Neutraliseringstest

Neutraliseringstesten er baseret på bestemmelsen af ​​virusens infektivitet og immunserumets evne til at neutralisere virussen baseret på sammenligningen af ​​virusets resterende infektivitet efter neutralisering af immunserumet. Når et dyr er inficeret med en virus, produceres et specifikt neutraliserende antistof i kroppen og binder specifikt til den tilsvarende virion, hvorved forhindres, at virussen adsorberer i den følsomme celle eller hæmmer dens invasion, således at virussen mister sin evne til at inficere. Grundlæggende information Specialistklassificering: Undersøgelse og klassificering af infektionssygdomme: immunologisk undersøgelse Gældende køn: om mænd og kvinder anvender faste: ikke faste Analyseresultater: Under det normale: Normal værdi: ingen Over normal: Negativ: Mindre end 10 er negative og ingen virus. 10 til 49 er mistænkelige. positiv: Generelt betragtes et neutraliseringsindeks over 50 positivt, og en virus er til stede. Tip: Vær opmærksom på normale spisevaner, og vær opmærksom på personlig hygiejne. Normal værdi Fast serumfortyndingsvirusmetode: For vira er neutraliseringsindekset normalt større end 50, og 10 til 49 er mistænkelige, og mindre end 10 er negativt. Neutraliseringstestens normale værdi: Den menneskelige krop er i en dynamisk ligevægt og sund tilstand. Klinisk betydning Denne test bruges hovedsageligt til at detektere antistoffer fra det serum, der skal testes, eller til at detektere vira fra sygdomsmaterialet og derved diagnosticere virale infektioner; 2 til at kontrollere toksinerne i materialerne med antitoksinserum eller til at identificere typen af ​​toksiner i bakterien; Viral serum eller antitoksintiter; 4 Identifikation og typning af nyligt isolerede vira, neutraliseringstest kan udføres ikke kun i følsomme forsøgsdyr, men også på cellekultur eller kyllingembryoer. Testmetoderne inkluderer hovedsageligt simpel kvalitativ test, fast serumfortyndingsvirusmetode, fast virussfortyndingsserummetode og plackreduktionsmetode. Positive resultater kan være sygdomme: fåresyge, AIDS, denguefeber, japansk encephalitis, Coxsackie-virusudslæt, mund- og klovesyge, rabiesforholdsregler Forbudt før undersøgelse: Vær opmærksom på normale spisevaner og vær opmærksom på personlig hygiejne. Krav til inspektion: Samarbejde aktivt med lægen. Inspektionsproces (1) Enkel kvalitativ neutraliseringstest Denne metode bruges hovedsageligt til at detektere virussen i sygdomsmaterialet og kan også oprindeligt identificeres eller afsluttes. Testdyr (eller kyllingembryoer, cellekultur) og inokuleringsveje vælges først på grundlag af viral følsomhed. Materialet formales og fortyndes til en bestemt koncentration (ca. 100 LD50 ~ 1000 LD50 eller TCID50). Forurenede materialer skal tilsættes antibiotika (200 til 1000 enheder penicillin og streptomycin) eller filtreres med et bakteriefilter, blandes med kendt antiserum (passende fortyndet eller ikke fortyndet) og fortyndes med normalt serum Til sammenligning. Efter blanding blev cellerne inokuleret ved 37 ° C i 1 time og mindst 3 dyr i hver gruppe. Fodring af isolering, observation af sygelighed og dødelighed. Kontroldyrene døde, medens dyrene i neutraliseringsgruppen ikke døde, hvilket bekræftede, at sygdommen indeholdt virussen svarende til antiserumet. Denne metode kan også bruges til identifikation og typning af toksiner (såsom toksiner). (2) Fast serumfortyndingsvirusmetode Ved denne metode blev virussen fortyndet 10 gange i trin, og to rør blev anbragt, den første søjle blev tilsat normalt serum (kontrolgruppe), og den anden søjle blev tilsat serum, der skulle testes (testgruppe). Efter blanding blev cellerne inokuleret ved 37 ° C i 1 time, og hver rørblanding blev inokuleret separat i de valgte forsøgsdyr, og 3 til 5 dyr blev anvendt til hver fortynding. Efter inokulation skal man observere dagligt og registrere antallet af dødsfald. Efter observationen skal man beregne LD50 og neutraliseringsindekset (tabel 7-1, tabel 7-2). Denne metode er anvendelig til påvisning af et stort antal prøver. Denne metode bruges mest til at detektere neutraliserende antistoffer i serum, der skal testes. For vira er neutraliseringsindekset normalt større end 50 og er positivt, 10 til 49 er mistænkelige og mindre end 10 er negativ. (3) Serummetode med fast virussfortynding Denne metode anvendes til at bestemme neutraliseringsprisen for antiviralt serum. Serumet, der skal testes, fortyndes 2 gange, og virusopløsningen med den samme toksiske værdi tilsættes (blandet med serum, hver dosis indeholder virus 100LD50), ryst godt. Testdyrene blev inokuleret ved 37 ° C i 1 time. Bemærk: [1] Inokulationsdosis 0,1 ml indeholdende virus 100LD50. [2] henviser til fortynding efter blanding med virussen. [3] Nævneren er antallet af inokulationer, og tælleren er antallet af beskyttelser. [4] PD50 er halvbeskyttelse, og dens beregningsmetode er den samme som LD50-beregning. (4) metode til reduktion af plak Virusneutralisationstesten blev udført på cellekultur, og i de senere år blev plackreduktionsmetoden ofte anvendt. Først fortyndes virussen til en passende koncentration, således at 80 til 100 PFU (pladeformende enhed) pr. 0,2 ml blandes med de forskellige fortyndinger af serumet, der skal testes, og anbringes ved 37 ° C i henholdsvis 1 til 2 timer for at måle PFU. En 50% serumfortynding af plaketten er neutraliseringsprisen for serumet. Se tabel 7-4. Tabel 7-4 Eksempel på neutralisationstest til metode til reduktion af plak Bemærk: [1] Serum blev fortyndet i 4 gange trin. [2] Pladen reduceres med 50% af serumfortynding, og beregningsmetoden er den samme som beregningen af ​​LD50. Ikke egnet til mængden Mennesker med nedsat hæmatopoietisk funktion såsom leukæmi, forskellige anæmi, myelodysplastisk syndrom eller personer med trombocytopeni bør være opmærksomme på blodtrækning og bør ikke tage mere eller mere blod. Bivirkninger og risici 1. Når blodet er trukket, skal du ikke trykke på nålehullet for at undgå subkutant hæmatom. Hvis der er et lille stykke blå mærker i blodet, er det lidt ømt, skal du ikke få panik, du kan lave varm komprimering efter 24 timer for at fremme optagelsen af ​​blod. Den generelle lille mængde overbelastning vil gradvist absorbere om 3 til 5 dage, og farven bliver lysere og vende tilbage til normal. 2. Efter blodudtagningen skal symptomer som svimmelhed, svimmelhed, træthed osv. Straks lægges i ryggen, drik en lille mængde sirup og derefter gennemgå en fysisk undersøgelse, efter at symptomerne er lettet.