Assay mit gemischter Lymphozytenkultur

Die gemischte Lymphozytenkultur (Mixed Lymphocyte Culture, MLC) ist eine Testmethode zur Bestimmung des Verträglichkeitsgrades zwischen einem Rezeptor und dem Haupthistokompatibilitätsantigen (HLA-Antigen) eines Spenders. Sie wird üblicherweise zur Gewebeanpassung vor der Organtransplantation verwendet. Mischlymphozytenkultur ist eine Zwei-Wege-Mischkultur von Spender- und Empfängerlymphozyten oder die Inaktivierung von Spenderlymphozyten zu einer Mischkultur, und das Ausmaß der Zellreaktion korreliert negativ mit dem Grad der Spender-Empfänger-Kompatibilität. Grundlegende Informationen Fachklassifikation: Wachstums- und Entwicklungskontrolle Klassifikation: immunologische Untersuchung Anwendbares Geschlecht: ob Männer und Frauen Fasten anwenden: nicht Fasten Tipps: Personen mit hoher Ablehnung sollten diese Prüfung nicht durchführen. Normalwert Die Umwandlungsrate der morphologischen Zählmethode beträgt <10%. Das Isotopenzählverfahren vergleicht cpm, um P> 0,05 zu erhalten. Klinische Bedeutung Abnormale Ergebnisse: Bei der Nierentransplantation sollte die Konversionsrate der Lebendspender <10% und die Konversionsrate der Leichenspender> 10% betragen. Low-Reaction-Matching kann nur in der gleichen Versuchsreihe angewendet werden. Eine Lymphozytenumwandlungsrate von 10% ist kompatibel zwischen Geweben verschiedener Körper. Der Lymphozyten-Mischkulturtest dient zum Nachweis des Immunstatus des Patienten. Wenn die Anzahl der T-Lymphozyten verringert wird, wird auch die Umwandlungsrate verringert. Es kann als passende Methode für die Organ- und Knochenmarktransplantation zur Auswahl eines geeigneten Spenders verwendet werden. Wenn die Conversion-Rate hoch ist, wird sie für die Differenz zwischen dem Empfänger und dem Empfänger verwendet. Die Konversionsrate ist niedrig und die Erfolgsrate nach der Transplantation ist hoch. Notwendigkeit, Personen zu erkennen: Menschen mit eingeschränkter Immunität oder vermisst. Vorsichtsmaßnahmen Zum Zeitpunkt der Untersuchung: Dieser Test kann als Methode zum Screening von Spendern auf Organtransplantation verwendet werden. Inspektionsprozess 1. Herstellung von Spenderlymphozyten: Frisches peripheres venöses Blut wurde in ein Zentrifugenröhrchen gegeben, das eine Lymphozytentrennlösung mit einem spezifischen Gewicht von 1,077 im Verhältnis 1: 1 enthielt, und vorsichtig auf die Flüssigkeitsoberfläche aufgetragen. Zweimal waschen, Trypanblau färben, Plattenzählung durchführen, Zelldichte auf 2 × 109 / L einstellen, in 3 Röhrchen aufteilen, separat zentrifugieren und einen Niederschlag hinterlassen. 250 μl Mitomycin in jedes Röhrchen geben (Endkonzentration 50 mg / L) Und 1,75 ml physiologische Kochsalzlösung, Wasserbad bei 37 ° C für 40 Minuten und zweimal mit physiologischer Kochsalzlösung gewaschen. Die Zelldichte mit RPMI1640-Lösung, die 100 ml / l fötales Rinderserum enthält, auf 1 × 10 10 / l einstellen. Den Antikörper zum Blockieren des Antigens zugeben. Als D markieren. 2. Herstellung von Rezeptorlymphozyten: Frisches peripheres venöses Blut wurde in ein Zentrifugenröhrchen gegeben, das eine Lymphozytentrennlösung mit einem spezifischen Gewicht von 1,077 in einem Verhältnis von 1: 1 enthielt, und vorsichtig auf die Flüssigkeitsoberfläche aufgetragen. Zweimal waschen. Die Zelldichte mit RPMI1640-Medium, das 120 ml / l fötales Rinderserum enthält, auf 1 × 10 10 / l einstellen. 3. Gemischte Lymphozytenkultur: Die hergestellten R und D wurden wie folgt zu der 96-Well-Platte gegeben und in einem 50 ml / l-CO 2 -Inkubator für 24 Stunden bei 37 ° C kultiviert. Gruppe A: R50 & mgr; l + D 50 & mgr; l; Gruppe C: R50 & mgr; l + IL 2 gereinigter und neutralisierter mAb 15 & mgr; l Gruppe D: R50 & mgr; l Jede Gruppe hatte 3 doppelte Vertiefungen und die Blindkontrollgruppe bestand aus 100 & mgr; l RPMI1640-Medium. Nicht für die Menge geeignet Nicht für Menschen geeignet: Menschen mit hoher Ablehnung. Nebenwirkungen und Risiken Es gibt keine damit verbundenen Komplikationen und Gefahren.