kapavka
Úvod
Úvod do kapavky Kvapavka je purulentní infekce genitourinárního systému způsobená Neisseria gonorrhoeae (dále jen Neisseria gonorrhoeae). Může také napadnout oči, hltanu, konečník a pánev, stejně jako rozšířené infekce. Je to jedna z běžných pohlavně přenosných chorob. . Kvapavka je přenášena pohlavním stykem a malé množství může být také přenášeno přes kontaminanty hnisu pacienta, které mohou být přenášeny na dítě prostřednictvím porodního kanálu. Základní znalosti Podíl nemoci: 0,012% Citlivé osoby: většinou se vyskytují u mladých mužů a žen Způsob přenosu: pohlavně přenosný kontakt Komplikace: Prostatitida, semenná vezikulitida, epididymitida, uretritida, zúžení močové trubice, zánětlivé onemocnění pánve, pánevní absces, bolest břicha
Patogen
Příčinou kapavky
Morfologie a barvení (25%):
Neisseria gonorrhoeae jsou oválného nebo fazolového tvaru, délka bakterií je 0,6 - 0,8 μm a šířka je asi 0,5 μm. Často jsou uspořádány ve dvojicích a sousední plochy jsou ploché nebo mírně konkávní, jako dvě fazole spárované dohromady, bez bičíků, bez spór. V těle akutní infekce je její morfologie typičtější, většinou v cytoplazmě, v chronické fázi je mimo buňku, gonokokové Gramovo zbarvení je negativní, pokud je obarveno alkalickou methylenovou modří, bakterie jsou modré, obarvené Pappehheim Saathof V té době jsou buňky červené a pozadí modré oblohy, což je velmi jasné. Neisseria gonorrhoeae má na umělém médiu pět různých koloniálních forem, jmenovitě T1, T2, T3, T4, T5, z nichž T1 a T2 jsou virulence, T3 a T4 jsou sterilní vlasy a nemohou infikovat člověka.
Struktura buněk (20%):
Patogenita Neisseria gonorrhoeae úzce souvisí se strukturou vně buněk. Vnější struktura Neisseria gonorrhoeae je vnější membránou. Hlavní složky vnější membrány jsou membránové proteiny, lipopolysacharid a pili a membránové proteiny mohou ulpívat na lidské sliznici. Prostřednictvím buněčné fagocytózy do lidských buněk, množení v buňkách, což vede k dezintegraci buněk, rozšíření gonokoků do submukózy způsobující infekci, má pili tendenci ulpívat na povrchu děložní dutiny a ústních epiteliálních buněk, patogenních a infekčních.
Odpor (25%):
Neisseria gonorrhoeae je jemnější, nejvíce se bojí sucha, je vhodný pro růst pod vlhkostí, teplota 35 ~ 36 ° C, obsahující 2,5% ~ 5,0% oxidu uhličitého, optimální pH pro růst je 7,0 ~ 7,5, fyzikálně-chemické faktory Neisseria gonorrhoeae Odolnost je poměrně nízká, zemře během 1 ~ 2 hodin ve zcela suchém prostředí, ale pokud je připevněna ke spodnímu prádlu a ložnímu prádlu, může přežít 18 až 24 hodin. Může přežít několik dní na silných hnisajících nebo mokrých předmětech. 50 ° C může přežít pouze 5 minut, Neisseria gonorrhoeae je velmi slabá proti běžně používaným mukobakteriálním fungicidům, je zvláště citlivá na rozpustné stříbrné soli, roztok dusičnanu stříbrného v poměru 1: 4 000 může způsobit, že do 7 minut odumře, takže Neisseria gonorrhoeae v hnisu 2 min Během smrti ho může zabít 1% roztok fenolu (kyseliny uhličité) během 3 minut. Kromě rezistentního kmene je Neisseria gonorrhoeae citlivá na antibiotika, ale minimální inhibiční koncentrace antibiotik se postupně zlepšuje.
Patogenem je neisseria gonorrhoeae, také známá jako gonokok, označovaný jako Neisseria gonorrhoeae, patřící do rodiny Neisseria, Neisseria.
1. Zjistil, že v roce 1879 Neisser izoloval kapavku z 35 sekrecí akutní uretritidy, vaginitidy a neonatální akutní konjunktivitidy V roce 1885 byl Bumm použit v lidském, hovězím nebo ovčím sérovém médiu. Pěstování Neisseria gonorrhoeae bylo úspěšné a stejné příznaky by bylo možné vyvolat naočkováním kmene v močové trubici zdravých lidí. V tomto bodě byl zjištěn závěr, že Neisseria gonorrhoeae je patogenem kapavky.
2. Kultura a biochemické vlastnosti rostou dobře na médiu obsahujícím živočišné bílkoviny, jako je krev, sérum, vaječný žloutek, ascites atd. Vhodná teplota pro kultivaci je 35-36 ° C, vhodné pH je 7,5 a je třeba ji kultivovat v prostředí 5% oxidu uhličitého. .
V lidské močové trubici lze glukózu fermentovat, ale fruktózu nelze fermentovat, a proto lze tuto vlastnost použít jako test fermentace glukózy pro identifikaci s meningokokem, který nevytváří matici sputa a sirovodík. Produkce oxidáz má při včasné identifikaci určitý význam.
3. Klasifikace živin Podle základů výživy aminokyselin a nukleových kyselin požadovaných pro gonokokovou kultivaci lze Neisseria gonorrhoeae rozdělit do 35 typů živin, z nichž Arg, Hyx, Ura typu Neisseria gonorrhoeae mohou způsobovat asymptomatickou kapavku a diseminovanou kapavku. Odolné vůči séru, ale citlivé na penicilin a další léky.
Patogeneze
(1) Afinita k epitelu: Neisseria gonorrhoeae má zvláštní afinitu k sloupcovému epitelu a přechodnému epitelu. Mužská a ženská močová trubice, samice děložního čípku pokrývá sloupcový epitel a přechodný epitel, takže je náchylná k invazi gonokoků a samice vaginální Vrstevnatý skvamózní epitel je pokryt silnou rezistencí, obvykle není invazován nebo zánět je velmi lehký, takže gonokoková vaginitida je u dospělých žen vzácná. Protože vaginální sliznice je sloupcový epitel, je mladá dívka náchylná k infekci a kůže není snadno gonokoková. Infekce, vzácné případy primární gonokokové kožní infekce, lidé nemají žádnou přirozenou imunitu vůči gonokokovým bakteriím, po zotavení může dojít k opětovné infekci.
(2) Adheze: Specifický receptor na gonokokové pili se může vázat na odpovídající část slizniční buňky; protein vnější membrány II může zprostředkovat proces adheze; může také uvolňovat enzym rozkladající IgAl, který odolává odmítnutí buňky, Neisseria gonorrhoeae a epiteliální buňky se rychle ulpívají navzájem a pH v mikroprostředí, iontový můstek, hydrofobní struktura a pohlavní hormony mohou také podporovat proces adheze.
(3) Invaze a infekce: Neisseria gonorrhoeae adsorbuje na mikrovilli epiteliálních buněk a protein vnější membrány I je přenesen na buněčnou membránu a poté je Neisseria gonorrhoeae fagocytován do buněk a Neisseria gonorrhoeae může být adsorbována na sperma, které může být rychle absorbováno Stoupání do děložního hrdla může hlen děložního čípku dočasně zabránit Neisseria gonorrhoeae do děložní dutiny a ve sloupcových epiteliálních buňkách děložního čípku způsobí onemocnění. Jakmile buňky gonokoků napadnou buňky, budou proliferovat a poškodit epiteliální buňky. Cocci do submukózního prostoru, což způsobuje infekci submukózy.
(4) Tvorba lézí: Neisseria gonorrhoeae napadá submukózní vrstvu a pokračuje v množení. V první generaci se bude množit během 36 hodin. Synergickým působením lipotoxysacharidu endotoxinu, komplementu a IgM vytvoří zánětlivou reakci, která způsobí zčervenání a otok sliznic a současně i bílé krvinky. Agregace a smrt, nekróza a vylučování epiteliálních buněk, hnis se objevily a léze byly nejzávažnější v otvorech žláz a krypt.
(5) šíření šíření: zánět způsobený gonokokovou infekcí se může šířit podél močových cest, šíření pohlavních cest, u mužů může být rozšířeno na prostatu, semenné váčky, vas deferens a epididymis, u žen se může rozšířit do dělohy, vejcovodů a pánve, vážné Neisseria gonorrhoeae může vstoupit do krevního řečiště a šířit se do různých tkání a orgánů v celém těle, což vede k šíření infekce.
Prevence
Prevence kapavek
Je třeba také poznamenat, že je třeba zabránit prevenci kapavek, aby pacienti s kapavkou neměli spát s dětmi, zejména dívky, koupele nebo veřejné koupele, osušky atd. V oblastech s vysokou prevalencí by všichni novorozenci měli být léčeni roztokem dusičnanu stříbrného nebo jinými účinnými antibiotiky. Oční kapky.
1. Podporovat znalosti sexuálně přenosných nemocí, podporovat vznešenou morálku a zakázat prostituci.
2. Použijte kondom ke snížení výskytu gonokokové infekce.
3. Profylaktické použití antibiotik může snížit riziko infekce: Můžete užívat norfloxacin nebo amoxicilin před a po pohlavním styku, což může účinně zabránit sexuálně přenosným infekcím.
4. Sexuální partneři jsou léčeni současně.
5. Pacienti věnují pozornost osobní hygieně a izolaci, ne spát s rodinou, dětmi, zejména dívkami, a koupelně.
6. Zavést systém neonatálního roztoku dusičnanu stříbrného nebo jiných kapiček antibiotik, aby se zabránilo gonokokové oftalmii.
Komplikace
Krevní komplikace Komplikace Prostatitida Seminná vezikulitida Epididymitida Uretritida Zúžení močové trubice Zánětlivé onemocnění pánve Pelvický absces Bolest břicha
Komplikace kapavek u mužů
1, kapavka v kombinaci s příznaky prostatitidy: 1 den nebo půl dne před nástupem akutní prostatitidy často zastaví redukci hnisu nebo hnisu, pacienti mají vysokou horečku, časté močení a bolest, rektální vyšetření ukázalo zvětšení prostaty, citlivost, moč Kapalná tekutina, pokud není léčba včasná, prostata může tvořit abscesy, pacienti s chronickou prostatitidou obecně nemají žádné zjevné příznaky, první močení po probuzení, otvor v močové trubici má jev utěsnění, malé množství bílých sekretů je vypuštěno, když je vymačkán penis, sekrece Vyšetření může odhalit epitelové buňky, několik hnisových buněk a gonokok.
2, kapavka v kombinaci se symptomy semenné vesikulitidy: akutní horečka, časté močení, dysurie, terminální zákal moči a krev, rektální vyšetření se může dotknout oteklého semenného váčku a těžké citlivosti, chronické příznaky, žádné rektální vyšetření Ukazuje, že semenný váček je tvrdý a fibrotický.
3, kapavka s příznaky epididymitidy: obvykle v kombinaci s akutní uretritidou, unilaterální, většinou nízká horečka, epididymální otok a citlivost, ipsilaterální třísla a dolní břicho mají reflexní bolest, palpace ukazuje epididymální otok, existují Intenzivní něha, zákal moči.
4, mužská kapavka může být kombinována s strikturou močové trubice: opakovaná kapavka může způsobit strikturování močové trubice, malý počet vas deferens nebo dokonce infarkt, a pak sekundární sperma cysta a neplodnost.
Komplikace ženských kapavek
Ženská kapavka a příznaky zánětlivé nemoci gonokokové pánve, včetně akutní salpingitidy, endometritidy, abscesu vaječníků sekundární vejcovody a abscesu pánve způsobených rupturou, peritonitidou atd., V důsledku léčby, špatného zacházení, pacientek s gonorou, extrémní Je snadné se vyvinout z genitourinární infekce na pánevní a vedlejší infekce, což způsobuje vážné následky, jako je neplodnost, bolest břicha nebo dokonce život ohrožující.
Příznak
Příznaky kapavky Časté příznaky Nedostatek bolesti zad, bílý hlen, moč, nevolnost, libido, těžká bolest, zánět, ztráta chuti k jídlu, anální svědění
Klinické projevy gonokokové infekce závisí na stupni infekce, citlivosti organismu, virulenci bakterií, umístění infekce a délce infekce. Současně to souvisí se zdravím těla, zda je sexuální život nadměrný, a alkoholismem. Podle klinických projevů lze kapavku rozdělit na žádnou kapavku a komorbidní kapavku, asymptomatickou a symptomatickou kapavku, rozšířenou kapavku a akutní a chronickou kapavku.
Za prvé, žádné komplikace kapavka
a) mužská kapavka bez komplikací
Akutní gonokoková uretritida (akutní kapavka): Inkubační doba je 1-14 dní, často 2-5 dní. Od začátku akutní uretritida, zarudnutí, svědění a mírné brnění v močové trubici, následovaný tenkým výtokem hlenu, což způsobuje nepohodlí při močení. Po přibližně 2 dnech se sekrece stala lepkavou, močová trubka přetékala a hnis byl hluboký. Žlutá nebo žlutozelená, doprovázená zvýšenými příznaky nepohodlí močových cest, zarudnutí a otoků, které se vyvinuly v žilách penisu a části močové trubice, časté močení, naléhavost, dysurie, potíže s močením, nepohodlný pohyb a časté erekce penisu v noci. Může se vyskytnout otok tříselných lymfatických uzlin, zarudnutí a bolest a také hnisavé. První týden akutních příznaků je nejzávažnější, pokud se neléčí, příznaky se postupně snižují nebo mizí přibližně po jednom měsíci. Dva týdny po nástupu akutní přední uretritidy má asi 50-70% pacientů gonokokovou invazi zadní močové trubice, která je charakterizována močovým problémem, častým močením a akutní retencí moče. Charakteristikou dysurie je to, že bolest nebo bolest se na konci močení zhoršuje a je podobná akupunktuře. Někdy je bolest v perineální oblasti a nemusí existovat hematurie. Po 1-2 týdnech příznaky postupně vymizely. Systémové příznaky jsou obvykle mírné, některé mohou mít horečku až do 38 ° C, celkovou nevolnost, ztrátu chuti k jídlu atd.
Chronická gonokoková uretritida (chronická kapavka): Příznaky trvající déle než 2 měsíce se nazývají chronická gonokoková uretritida. Protože léčba není důkladná, může být Neisseria gonorrhoeae skrytá v těle močové trubice, v paruretrálních žlázách a v kryptách močové trubice, aby se průběh onemocnění stal chronickým. Pokud je pacientova ústava slabá, trpí anémií, tuberkulózou, stav začíná chronickým procesem, většinou u kombinované infekce přední a zadní močové trubice, dobré invaze žárovky, membrány a prostaty. Klinické projevy močové trubice mají často pocit svědění, pálení nebo mírné brnění, jemný tok moči, slabost močení, kapání. Většina pacientů má v močovém traktu malé množství serózního sputa v časných ranních hodinách. Pokud se vymačkají kořeny genitálií nebo penisu, přeteče tenký hlen. Moč je v podstatě čistá, ale je tu hedvábí.
(2) Ženy bez komplikací kapavka
Hlavní část ženské primární gonokokové infekce je děložní hrdlo. Neisseria gonorrhoeae může ulpívat na stratifikovaném spinocelulárním epitelu. Infekční místo Neisseria gonorrhoeae je pozorováno na křižovatce spinocelulárního epitelu děložního čípku. Pacienti s kapavkovou kapavkou často nemají žádné příznaky v rané fázi, takže inkubační období je obtížné určit. Cervikální přetížení, něha, zvýšené hnisavé sekrece, často genitální svědění a pocit pálení, příležitostně nižší bolest břicha a bolest zad. Tyto atypické příznaky způsobují, že pacienti často nechodí na kliniku, takže se stávají hlavním zdrojem infekce; gonokoková uretritida se často vyskytuje 2–5 dní po pohlavním styku, uretrální kongesci, něhu a hnisavém vylučování, mírné Časté močení, naléhavost, dysurie, pálení během močení, hnisavý výtok v močové trubici, zánět vestibulárních žláz, často jednostranný, zarudnutí a otok při otevření žlázy, silná bolest, těžká tvorba abscesů. Existují horečka a další systémové příznaky, gonokoková vaginitida je méně častá, příznaky starších jsou mírné, někteří pacienti mají břišní otoky, bolesti zad, vaginální výtok, někteří pacienti mají nižší bolesti břicha a menoragii, ženy gonokokové vulvy Vaginitida, projevující se jako vulvární a vaginální zánět. V vagíně a močové trubici je více vaginálních purulentních sekretů, někdy žlutých a zelených sekretů, bolestivých močení a zarudnutí v pochvě. Sekrece mohou proudit do konečníku a způsobit podráždění. Ve vážných případech může infikovat konečník a způsobit gonokokovou proktitidu.
Zadruhé, jsou zde komplikace kapavky
a) Muži mají komorbidní kapavku:
Krevní uretritida má různé komorbidity, zejména prostatitidu, semennou vezikulitidu, epididymitidu.
1. Prostatitida: Akutní prostatitida je způsobena výtokovou trubicí a žlázou Neisseria gonorrhoeae, které vstupují do prostaty. Existuje horečka, zimnice, bolest v perineální dutině a infekce močových cest doprovázené dysurií. Při vyšetřování je prostata oteklá a něžná. Neisseria gonorrhoeae však není běžnou příčinou akutní prostatitidy. Prostata způsobená Neisseria gonorrhoeae je charakterizována zejména chronickými lézemi. Příznaky jsou mírné, dochází k perineálnímu nepohodlí, bolesti penisu, při ranním otevření močové trubice dochází k jevu „ústa“ a je vidět moči v moči. Masážní tekutina prostaty má hnis a lecitin. , stěr nebo kultura k nalezení gonokoků, anální vyšetření se může dotknout malých uzlů na prostatě, a tam je nepohodlí nebo bolest, drenáž hnisu v blízkosti drenážní trubice, aby se vytvořila kontrakce jizvy, ovlivňuje ejakulaci, což vede k neplodnosti.
2. Epididymitida: obvykle se vyskytuje po akutní uretritidě, většinou na jedné straně. Je nízká horečka, otoky epididymis, ipsilaterální třísla a dolní část břicha mají reflexní bolest, začátek a hranice varlat jsou jasné, postupně nejasné, citlivost varlat, otok, těžká citlivost. Moč je často zakalená. Současně může existovat prostatická a semenná vezikulitida.
3. Semenná vezikulitida: horečka, časté močení, naléhavost, dysurie, zákal močí a krev. Rektální vyšetření se může dotknout oteklého semenného váčku a může mít těžkou citlivost. Chronická semenná vezikulitida obvykle nemá žádné příznaky. Rektální vyšetření ukazuje, že semenný váček je tvrdý a fibrotický.
4. Zánět močové žlázy: vyskytuje se v perineu nebo v jeho okolí, existují uzly velikosti prstů, bolest, akutní hnisání a ulcerace, komprese močové trubice a dysurie, mohou mít systémové příznaky, jako je horečka, pomalý postup.
5. Zúžení močové trubice: opakovaní autoři mohou způsobit zúžení močové trubice, může dojít k malému počtu vas deferens nebo obstrukcí, dysurii, ztenčení močových cest a těžké zadržování moči. Sekundární vas deferens, semenné vesikulové cysty a neplodnost.
(2) Ženy mají komorbidní kapavku
Hlavní komplikací ženské kapavky je zánět gonokokových krabic, jako je akutní salpingitida, endometritida, sekundární vaječníkový absces vajcovodu a pánevní absces způsobený rupturou, peritonitida. Náhlý nástup po menstruaci je vysoká horečka, zimnice, bolesti hlavy, nevolnost, zvracení, bolest břicha, zvýšená hnisavá leucorrhea. Obě strany nástavce jsou zesíleny a něžné.
Zatřetí, další části kapavky:
1. Zánět spojivek: Novorozenci se objevují více než 2–3 dny po narození, většinou bilaterální, otok víček, purulentní sekrece, dospělí většinou samoočkování, často jednostranní, vykazující stejného novorozence. V důsledku přetečení hnisu, pokud je „pusté oko“ zpožděno, je rohovka zapařená a rohovka je perforovaná. Vede k oslepnutí.
2. gonokoková faryngitida: nejčastěji se vyskytuje u orálního sexu, tzv. „Ústní“ západní homosexuálové nebo heterosexuálové se projevují jako akutní faryngitida nebo akutní tonzilitida, příležitostná horečka a cervikální lymfadenopatie. Existují příznaky, jako je sucho v krku, bolest v krku, bolest v krku.
3. Neisseria gonorrhea: pozorováno hlavně u mužské homosexuality. Ženy jsou většinou způsobeny vaginálními infekcemi. Tabulka je urgentní a těžká, jsou zde hnis a krev, kongesce sliznice análního kanálu, hnisavá sekrece, gonokoková kultura pozitivní.
Začtvrté, rozšířená gonokoková infekce
Distribuovaná gonokoková infekce je způsobena rozšířením gonokokových bakterií krví do celého těla, což má za následek závažnější systémovou infekci. Míra výskytu je asi 1% pacientů s kapavkou. Většina kmenů způsobujících diseminovanou gonokokovou infekci je AHU-výživná, kmen má stabilní odolnost proti normálnímu lidskému séru, kromě toho má normální lidské sérum IgM protilátku proti gonokokovému lipopolysacharidu. S pomocí komplementu je velký. Většina gonokoků má baktericidní účinek a pacienti postrádající komplementové složky C5, C6, C7 a C8 jsou náchylní k gonokokové sepse nebo gonokokové meningitidě.
(1) gonokoková sepse: pacient začíná mít horečku, tělesná teplota může být až 40 ° C, ale obvykle mezi 38 ° C a 40 ° C, zimnice není běžná, někteří pacienti mají kožní papuly, ekchymózy, pustuly, hemoragie Nebo nekrotizující poškození kůže, některé kožní léze mají příznaky bolesti. V lézích lze fluorescenční imunostainování použít k detekci růstu Neisseria gonorrhoeae nebo kultivované Neisseria gonorrhoeae a PCR k detekci DNA Neisseria gonorrhoeae pozitivní. Patologickou tkání léze je povrchový vřed s tvorbou hnisu, difuzní zánět dermis a podkožní tkáně, polymorfonukleární infiltrace leukocytů, postižení malých krevních cév, trombóza a lokalizovaná nekróza.
(B) gonokoková artritida: otok kloubu, bolest, pro jednu nebo několik septických artritid. Obecně asymetrické, zřídka postihující kyčelní, ramenní a páteřní klouby. Test na kloubní tekutinu je přítomen kapavku, která může vést k fibróze způsobené destrukcí kostí a rigiditou kostí a kloubů.
(C) gonokoková keratóza: může být způsobena gonokokem nebo jeho toxiny, nenalezne gonokokové léze v kožních lézích, často s gonokokovou artritidou, kožní léze jsou dobré pro ruce a nohy, kotníkový podpatek a pas . Náplasti nebo plaky, které jsou obvykle zploštělé a mírně nabobtnalé, kónické, žluté nebo měďově červené nebo šedavě bílé. Kožní léze palmarního sputa vykazovaly nadrženou hyperplázii a velkou keratinizaci.
(D) gonokoková endokarditida: gonokok je hlavním patogenem endokarditidy v prvních několika desetiletích užívání antibiotik, gonokoková endokarditida je téměř neviditelná, gonokoková endokarditida a další typy Endokarditida má stejné klinické projevy. Endokarditida často zahrnuje aortální nebo mitrální chlopeň, subakutní nebo akutní endokarditidu v důsledku rychlého zničení chlopně, což vede k smrti.
(5) gonokoková meningitida: méně častá, může být spojena s artritidou a typickou vyrážkou pro rozlišení meningokokové meningitidy.
Za páté, vliv kapavky na těhotenství a novorozence
Když žena prochází kapavka se salpingitidou, může to vést k neplodnosti. Výskyt neplodnosti způsobené kapavkou ženy je asi 20% a incidence neplodnosti se zvyšuje s rostoucím počtem infekcí. U žen infikovaných kapavkou více než třikrát může incidence neplodnosti dosáhnout 70%. Cervikální gonokokový zánět může vést k časnému prasknutí membrán, intra-amniotické infekci, intrauterinní infekci, intrauterinní retardaci růstu a předčasnému porodu. Novorozenci mají vysokou morbiditu a úmrtnost v důsledku předčasného porodu, nízké tělesné hmotnosti a sepse. Infekce proti gonokokovým bakteriím po narození může způsobit endometritidu, horečku puerpera, těžkou poporodní sepsi, novorozeneckou gonokokovou konjunktivitidu a vaginální vaginální vulvitidu.
Přezkoumat
Vyšetření na kapavka
Laboratorní inspekce:
Laboratorní testy Neisseria gonorrhoeae zahrnují nátěr, kultivaci ke kontrole Neisseria gonorrhoeae, detekci antigenu, test citlivosti na léčivo a stanovení PPNG a genetickou diagnostiku.
(1) Zkouška stěrem:
Vezměte pacientovy uretrální sekrece nebo cervikální sekrece pro Gramovo barvení a vyhledejte Gram-negativní v polymorfonukleárních leukocytech
Diplococcus, nátěr pro pacienty s jednoduchou gonokokovou přední uretritidou s velkým počtem hnisavých sekrecí, pozitivní poměr této metody je asi 90%, lze zpočátku diagnostikovat, vylučování ženského tlustého střeva, více bakterií, špatná citlivost a specifičnost Pozitivní míra je pouze 50–60%, a je to falešně pozitivní, proto Světová zdravotnická organizace doporučuje používat ke kontrole pacientek kultivační metodu. Chronická kapavka má v sekrecích méně pozitivních gonokokových bakterií, takže pozitivní frekvence je nízká. Zvyšte rychlost detekce.
Hrtanový nátěr zjistil, že gramnegativní diplococcus nemohl diagnostikovat kapavku, protože jiné druhy Neisseria jsou v hltanu normální a že nátěr pozitivní na atypické příznaky by měl být dále prozkoumán.
(2) Výcvik a kontrola:
Kultura Neisseria gonorrhoeae je důležitým důkazem pro diagnózu. Kultivační metoda je citlivá metoda pro muže s mírnými nebo asymptomatickými symptomy.Pokud je kultura pozitivní, může být diagnóza potvrzena. Před genetickou diagnostikou je kultura doporučena Světovou zdravotnickou organizací. Jediným způsobem, jak provést screening na kapavku, je použití modifikovaného média Thayer-Martin (TM) a média New York (NYC). Domácí použití čokoládového agaru nebo krevního agaru obsahuje antibiotika, volitelně Inhibujte růst mnoha jiných bakterií, kultivace při 36 ° C, 70% vlhkost, 5% -10% CO2 (svíčka) prostředí, pozorování 24-48 hodin, morfologie kolonie, Gramovo barvení, oxidace Identifikace enzymatickým testem a testem kvašení cukru je pozitivní míra kultivace u mužů 80% až 95% a u žen 80–90%.
(tři) detekce antigenu
1. Imunoanalýza na pevné fázi (EIA): Může být použita k detekci gonokokových antigenů v klinických vzorcích. Může být použita v populacích žen v oblastech s vysokou mírou prevalence a nemůže být kultivována nebo vzorky musí být zaslány po dlouhou dobu. Diagnostikovat gonokokové infekce.
2. Přímý imunofluorescenční test: přímá detekce detekcí monoklonálních protilátek proti proteinu vnější membrány I Neisseria gonorrhoeae
Epidemický fluorescenční test, ale v současné době není citlivost samců a samic bipolárních vzorků vysoká, specificita je nízká a úroveň úsudku experimentátora, takže experiment nelze doporučit pro diagnostiku gonokokové infekce.
(čtyři) genetická diagnostika
1. Diagnostika genové sondy Neisseria gonorrhoeae
Sondy pro gonokokové genové sondy jsou: plasmidové DNA sondy, chromozomální genové sondy a rRNA genové sondy.
(1) Plazmidová DNA sonda
1 Sonda pro skrytou plazmidovou DNA, plazma Neisseria gonorrhoeae je rozdělena do tří typů: plazmid zygosity, největší molekula, 36 kb DNA, plazmid odolný vůči léčivům se skládá ze dvou plazmidů, délka DNA 5,6 kb a 7,1 kb, skrytý plazmid 4,2 kb, Kryptický plazmid je přítomen v 96% klinických izolátů Neisseria gonorrhoeae, jiné Neisserias tento plazmid neobsahují, takže jeho sekvence může být použita jako specifická sonda DNA pro detekci Neisseria gonorrhoeae. Torres používá technologii hybridizace nukleových kyselin k detekci Neisseria gonorrhoeae. Za účelem zakrytí plazmidu byla sonda použita k detekci 134 kmenů Neisseria gonorrhoeae a kmenů souvisejících s 131. 124 kmenů Neisseria gonorrhoeae bylo pozitivních na hybridizaci, což představuje 93%. Mohly také zkříženě reagovat s jinými druhy Neisseria. Test citlivosti jehly ukázal, že bylo možné detekovat 102 CFU Neisseria gonorrhoeae. Bylo prokázáno, že genová sekvence CPPB v kryptickém plazmidu byla ve všech gonokokových chromozomech (včetně kmenů bez plazmidu), takže genová sonda CPPB má dobrou specificitu a citlivost. Sex, Torres et al., Použil genovou sondu CPPB k detekci 201 klinických vzorků pomocí neradioaktivního systému značení digoxinem s citlivostí 95% a specificitou 98%.
2 sonda plazmidové DNA rezistentní na léčivo
Plazmidy rezistentní na Neisseria gonorrhoeae lze rozdělit na:
1 Toxin produkující gonokoková bakterie (PPNG) je pozitivní na β-laktamázu;
2 má vysokou hladinu plazmatem zprostředkované rezistence na tetracyklin gonokokový (TRNG).
Kmen PPNG byl poprvé izolován v laboratoři v roce 1976. Kmen obsahuje gen kódující enzym produkující serotoniny, který lze integrovat do chromozomu nebo do plasmidové DNA a ten se většinou nazývá modrý. Toxinový enzymový plasmid, dva druhy plazmidů, 7,4 kb, respektive 5,3 kb, Pescador navrhl v roce 1998 specifickou sondu pro detekci gonokokového β-laktamázového genu, který byl označen enzymovou chemiluminiscencí, hybridizací v kapalné fázi. Fotometrické měření je množství specifických hybridů. 104-105 CFU kmene PPNG lze detekovat během 4 h. Přestože kmen TRNG je rezistentní na tetracyklin, je obvykle citlivý na β-laktamázová a chinolonová antibiotika, a proto v experimentu Test citlivosti lze klasifikovat jako citlivé bakterie: Pescador používá oligonukleotidovou sondu proti genu tetm tetracyklinového gonokoka (TRNG), který je zprostředkován tetracyklinem, značený enzymem chemiluminiscence a hybridizován v kapalné fázi. Z klinických vzorků bylo přímo detekováno 1,5 x 104 CFu Neisseria gonorrhoeae obsahující gen tetm.
(2) Chromozomová sonda
Chromozomální sondy zahrnují známé genové sondy, jako jsou pili DNA sondy a paI genové sondy, které hrají důležitou roli v procesu gonokokové infekce lidských buněk; genové sondy s neznámou funkcí, tyto sondy Sekvence je komplementární ke specifické sekvenci chromozomu, ale funkce těchto genových sekvencí není v současné době známa. Výše uvedené dvě chromozomální sondy mají nízké detekční číslo kvůli nízkému počtu kopií komplementární sekvence v Neisseria gonorrhoeae, takže detekční citlivost je nízká, takže se obecně nepoužívá, pokud Existují speciální výzkumné účely.
(3) genová sonda rRNA
Genová sonda rRNA používá DNA komplementární k rRNA jako sonda a cílovou sekvencí sondy je sekvence rRNA a genová sonda rRNA je charakterizována:
1 může zvýšit citlivost detekce sondy, genová sonda rRNA může současně detekovat molekuly rRNA a molekuly DNA;
2rRNA je evolučně konzervovaná;
3 hybridizační metoda je jednoduchá a rychlá;
4 Protože je obsah rRNA vysoký, nemusí být vzorek obohacen Gonokoková detekční sonda PACE C produkovaná Gen-Probe ve Spojených státech používá jako detekční cílovou sekvenci rRNA a její gen a je radioaktivně značena a může být detekována do 2 hodin. Peter použil tuto sondu k detekci 395 klinických vzorků. Citlivost a specificita byla 92,9%, respektive 99,4%. Věřil, že systém PACE C je spolehlivou metodou pro screening gonokokových bakterií v klinických vzorcích. Asymptomatické gonokokové infekce, kterých je v současné době obtížné dosáhnout.
2, detekce amplifikace gonokokového genu
Technika sond popsaná výše detekuje gonokokovou metodu, ačkoli má velké zlepšení v citlivosti, specificitě a výhodnosti než metoda kultivace, ale stále má určitá omezení, jako je Neisseria gonorrhoeae, která ve většině případů vyžaduje vzorky. Koncentrace je velmi vysoká a výskyt technologie PCR a ligázové řetězové reakce dále zlepšuje citlivost detekce Neisseria gonorrhoeae, má výhody rychlého, citlivého, specifického a jednoduchého a může přímo detekovat velmi malé množství patogenů v klinických vzorcích.
(1) Extrakce DNA Neisseria gonorrhoeae
1 DNA extrakce z kultury
Kultivovaná Neisseria gonorrhoeae byla rozpuštěna v alkalickém lyzátu v koncentraci 102 cfu / ml. Lyzát sestával z 1 M NaCl 1 M NaOH a 1% dodecylsulfátu sodného, lyzát byl promíchán a vařen po dobu 1 minuty, pak 100 ul. Alkalický lyzát byl neutralizován 1M Tris pH 7,0, extrahován jednou Trisovým rovnovážným fenolem, extrahován jednou fenol-chloroformem a poté vysrážen absolutním ethanolem nebo isopropanolem, Extrahovaná DNA byla rozpuštěna ve 30 ul destilované vody nebo TE pufru. V kapalině.
2 extrakce vzorku klinického bavlněného tampónu
Bavlněné tampony se sekrecemi byly stlačeny ve 2 ml sterilního fyziologického roztoku chloridu sodného nebo pufru PBS po dobu 1 minuty, aby se vzorky rozpustily v roztoku co nejvíce, a bavlněné tampony byly odstraněny a suspenze byla při 2-3000 r / Centrifugujte po dobu 5 minut po minutě, aspirujte supernatant a znovu rozpusťte buňky ve 100 μl 1 x PCR pufru obsahujícího 0,4% Tween 20 a 200 μg / ml proteinázy K. Buněčná suspenze byla zahřívána na 50 až 60 ° C po dobu 1 hodiny, poté zahřívána na 95 ° C po dobu 10 minut. Inaktivovaná proteináza K byla centrifugována při 12 000 r / min po dobu 10 minut a supernatant obsahoval templát DNA.
(2) Návrh primerů PCR
Protože gen CPPB Neisseria gonorrhoeae je přítomen v gonokokálním chromozomu a v kryptickém plazmidu 4,2 kb a v 96% Neisseria gonorrhoeae, je v oblasti genů CPPB navrženo mnoho PCR primerů.
Délka fragmentu sekvence cílového genu primerové sekvence (bp)
CPPB NG1 5'GTT TGG CTG GTT GAT TCA AG 3 '633
NG2 5'GCA AGA TTT CCG ATTT GGC G 3 '
CPPB HO1 5'GCT ACG CAT ACC CGC GTT GC 3 '390
HO2 5'CGA AGA CCT TCG AGC AGA CA 3 '
rRNA primer 1 5'-AGG CTG TTG CCA ATA TCG GC-3 '206
Primer 2 5'-ACA CTC GAG TCA CCC AGT TC-3 '
CPPB GC1 5'CTT ATC GTT TGG CTG GTT GAT TC 3 '435
GC2 5'ACC AAG ACC AAA GGT TTG ACA CTG 3 '
GC3 5'ATT TTC CAG TGT CAA AC 3 '241
GC4 5'TAT TCA AGC CCT ATC TG 3 '
(3) PCR amplifikace
Vezměte 2 μl extraktu DNA Neisseria gonorrhoeae a přidejte 28 μl reakčního roztoku.Konečný reakční PCR roztok obsahuje 100 μmol / l dNTP, 0,5 μmol / l primerů, 1 U Taq DNA polymerázy, 1,5 mmol / L Mg2 + a sterilní parafinový olej. 30 μl, 1000 r / min odstřeďování po dobu 30 s, PCR amplifikační cyklus, reakční podmínky: 94 ° C denaturace 1 min, poté 94 ° C 30 s, 57 ° C 1 min, 72 ° C 1 min, celkem 30 cyklů, a konečně prodloužení o 5 ° C 5 min.
Amplifikovaný produkt byl podroben elektroforéze na 2% agarózovém gelu po dobu 30 minut, obarvený ethidiumbromidem a amplifikovaný fluorescenční pás DNA byl pozorován pod ultrafialovým světlem. Velikost amplifikované molekuly by měla být konzistentní s velikostí amplifikované cílové sekvence.
(4) Citlivost a specificita PCR
Protože CPPB také obsahuje gen CPPB na gonokokovém chromozomu, který neobsahuje kryptický plazmid, bude mít 96% gonokokových bakterií kryptický plazmid, a proto primery používající jako cílovou sekvenci CPPB mají extrémně vysokou citlivost. Experimenty ukazují, že obecná tradice Jednostupňová metoda PCR (GC1-GC2) může detekovat tři Neisseria gonorrhoeae, zatímco jednonásobná vnořená PCR (GC2-GC4) může detekovat <0,3 Neisseria gonorrhoeae (9 CPPB genů) Tyto primery byly testovány podle specificity. Může amplifikovat DNA Neisseria gonorrhoeae, ale neprodukuje specifické produkty pro N. gonorrhoeae.
(5) Metoda PCR s jednou trubicí vnořenou
Na základě tradiční vnořené PCR byly speciálně navrženy dva páry primerů PCR, dva vnější primery (GC1, GC2) byly 25b, teplota nasedání byla relativně vysoká (68 ° C) a vnořené vnitřní dva primery, GC3-GC4. Pro teplotu žíhání 17b nižší (46 ° C) jsou ostatní složky reakčního roztoku PCR stejné jako u obecné PCR, takže vnější primer je nejprve amplifikován kontrolou teploty žíhání (68 ° C), po 20–30 cyklech (poprvé) PCR) a poté snížit teplotu žíhání (46 ° C), aby vnitřní primery použily první PCR produkt jako templát pro vnořenou amplifikaci, může citlivost PCR dosáhnout 0,3 Neisseria gonorrhoeae.
(6) Metoda detekce řetězové reakce Neisseria gonorrhoeae ligázy (LCP)
V současné době je široce používána metoda detekce Neisseria gonorrhoeae pomocí PCR a její specifičnost a citlivost jsou neustále zlepšovány a současně je na ni aplikována další technika genetické diagnostiky, ligázová řetězová reakce (LCP) s její vysokou specificitou a vysokou citlivostí. Při detekci koků se LCP liší od PCR v tom, že LCP používá čtyři páry primerů, použitým enzymem je ligáza, ligáza může spojovat dva sousední primery a dva primery mohou být použity jako templáty pro další dva primery. Ten může být ligován působením ligázy a může být použit jako templát pro 30-40 cyklů. Metoda ošetření templátu použitá pro LCP je ekvivalentní s přípravou templátu PCR. Sonda použitá pro LCP může být navržena na genu CPPB. Abbott Laboratories, navržený na chromosomálních genových sekvencích, jako je například gen opa-1, navrhl čtyři LCP sondy v oblasti 48 bp genu pro opa-1, protože gen opa-1 je v gonokokovém chromozomu 11krát. Opakujte proto, že sada LCP sond má vysokou citlivost a specificitu, reakční proces LCP:
Šablona byla přidána k LCP reakčnímu roztoku, LCP reakční roztok: 20 mmol / l Tris-HCI, pH 7,6; 100 mmol / L KCl 10 mmol / L MgCl2; 1 mmol / L EDTA; 10 mmol / L NAD +; 10 mmol / L DTT , dvě sousední sondy s označením každého 40fmol / L, neznačená sonda každých 40fmol / L, 15U žáruvzdorná ligáza, reakční podmínky: 97 ° C 1s, 55 ° C 1s, 62 ° C 50s, 40 cyklů 100 mikrolitrů reakčního produktu bylo přidáno na mikrotitrační destičku mikrotitrační destičky a byla provedena barevná reakce. Nakonec byla odečtena hodnota světla pomocí čtečky mikrodestiček. Podle Buimerova experimentu byla citlivost LCP při detekci samčího vzorku uretrální bavlny 100% a byla získána moč. Vzorek byl 88,9%, ženský vzorek děložního čípku byl 95,4% a specificita metody LCP byla až 100%, což bylo významně vyšší než specificita PCR a zabránilo se výskytu falešně pozitivních výsledků.
3. Opatření pro klinickou genetickou diagnostiku Neisseria gonorrhoeae
Metoda genetické diagnostiky pro klinickou detekci Neisseria gonorrhoeae v současné době používá převážně metodu PCR, ale tato metoda by měla věnovat pozornost několika problémům při klinické detekci.
(1) Návrh primerů Kromě výše uvedených gonokokových PCR primerů může být také navržen z jiných genů, ale
Je to sekvence primeru, která by měla být specifická, protože chromozom bakterie je velký, mnoho genových sekvencí není jasné, současně mezi bakteriemi existuje určitá homologie a mezi plasmidovými sekvencemi obsaženými v bakteriích je také homologie. Proto musí být primery navrženy pro srovnávací analýzu genových databází a měly by být provedeny experimenty specificity a citlivosti a primery by měly být vybrány pro klinickou detekci.
(2) Zpracování klinických vzorků U klinických vzorků, čím čistější jsou požadavky na šablonu PCR, tím lepší by měla být poloha při odběru vzorků. U asymptomatických pacientů by měl být proveden odpovídající odběr vzorků, aby se zajistil sběr patogenních bakterií. Navíc vzhledem ke složitosti klinických vzorků někdy není PCR amplifikace vzorků ideální, což může být způsobeno nadměrnými nečistotami, které vyžadují další čištění. Zlepší se například extrakce fenol-chloroformem. Tento způsob čištění je těžkopádný a v současnosti je k dispozici komerčně dostupná souprava pro čištění DNA pro relativně snadnou extrakci vysoce čisté DNA z klinických vzorků.
(3) Metoda detekce produktů PCR V poslední době klinická detekce PCR Neisseria gonorrhoeae téměř používá elektroforézu k identifikaci produktů PCR. Tato metoda má mnoho problémů, jako jsou falešně pozitivní a falešně negativní výsledky v důsledku subjektivity makroskopického pozorování. Hybridní kolorimetrie se v současné době používá místo elektroforézy ke zlepšení specifičnosti a citlivosti výsledků.
Závěrem lze říci, že metoda PCR a metoda LCP výrazně zlepšily citlivost a specificitu ve srovnání s tradiční metodou kultivace a čas se také výrazně zkrátil. S neustálým zlepšováním technologie genové diagnostiky se v gonokoku detekují metoda PCR a metoda LCP. Stane se rutinní detekční metodou.
(5) Test citlivosti: další test citlivosti po pozitivní kultivaci, test citlivosti metodou papírové difúze nebo minimální inhibiční koncentrace (MIC) metodou zředění na agarové plotně, která vede výběr antibiotik.
(6) Detekce PPNG : P-laktamáza, s použitím kvantitativní metody kyselosti papíru, s použitím filtračního papíru Whatman I PP-NG, může kmen provést změnu barvy z modré na žlutou, pozitivní pro PPNG, negativní pro N-PPNG.
Diagnóza
Diagnóza kapavky
1. Nemoci identifikované muži a ženami s kapavkou
(1) Nespecifická uretritida: Často existují zřejmé příčiny onemocnění, jako je zavedení katétru, uretrální sondy, genitourinárního traktu nebo zánětu sousedních orgánů a skvrna sekrece může detekovat grampozitivní koky.
(2) NGU: klinické příznaky jsou podobné kapavce, ale lehčí, inkubační doba je delší než kapavka, do 1 až 3 týdnů, sekrece je malá a serózní, dysurie je vzácná, nevyskytují se žádné systémové symptomy a vylučování se přijímá k vyšetření. Často lze najít chlamydii nebo mykoplazmu.
(3) měkký dřep: poškození se obvykle nachází ve vnější oblasti genitálu, vyskytuje se v močové trubici, skapulární fossa má hnisavé sekrece, zarudnutí moče a silnou bolest, vředy mohou detekovat Ducrey Haemophilus.
(4) Herpes genitálií: způsobený HSV, poškození je kazetový puchýř, obvykle se nachází ve vnějším genitálu, perianální, příležitostně v děložním čípku, se vyskytuje v močové trubici, může dojít k malému množství sekrecí a mravenčení nebo nepohodlí, často doprovázené místním pocitem pálení. Bolest je zřejmá a lze ji opakovat.
(5) pevná léková erupce: existuje anamnéza léků nebo injekčních léků, většinou způsobených sulfonamidy, barbituráty, salicyláty nebo tetracykliny, které se často vyskytují v erytému, edému, puchýřech na genitální kožní sliznici; Eroze a exsudace atd., Se svěděním nebo bolestí, bez zarudnutí a valgusu v močové trubici.
(6) tuberkulózní uretritida: může mít brnění močových cest a malé množství sekrecí, ale žádná anamnéza sexuálního styku, nemůže najít gonokok, lze nalézt tuberkulózu, doprovázenou dalšími částmi symptomů tuberkulózy.
2. Nemoci identifikované mužskou kapavkou
(1) Předkožková rovnováha: běžná u předkožky je příliš dlouhá nebo fimóza, většinou způsobená stimulací smegma a sekundární pyogenní infekcí, intrakapsulárním vnitřním listem, žaluďem a zarudnutím koronárního sulku, více nečistot a hnisavým vylučováním , žádné příznaky močových cest a zarudnutí a otok močové trubice, hnisu a tak dále.
(2) Zákal moči: Moč je mléčně bílá a po jejím stání se vyskytuje slaně krystalický sediment bez příznaků.
3. Nemoci identifikované ženskou kapavkou
(1) Candida vaginitida: svědění genitálií a vaginálních otvorů, více vaginálních výtoků, jako je vodnatá nebo tvarohovitá, vaginální zarudnutí sliznice, eroze, může mít bílý film připevněný k vaginální stěně, vzít bílý film mikroskopickým vyšetřením viditelné bakterie Hedvábí a výtrusy.
(2) Trichomonas vaginitis: vědomě vaginální svědění v pochvě, vaginální sekrece často růžová pěna, vaginální sliznice více krvácení, děložní čípek může mít jahodovité výčnělky a punctiformní krvácení, vaginální sekret Mohou být detekovány trichomony.
(3) Bakteriální vaginóza: z vaginálních sekretů lze detekovat hlavně žáruvzdornou leucorrhea, šedavě bílou, nenasilující, s „rybím“ zápachem, Gardnerovými bacily a anaerobními bakteriemi.
(4) mladá samice Staphylococcus aureus vulvitis: častější u dívek předškolního nebo školního věku, vyskytují se v létě, vulva, perianální zarudnutí, pustuly nebo hnisavé sekrece, doprovázené bolestí nebo svěděním, sekreční stěr Byly detekovány grampozitivní koky.
4. Nemoci identifikované pomocí GPID
Existují akutní apendicitida, infekční potrat, pánevní endometrióza, mimoděložní těhotenství, zkroucení nebo prasknutí ovariálního cysty.
