เอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโน

การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์แองไซต์เป็นการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ มันถูกใช้เพื่อตรวจจับแอนติเจน (หรือแอนติบอดี) ที่จะทดสอบซึ่งถูกเคลือบในบ่อของแผ่นโซลิดเฟส นั่นคือแอนติบอดีจะถูกระบุด้วยเอนไซม์และแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่รู้จักกันถูกดูดซับบนพื้นผิวของตัวส่งสัญญาณของแข็งและปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดีจะถูกดำเนินการบนพื้นผิวของตัวส่งสัญญาณของแข็งและส่วนที่เป็นอิสระในเฟสของเหลวจะถูกชะล้างออกไป สีจะถูกพัฒนาหลังจากวัสดุพิมพ์เพื่อตัดสินผลลัพธ์ ความลึกของปฏิกิริยาสีเป็นสัดส่วนกับปริมาณของแอนติบอดีหรือแอนติเจนที่สอดคล้องกันในตัวอย่าง ปฏิกิริยาสีนี้สามารถกำหนดปริมาณได้โดยเครื่องตรวจจับ ELISA ซึ่งรวมความไวของปฏิกิริยาเคมีของเอนไซม์เข้ากับความจำเพาะของปฏิกิริยาแอนติเจนและแอนติบอดีทำให้วิธี ELISA เป็นวิธีการตรวจจับที่เฉพาะเจาะจงและละเอียดอ่อน ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกประเภทการเจริญเติบโตและการพัฒนา: การตรวจภูมิคุ้มกัน เพศที่ใช้บังคับ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: ไม่อดอาหาร ผลการวิเคราะห์: ต่ำกว่าปกติ: ค่าปกติ: ไม่ เหนือปกติ: เชิงลบ: ปกติ บวก: ร่างกายมนุษย์อยู่ในสภาวะสมดุลแบบไดนามิกและไม่แข็งแรง เคล็ดลับ: ผ่อนคลายขณะตรวจสอบ ค่าปกติ ชนิดและสัดส่วนของพืชในร่างกายเป็นเรื่องปกติและร่างกายมนุษย์อยู่ในสภาวะที่มีความสมดุลและสุขภาพดี ความสำคัญทางคลินิก immunosorbent assay เป็นเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในเอนไซม์ immunoassay วิธี ELISA ที่ใช้กันทั่วไป ได้แก่ วิธีแซนด์วิชแอนติบอดีสองวิธีและวิธีทางอ้อมซึ่งเป็นวิธีแรกในการตรวจหาแอนติเจนของ macromolecular และวิธีหลังสำหรับการตรวจวัดแอนติบอดีจำเพาะ ในแง่ของโรคปรสิตใช้สำหรับการวินิจฉัยทางเซรุ่มวิทยาของพลาสโมเดียมอะมีบา Liegemann, Trypanosoma, Schistosomiasis, cysticercosis, Toxoplasma, Schistosomiasis, พยาธิใบไม้ตับ, Bloodworm, Trichinosis สิ่งนี้สำคัญสำหรับทั้งแพทย์และสัตวแพทย์ Streptococcus, Salmonella, Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Haemophilus, Vibrio cholerae, Neisseria gonorrhoeae, Candida และอื่น ๆ สามารถใช้เป็น tetanus antitoxin และ Vibrio cholerae antitoxin ได้ การวินิจฉัยและการตรวจหาแอนติบอดีต่อการติดเชื้อริคเก็ตเซียริคเก็ตเซียสามารถวินิจฉัยได้ Rickettsia ยังสามารถใช้เพื่อระบุสายพันธุ์ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด นอกจากนี้ยังมีรายงานการตรวจหาแอนติบอดีต่อ Chlamydia psittaci ไวรัสไข้หวัดใหญ่, โรคคางทูม, หัด, หัดเยอรมัน, โรตาไวรัส, ไวรัสเริม, cytomegalovirus, ไวรัส EB, adenovirus, enterovirus, ไวรัสสมองอักเสบ, ไวรัสไข้เหลือง, โรคพิษสุนัขบ้า พิษและโปลิโอ ฯลฯ มีความไวมากกว่าวิธีการตรวจสอบที่ใช้ในปัจจุบัน ในโรคทางภูมิคุ้มกันมีการทดสอบเพื่อตรวจหาโรคแพ้ภูมิตัวเองและการวินิจฉัยโรคภูมิแพ้เช่นแอนติบอดีต่อสารก่อภูมิแพ้ต่างๆแอนติบอดี DNA และ thyroglobulin antibodies, erythematosus antibodies และอื่น ๆ ในด้านสุขอนามัยสามารถใช้ในการตรวจหาเชื้อ Staphylococcal enterotoxin และ Salmonella toxin ในอาหาร ผลลัพธ์ในเชิงบวกอาจเป็นโรค: ได้รับ epidermolysis bullous, trypanosomiasis, schistosomiasis และโรคตับ, toxoplasmosis scleritis, Gestman ดาวน์ซินโดร, Gestman ทารกแรกเกิด แต่กำเนิด toxoplasmosis, พยาธิใบไม้ตับ, ไซบีเรีย rickettsia พบไข้, piriflagellate ลำไส้, ข้อควรระวังอาการท้องร่วงท่องเที่ยว 1. พื้นผิว: เอนไซม์หลายชนิดมีความจำเพาะต่อสารตั้งต้นดังนั้นการใช้เอนไซม์ชนิดต่าง ๆ จึงต้องการวัสดุพื้นผิวที่แตกต่างกัน เมื่อพิจารณาคอนจูเกตของเอนไซม์ (เช่น AP หรือ HRP) ช่วงของพื้นผิวที่มีให้เลือกมี จำกัด มาก วิธีการเลือกวัสดุพิมพ์ที่เหมาะสมภายในขอบเขตของวัสดุพิมพ์ที่ จำกัด นี้ควรเลือกตามเงื่อนไขดังต่อไปนี้: (1) วัสดุพิมพ์ควรไม่มีสีก่อนที่จะถูกเร่งปฏิกิริยาโดยเอนไซม์และมีสีที่ชัดเจนหลังจากเอนไซม์ถูกกระตุ้น เปลี่ยนเพื่อให้ผลลัพธ์สามารถแยกแยะได้ชัดเจน (2) สีแห้งง่ายและมีคุณสมบัติ (3) ผลิตภัณฑ์หลังจากการพัฒนาสีต้องมีความเสถียรสารสีที่ผลิตในการกำหนดเชิงปริมาณควรละลายได้ (4) ราคา ราคาถูกง่ายต่อการได้รับและปลอดสารพิษ ดังนั้นสำหรับเอนไซม์ AP conjugate, nitrophenyl phosphate จึงถูกใช้โดยทั่วไปและสีเป็นสีส้มหลังจากการพัฒนาสีและสีมีความเสถียรปฏิกิริยาจะสิ้นสุดลงด้วย 2 mol / L NaOH และค่า OD สามารถวัดได้ที่ความยาวคลื่น 403 nm 2. ผงซักฟอกและทินเนอร์: เพื่อเพิ่มปริมาณของแอนติบอดีที่ถูก จำกัด โดยเฉพาะอย่างยิ่งแอนติเจนที่เคลือบในบ่อของ microplate ควรจะเกินเล็กน้อย อย่างไรก็ตามในระหว่างการฟักตัวหรือซักผ้าแอนติเจนที่ดูดซับไว้บางส่วนอาจถูกชะล้างออกไปจากส่วนรองรับที่มั่นคง ดังนั้นโปรตีนที่นอกเหนือจากแอนติบอดีจำเพาะที่เพิ่มในเซรุ่มทดสอบมีแนวโน้มที่จะดูดซับไปยังหลุมว่างของหลุมเคลือบแอนติเจนดั้งเดิมเพิ่มสีพื้นหลังและสร้างปฏิกิริยาบวกปลอมซึ่งเป็นปัจจัย จำกัด ความจำเพาะของ ELISA นักวิชาการหลายคนได้เพิ่มตัวแทนป้องกันต่าง ๆ เพื่อเจือจางและผงซักฟอกเพื่อยับยั้งการดูดซับการแข่งขันของโปรตีนที่ไม่เฉพาะเจาะจง กระบวนการตรวจสอบ วิธีการพื้นฐานคือการดูดซับแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่รู้จักบนพื้นผิวของตัวส่งสัญญาณของแข็ง (แผ่นโพลีสไตรีนไมโคร - ปฏิกิริยา), ทำปฏิกิริยาปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดีที่ติดฉลากของเอนไซม์บนพื้นผิวของของแข็งและล้างส่วนประกอบฟรีในเฟสของเหลว นอกจากนี้ ตามผู้ให้บริการโซลิดเฟสที่ใช้ใน ELISA นั้นแบ่งออกเป็นสามประเภท: หนึ่งคือ ELISA ใช้โพลีสไตรีน microplate เป็นผู้ให้บริการซึ่งเป็น ELISA (microplate ELISA) เรามักจะอ้างถึงอื่น ๆ ที่ใช้เมมเบรน ELISA นั้นเรียกว่า spot ELISA (Dot-ELISA) ส่วนอีกอย่างคือ ELISA ที่ใช้ผ้าโพลีเอสเตอร์แบบไม่ชอบน้ำในฐานะผู้ให้บริการที่เรียกว่า ELISA (C-ELISA) ใน microplate ELISA จะแบ่งออกเป็น ELISA ทางอ้อม, แซนด์วิชแอนติบอดีคู่, ELISA แซนด์วิชคู่, ELISA แซนด์วิชคู่, การแข่งขัน ELISA, ปิดกั้น ELISA และแอนติบอดีจับ ELISA ตามคุณสมบัติของมัน ไม่เหมาะกับฝูงชน ไม่มีข้อห้ามพิเศษ ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ ไม่มีภาวะแทรกซ้อนและอันตรายที่เกี่ยวข้อง