนึ่ง, นำของเหลวใสส่วนเกินออก, วางในเตาอบที่อุณหภูมิคงที่ 90-100 ° C, อบประมาณ 10-15 นาที, นำออกและเย็นให้เย็นที่อุณหภูมิห้อง พื้นที่โปรตีนที่โปร่งใสโดยวิธีนี้มีความชัดเจนฟิล์มแบนและสามารถสแกนและเก็บรักษาโดยตรงอย่างถาวร (โปร่งใสด้วยไฮโดรเจนแนฟทาลีนหรือพาราฟินเหลวฟิล์มที่ล้างควรจะแห้งและใสและไม่สามารถเก็บฟิล์มใสได้ ยาวและริ้วรอยง่าย) 2 ปริมาณการสแกน: ฟิล์มใสจะถูกวางในเครื่อง densitometer อัตโนมัติหรือกล่อง densitometer อื่น ๆ สำหรับการวิเคราะห์การสแกน ไม่เหมาะกับฝูงชน คนที่ไม่เหมาะสม: โดยทั่วไปแล้วจะไม่มีคนที่ไม่เหมาะสม ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ 1, การตกเลือดใต้ผิวหนังท้องถิ่น: หลังจากการเก็บเลือดควรกดเวลาที่เพียงพอโดยเฉพาะอย่างยิ่งผู้ที่มีแนวโน้มเลือดออกเพื่อที่จะไม่ก่อให้เกิดการฉีดยาและรอยช้ำใต้ผิวหนังเนื่องจากไม่มีการแข็งตัวของเลือด 2 การติดเชื้อ: ให้ความสนใจกับการดำเนินการปลอดเชื้อในระหว่างการเก็บเลือดดำเพื่อไม่ให้เกิดการติดเชื้อในท้องถิ่น