Stanovení koncentrace bílkovin

Stanovení koncentrace proteinu je stanovení koncentrace proteinu chemickými nebo fyzikálními metodami a je důležitou metodou často používanou pro výpočet míry výtěžnosti purifikačních metod. Metoda biuretu Metoda biuretu je první metoda pro stanovení koncentrace proteinu kolorimetricky. Síra amonná neinterferuje s vývojem barev, vazbami Cu2 + a proteinových peptidů a komplexem tyrosinových zbytků za vzniku fialové modři Sloučenina má maximální absorpci při vlnové délce 540 nm. Metoda biuretu se běžně používá pro stanovení proteinových roztoků v rozmezí 0,5 g / l až 10 g / l. Základní informace Specializovaná klasifikace: klasifikace kardiovaskulárních vyšetření: vyšetření krve Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: půst Výsledky analýzy: Pod normální: Časté u nemocí, jako je podvýživa. Normální hodnota: Normální hodnota: 60 - 80 g / l Nad normální: Časté u nemocí, jako je obezita. Negativní: Pozitivní: Tipy: Nejezděte příliš mastné potraviny s vysokým obsahem bílkovin den předtím a vyhýbejte se silnému pití. Normální hodnota Normální hodnota lidského těla je obecně 60-80 g / l. Klinický význam Abnormální výsledek 1. Metoda Biuret: Metoda biuret je první metoda pro stanovení koncentrace proteinu pomocí kolorimetrie. Síra amonná neinterferuje s vývojem barev, vazbami Cu2 + a proteinových peptidů a komplexem tyrosinových zbytků, čímž se vytvoří fialová Modrý komplex, který má maximální absorpci při vlnové délce 540 nm. Metoda biuretu se běžně používá pro stanovení proteinových roztoků v rozmezí 0,5 g / l až 10 g / l. 2. Lowryho metoda: Cu + tvoří komplex s proteinem v alkalickém roztoku a poté komplex redukuje činidlo fosforečné molybdenum fosforečné-fosforečné (Folin-fenolové činidlo) a výsledkem je tmavě modrá barva. Tato metoda je mnohem citlivější než metoda biuret a je vhodná pro stanovení proteinových roztoků v rozmezí 20 mg / l až 400 mg / l. 3. Metoda ultrafialové absorpce: Většina proteinů má charakteristickou maximální absorpci při vlnové délce 280 nm, což je způsobeno přítomností tyrosinu, tryptofanu a fenylalaninu v proteinu, který lze použít ke stanovení obsahu 0,1 - 0,5 mg / ml. Proteinový roztok. Lidé, kteří potřebují kontrolu Jsou lidé, kteří jsou slabí a slabí, ospalí, kůže, sliznice a nepozornost. Nízké výsledky mohou být nemoci: podvýživa, svalová dystrofie mohou být vysoké nemoci: obezita, jednoduchá obezita Tabu před testem: Nejezte příliš mastné potraviny s vysokým obsahem bílkovin den před testem, abyste předešli těžkému pití. Obsah alkoholu v krvi přímo ovlivňuje výsledky testu. Po 20:00 v den před lékařským vyšetřením byste se měli postit. Požadavky na vyšetření: Při odběru krve byste měli relaxovat, abyste se vyhnuli kontrakci krevních cév způsobené strachem a zvyšovali obtížnost odběru krve. Při měření je malé množství komplexu protein-barvivo adsorbováno na stěně kyvety a množství adsorpce komplexu je zanedbatelné. Po měření může být modrá kyveta promyta ethanolem. Proces inspekce Subjekty byly žilní odebrány a včas testovány na separaci séra. Nakreslete standardní křivku: Vezměte 96-jamkovou mikrotitrační destičku a přidejte činidla. Po přidání činidla přesně absorbujte 20 μl roztoku vzorku do jamky standardu pro enzymy, přidejte 200 μl činidla BCA, jemně protřepte, inkubujte při 37 ° C po dobu 30-60 minut, ochlaďte na pokojovou teplotu, použijte slepý pokus jako kontrolu a porovnejte při 590 nm na čtečce mikrodestiček. Barva s obsahem hovězího sérového albuminu jako abscisy a absorbance jako ordináty nakreslí standardní křivku. Použitím standardní křivky slepého pokusu jako kontroly byl obsah proteinu ve vzorku nalezen ze standardní křivky na základě absorbance vzorku. Nevhodné pro dav Lidé s významnou tendencí ke krvácení. Nežádoucí účinky a rizika 1, subkutánní krvácení: v důsledku doby lisování kratší než 5 minut nebo technologie odběru krve nestačí, atd. Může způsobit subkutánní krvácení. 2, nepohodlí: v místě vpichu se může objevit bolest, otok, něha, podkožní ekchymóza viditelná pouhým okem. 3, závratě nebo mdloby: při odebírání krve v důsledku emocionálního přetížení, strachu, reflexu způsobeného vzrušením nervů vagu, snížením krevního tlaku atd. Způsobeným nedostatečným přísunem krve do mozku způsobeným mdloby nebo závratěmi. 4. Riziko infekce: Používáte-li nečistou jehlu, můžete být vystaveni riziku infekce.