การทดสอบความเปราะบางของเซลล์เม็ดเลือดแดง

การทดสอบนี้วัดความต้านทานของเซลล์เม็ดเลือดแดงต่อความเข้มข้นต่าง ๆ ของสารละลายไฮโปโทนิก ในน้ำเกลือ hypotonic น้ำแทรกซึมผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ทำให้เซลล์เม็ดเลือดแดงค่อยๆบวมและทำลาย การซึมผ่านของเซลล์เม็ดเลือดแดงขึ้นอยู่กับอัตราส่วนของพื้นที่ผิวต่อปริมาตรของเซลล์เม็ดเลือดแดง พื้นที่ผิวมีขนาดใหญ่และปริมาตรมีขนาดเล็กและความต้านทานต่อสารละลายเกลือมีขนาดใหญ่และในทางกลับกันความต้านทานจะมีขนาดเล็ก (ความเปราะจะเพิ่มขึ้น) อัตราส่วนพื้นผิว / ปริมาตรของเม็ดเลือดแดงทรงกลมลดลงซึ่งมีความไวต่อสารละลายไฮโปนิกส์เป็นพิเศษและความเปราะบางเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกการตรวจหัวใจและหลอดเลือด: การตรวจเลือด เพศที่ใช้บังคับ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: ไม่อดอาหาร คำเตือน: ต้องเตรียมน้ำยาให้ถูกต้องควรเปลี่ยนรีเอเจนต์หนึ่งครั้งหรือสองครั้งต่อเดือนความเข้มข้นของ NaCl สามารถเพิ่มขึ้นได้เนื่องจากการระเหยของน้ำ ค่าปกติ วิธีเริ่มต้นของ Sanford จะละลาย (เริ่มการแตกของเม็ดเลือดแดง) 0.0042 ~ 0.0046 (0.42% ~ 0.46%) สารละลายโซเดียมคลอไรด์ สมบูรณ์ hemolyzed 0.0032 ถึง 0.0034 (0.32% ถึง 0.34%) สารละลายโซเดียมคลอไรด์ ความสำคัญทางคลินิก ความผิดปกติ: (1) เพิ่มขึ้น spherocytosis ทางพันธุกรรม, โรคโลหิตจาง hemolytic autoimmune, ดีซ่าน hemolytic แต่กำเนิด (ครอบครัวดีซ่าน hemolytic ดีซ่าน) (2) ลดโรคโลหิตจางเซลล์เคียว, ดีซ่านอุดกั้น, โรคโลหิตจางขาดธาตุเหล็ก, ธาลัสซี, พิษตะกั่ว, โรคโลหิตจางเป็นอันตราย, ตัดม้าม, โรคตับ ต้องตรวจสอบฝูงชน: ผู้ที่เป็นโรคโลหิตจาง, พิษจากตะกั่ว, ดีซ่านและตับผิดปกติ ข้อควรระวัง (1) ควรมีการควบคุมตามปกติสำหรับการตรวจแต่ละครั้งและความแตกต่างระหว่างการควบคุมปกติและเรื่องคือ 0.04% ซึ่งมีนัยสำคัญทางคลินิก (2) ต้องมีการเตรียมรีเอเจนต์อย่างถูกต้องรีเอเจนต์ควรถูกแทนที่หนึ่งครั้งหรือสองครั้งต่อเดือนและความเข้มข้นของ NaCl สามารถเพิ่มขึ้นได้เนื่องจากการระเหยของน้ำ (3) ป้องกันความเสียหายของเซลล์เม็ดเลือดแดงเมื่อรับประทานเลือด (4) ควรใช้สารกันเลือดแข็งเฮปารินเพื่อกำจัดเลือดไฟบรินกรดซิตริกหรือออกซาเลตซึ่งสามารถเพิ่มความแข็งแรงของไอออนิกและส่งผลต่อแรงดันออสโมติก (5) หากผลลัพธ์ของภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเริ่มต้นและสมบูรณ์นั้นยากที่จะตัดสินได้สามารถสังเกตได้หลังจากการปั่นแยก (6) ความเปราะบางทางออสโมติกของธาลัสซีเมียลดลงและควรตรวจสอบสารละลาย NaCl ที่มีความเข้มข้นต่ำ (7) สำหรับโรคโลหิตจางรุนแรงควรกำหนดสูตร RBC เป็นความเข้มข้น 50% และดีซ่านควรล้างเซลล์เม็ดเลือดแดง (8) ไม่ควรเก็บตัวอย่างเลือดในตู้เย็นนานกว่า 6 ชั่วโมง กระบวนการตรวจสอบ 1. เตรียมสารละลาย NaCl ที่มีความเข้มข้นต่างกัน ขั้นแรกกำหนดค่า 100 มิลลิลิตรของสารละลายโซเดียมไฮโปโทนิก 1% จากนั้นไปที่หลอดสะอาดขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางเดียวกันจำนวน 12 หลอดหมายเลขบนชั้นวางหลอดทดลองเพิ่มสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 1% และน้ำกลั่นให้แต่ละหลอดตามตารางต่อไปนี้ผสมและผสมกำหนดค่า 12 สารละลาย NaCl แบบไฮโปโทนิคที่มีความเข้มข้นต่างกันจาก 0.68% ถึง 0.24% 2. สารละลาย NaCl 0.85% และสารละลายยูเรีย 1.9% ถูกแยกทิ้ง ใช้หลอดขนาดเล็กอีก 3 หลอดซึ่งมีหมายเลข 13 ~ 15 ตามลำดับซึ่งมีสารละลาย NaCl 2.5 มิลลิลิตรเท่ากับ 0.85% สารละลายยูเรีย 1.9% และน้ำกลั่น 3 ไอโอดีนฆ่าเชื้อแอลกอฮอล์ของผิวด้วยหมันแห้งหัวฉีดเฮเฮ 2 ซม. จากตรงกลางของหลอดเลือดดำศอกสนใจตัวเอง 1 มล. ซึ่งถูกเพิ่มลงในหลอดทดลองเลือดที่เหลือเพิ่ม 1 หยดต่อแต่ละหลอดทดลอง 15 ผสมเบา ๆ 4. สังเกตการเปลี่ยนแปลงของหลอด 13, 14 และ 15 หลอดที่เหลืออีก 12 หลอดได้รับอนุญาตให้ยืนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมงจากนั้นสังเกตสีและความโปร่งใสของส่วนผสม (1) ของเหลวในหลอดทดลองกลายเป็นสีแดงโปร่งใสอย่างสมบูรณ์แสดงว่าเซลล์เม็ดเลือดแดงแตกหักทั้งหมดและมันก็เป็น hemolyzed อย่างสมบูรณ์ (2) ชั้นล่างของของเหลวในหลอดทดลองเป็นสีแดงขุ่นและชั้นบนเป็นสีแดงโปร่งใสแสดงให้เห็นว่าส่วนหนึ่งของแพ็คเก็ตกาลักน้ำเสียซึ่งเรียกว่าการแตกของเม็ดเลือดแดงไม่สมบูรณ์ (3) ชั้นล่างของหลอดทดลองเป็นสีแดงขุ่นและชั้นบนไม่มีสีและโปร่งใสแสดงว่าเซลล์เม็ดเลือดแดงไม่แตก 5. บันทึกผลการทดสอบ ซึ่งรวมถึงชื่อเรื่องและช่วงของความเปราะบางของเม็ดเลือดแดงออสโมติก (เช่นความเข้มข้นของ NaCl ของความต้านทานขั้นต่ำและความเข้มข้นของ NaCl ของความต้านทานสูงสุด) และผลลัพธ์ของหลอด 13-15 6. นำหลอดที่ 6 และหลอดที่ 13 จำนวน 1 หยดลงบนสไลด์แก้วปิดฝาแก้วและสังเกตสัณฐานวิทยาของเซลล์เม็ดเลือดแดงใต้กล้องจุลทรรศน์ ไม่เหมาะกับฝูงชน ไม่มีข้อห้าม ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ ไม่มีภาวะแทรกซ้อน