Enzym kombineret sorptionsassay

Enzymbundet immunosorbentassay (i det følgende benævnt ELISA) er den mest anvendte teknik i enzymimmunoanalyse. Det bruges til at detektere antigenet (eller antistoffet), der skal testes, og som er coatet i brønden i fastfasepladen. Dvs. Farven udvikles efter underlaget for at bedømme resultatet. Grundlæggende information Specialistklassificering: vækst og udviklingskontrolklassificering: biokemisk undersøgelse Gældende køn: om mænd og kvinder anvender faste: faste Tip: Overhold lægeens instruktioner, når du tjekker. Normal værdi Forholdet mellem serum, der skulle testes, og det kendte negative serum (P / N) var <2,1, og OD-værdien af ​​serum, der skulle testes, var <0,4, hvilket blev vurderet til at være negativt. Klinisk betydning Unormale resultater: forholdet mellem det serum, der skal testes, og det kendte negative serum (P / N) ≥ 2,1, og OD-værdien af ​​det serum, der skal testes, er ≥ 0,4, det betragtes som positivt. Behov for at kontrollere mængden: opdage antigen og antistof. Forholdsregler Kontraindikationer før inspektion: Forbered forskellige emballageløsninger, og indstil koncentrationen. Tabu ved kontrol: 1. Strenge kontrolfaktorer, der påvirker mærkningens effektivitet, såsom temperatur, tid, pH, enzym og antistofmængde. 2. Når du installerer søjlen, skal du gøre søjlen ensartet, cylinderoverfladen er flad, ingen bobler eller revner. Inspektionsproces Almindeligt anvendte ELISA-metoder inkluderer en sandwich-metode med dobbelt antistof og en indirekte metode, førstnævnte til påvisning af makromolekylære antigener og sidstnævnte til måling af specifikke antistoffer. Indirekte ELISA Denne metode bruges hovedsageligt til at detektere antistoffer. Proceduren for indirekte ELISA er som følger. (1) Materialer 1 belægningsvæske, vaskevæske, varmekonserveringsvæske, underlagsvæske og stopvæske. 2DVH coatet antigen, enzymmærket anti-antistof, negativt og positivt DVH-referenceserum. 3 ELISA detektor, sampler, polystyrenmikroplade. (2) Metodetrin 1 plus antigenbelægning → 4 ° C natten over, vaskes tre gange, kaste tør. 2 plus serum, der skal testes → 37 ° C i 2 timer, vaskes tre gange, kastes tørt. 3 Tilsæt det enzymmærkede antistof → 37 ° C i 2 timer, vask tre gange, kast tørt. 4 Tilsæt underlagsopløsning → 37 ° C i 30 minutter, tilsæt stopopløsningen. 5 OD-værdien blev målt med en ELISA-detektor, og P / N-forholdet blev beregnet. 2. Dobbelt antistofsandwich ELISA Denne metode bruges hovedsageligt til at detektere makromolekylære antigener. 1 Tilføj antistofbelægning → 4 ° C natten over, vask tre gange, kast tør. 2 Tilsæt antigenet, der skal testes → 37 ° C i 30 minutter, vask tre gange, kast tørt. 3 Tilsæt det enzymmærkede antistof → 37 ° C i 30 minutter, vask tre gange, kast tørt. 4 Tilsæt substratopløsning → 37 ° C i 15 minutter, tilsæt stopopløsningen. 5 OD-værdien blev målt ved en ELISA-tester. Ikke egnet til mængden Ikke egnet til mængden: nej. Bivirkninger og risici Ingen relaterede komplikationer eller farer.