เทโลเมอเรส

Telomerase เป็น reverse transcriptase พิเศษที่ประกอบด้วย RNA และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ telomeres (ลำดับนิวคลีโอไทด์และโครงสร้างที่เฉพาะเจาะจง) ที่ปลาย DNA ของเซลล์ยูคาริโอต ความยาว telomere ของเซลล์ร่างกายปกติจะถูกทำให้สั้นลงเรื่อย ๆ เมื่อแบ่งเซลล์และกิจกรรมของ telomerase จะได้รับการปรับปรุงและความยาวของ telomere สามารถรักษาได้โดยไม่ต้องทำให้สั้นลงเพื่อให้เซลล์สามารถแพร่ขยายและกลายเป็นมะเร็งได้ ดังนั้นการตรวจสอบ telomerase และสารยับยั้งของมันสามารถใช้สำหรับการวินิจฉัยและการรักษาเนื้องอก ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกประเภทการตรวจมะเร็ง: การตรวจภูมิคุ้มกัน เพศที่ใช้บังคับ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: ไม่อดอาหาร ผลการวิเคราะห์: ต่ำกว่าปกติ: ค่าปกติ: ไม่ เหนือปกติ: เชิงลบ: เชิงลบตามปกติ บวก: เซลล์มะเร็งปอดขนาดเล็กได้เพิ่มกิจกรรม telomerase ในระยะแรกและมะเร็งปอดเซลล์ที่ไม่ใช่ขนาดเล็กมีการเปลี่ยนแปลงกิจกรรมมากกว่าในช่วงกลาง เคล็ดลับ: รักษาความคิดปกติ ค่าปกติ เชิงลบ ความสำคัญทางคลินิก เหมาะสำหรับการวินิจฉัยและการวินิจฉัยแยกโรคมะเร็งต่างๆ ระดับความสูง: มะเร็งตับ (93.88 OD / 30 μgโปรตีน), มะเร็งรอบเนื้อเยื่อ (24.09 OD / 30 μgโปรตีน) เซลล์มะเร็งปอดขนาดเล็กได้เพิ่มกิจกรรม telomerase ในระยะแรกและมะเร็งปอดเซลล์ที่ไม่ใช่ขนาดเล็กมีการเปลี่ยนแปลงกิจกรรมมากกว่าในช่วงกลาง ผลลัพธ์ในเชิงบวกอาจเป็นโรค: ข้อควรระวังสำหรับมะเร็งตับอ่อนและมะเร็งต่อมไทรอยด์ 1. ให้ความสนใจเพื่อป้องกันการปนเปื้อนในห้องปฏิบัติการและเท็จบวกหรือลบเท็จ 2. ให้ความสนใจในการลบสารยับยั้งโพลีเมอเรสที่อยู่ในชิ้นงานเนื้อเยื่อเพื่อลดค่าลบที่ผิดพลาด 3. เทคโนโลยีวิเคราะห์ประกายแวววาววิธี ELISA ในวิธีการผสมลูกผสมมีความน่าเชื่อถือมากกว่าวิธี TRAP กระบวนการตรวจสอบ ทันทีหลังจากเก็บตัวอย่างเลือดพวกเขาจะถูกส่งไปตรวจและเนื้องอก immunoassay การดำเนินการตรวจจับ: DNA ของจีโนม 0.1 ไมโครกรัมบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยโพแทสเซียมคลอไรด์ 50 มิลลิโมล / ลิตร 10 มิลลิโมล / LTris-HCl (pH 8.4), คลอไรด์แมกนีเซียมคลอไรด์ 1.5 มิลลิโมล / ลิตร, 100 ไมโครกรัมเจลาตินแต่ละไพรเมอร์คือ 0.25 ไมโครโมล / ลิตร; dTIP คือ 200 μmol / L แต่ละ DNA polymerase คือ 2.5 U และปริมาตรสุดท้ายคือ 100 μl เพิ่มพาราฟินเหลวสองสามหยดเพื่อป้องกันการระเหย วงจรการเกิดปฏิกิริยา: 1 การสูญเสียสภาพ: 90 ° C เป็นเวลา 30-60 วินาที, อุณหภูมิหลอมของ 2 ไพรเมอร์และแม่แบบ: 40-60 ° C 30-60 s, 3 ส่วนขยาย: 72 ° C 1-2 นาที หลังจากรอบซ้ำ 30 ถึง 40 ครั้งส่วนขยายไพรเมอร์ 7 ° 72 ° C สุดท้ายจะสิ้นสุดลงเป็นเวลา 7 นาที หลังจากการกำจัดพาราฟินเหลวผลิตภัณฑ์จะพร้อมสำหรับการวิเคราะห์ หลังจากอิเล็กโตรโฟรีซิสบนเจลอะกาโรสเปื้อนด้วยเอทิเดียมโบรไมด์และพบความยาวของแถบฟลูออเรสเซนต์ที่คาดการณ์ไว้โดยการฉายรังสีด้วยหลอด UV ผลิตภัณฑ์นี้ยังสามารถนำไปผสมกับ Southern blot หรือ spot blot ด้วยเครื่อง oliolonucleotide ที่มี radiolabeled หรือ non-radiolabeled สะดวกกว่าที่จะใช้เครื่องมืออัตโนมัติ PCR หลังจากเพิ่มรีเอเจนต์ปฏิกิริยาเทมเพลต DNA และโพลิเมอเรส Taq-DNA ลงในหลอดทดลองจะถูกนำไปใช้ในขั้นตอนการปรับเปลี่ยนนั่นคืออุณหภูมิเวลาที่ต้องการและการขยายของอุณหภูมิและเวลาที่เกี่ยวข้อง ปฏิกิริยาจะดำเนินการในเครื่องมืออัตโนมัติเพื่อให้ได้ผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียงที่น่าพอใจ ไม่เหมาะกับฝูงชน ผู้ที่ไม่มีข้อบ่งชี้ในการตรวจไม่ควรทำการทดสอบ ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ 1. การติดเชื้อ: ให้ความสนใจกับการทำงานที่ปลอดเชื้อเมื่อเก็บเลือดหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของน้ำและส่วนอื่น ๆ ในบริเวณที่เก็บเลือดเพื่อหลีกเลี่ยงการติดเชื้อในพื้นที่ 2 เลือดออก: หลังจากเลือดจะได้รับเวลาการบีบอัดเต็มรูปแบบโดยเฉพาะอย่างยิ่ง coagulopathy มีเลือดออกมีแนวโน้มที่จะหลีกเลี่ยงการฉีดเข้าไปใต้ผิวหนังท้องถิ่นช้ำและบวม