Komplementfixierungsassay

Die Bestimmung des Komplements umfasst die Bestimmung des Gesamtkomplements, der hämolytischen Aktivität, der einzelnen Komplementkomponenten und der Komplementfragmentgröße sowie die Komplementteilnahme am Assay. Der Antigen-Antikörper-Komplex wird mit dem Komplement kombiniert, und das Phänomen, dass die Konzentration in der Komplementreaktionslösung, die die bekannte Konzentration enthält, verbraucht wird, um die Konzentration zum Nachweis des Antigens oder des Antikörpers zu verringern, ist eines der Verfahren zum Nachweis der hohen Empfindlichkeit, insbesondere gemäß dem Verfahren. Dieses Verfahren kann auch angewendet werden, wenn die Antigen-Antikörper-Reaktion nicht durch eine Fällungsreaktion oder eine Agglutinationsreaktion beobachtet werden kann. Grundlegende Informationen Fachklassifizierung: Inspektion und Klassifizierung von Infektionskrankheiten: Inspektion pathogener Mikroorganismen Anwendbares Geschlecht: ob Männer und Frauen Fasten anwenden: Fasten Analyseergebnisse: Unter dem normalen Wert: Normalwert: Nein Überdurchschnittlich: Negativ: Normalwert, negativ, dh 0 bis 1:10. Prompt nicht mit einem infektiösen Virus infiziert. Positiv: Eine positive Indikation ist mit einem infektiösen Virus infiziert. Tipps: Die Arbeitsschritte sind kompliziert und die Anforderungen sehr streng.Wenn Sie leicht fahrlässig sind, erhalten Sie falsche Ergebnisse. Normalwert Normalwert: 0 bis 1:10. Klinische Bedeutung Abnormale Ergebnisse:> 1:10 war positiv und die Übereinstimmungsrate für die Diagnose der Brucellose betrug 97,96%. Complement Binding Assays können auf folgende Arten angewendet werden: 1 Infektionsdiagnose. Nachweis von pathogenen Antigenen und entsprechenden Antikörpern. 2 Nachweis anderer Antigene. Zum Beispiel tumorassoziierte Antigene, Proteinidentifikation im Blut, HLA-Typisierung und dergleichen. 3 Autoantikörpererkennung. Vorsichtsmaßnahmen Die Bedienung sollte sorgfältig und genau sein, die Glasausrüstung muss sehr sauber sein, die bekannten Bestandteile, die an der Prüfung beteiligt sind, müssen im Voraus titriert und auf die angegebene Konzentration verwendet werden, um zuverlässige Ergebnisse zu gewährleisten. Inspektionsprozess (1) Titration von Blut: 1 Nehmen Sie 1 ml Komplement, geben Sie 9 ml BBS hinzu und verdünnen Sie es auf 1:20, 1:30, 1:40, 1:50, 1:60, 1:80, 1: 100, 1: 200, 1: 400 und nehmen Sie 50 0,2 ml Hämolysin, 9,8 ml BBS (1: 100 Hämolysin) zugeben und weiter auf 1: 800, 1: 1600, 1: 3200, 1: 6400 verdünnen. 2 Nehmen Sie die quadratische Anordnung von Reagenzgläsern, geben Sie in Längsrichtung 0,1 ml Komplement in verschiedenen Konzentrationen hinzu und geben Sie 0,1 ml Hämolysin in jede Reihe (alle sollten aus der höchsten Verdünnung zugegeben werden), dann geben Sie BBS0,2 ml, Komplement und hinzu In die Hämolysin-Kontrollröhrchen wurden jeweils 0,3 ml BBS gegeben, und schließlich wurden 2% rote Schafblutkörperchen in jedes Röhrchen gegeben. Die Gesamtmenge jedes Röhrchens betrug 0,5 ml, wurde geschüttelt, 30 min in einen Wassertank mit 37ºC gegeben und die Ergebnisse wurden beobachtet. Die höchste Verdünnung von vollständig hämolysiertem Komplement und Hämolysin ist die jeweilige Einheit. In der Praxis wird Hämolysin in 2U (3200 ÷ 2 = 1600) und Komplement in 2,5U (80 ÷ 2,5 = 32) verwendet. (2) Formale Prüfung: 1 Arbeiten Sie mit einer V-Typ-Mikrotiterplatte und machen Sie für jede Probe eine Testvertiefung. Eine Serumkontrolle gut. Zu jeder Vertiefung wurde BBS0.025ml gegeben. 2 Tauchen Sie das Serum (0,025 ml) mit einem Verdünnungsstift in die erste Vertiefung ein, drehen Sie es und übertragen Sie es für insgesamt acht Vertiefungen in die zweite Vertiefung, um eine Verdünnung von 1: 2 bis 1: 256 zu erhalten. Ein Beispiel für einen Komplementbindungstest zur Messung von Antikörpern in kleinen Mengen wird beschrieben. Fügen Sie nach und nach verschiedene Reagenzien hinzu, beobachten Sie die verschiedenen Kontrollröhrchen nach der Inkubation und sollten mit den erwarteten Ergebnissen übereinstimmen. Negative und positive Kontrollröhrchen sollten klar hämolysiert und nicht hämolysiert sein, Antikörper- oder Antigenkontrollröhrchen, zu testende Serumkontrollröhrchen und Kontrollröhrchen mit positiven und negativen Kontrollen sollten vollständig hämolysiert sein. In Kontrollröhrchen für rote Blutkörperchen von Schafen sollte keine spontane Hämolyse auftreten. Das Komplement-Kontrollröhrchen sollte 2U für die vollständige Auflösung, 1U für die vollständige Auflösung mit etwas roten Blutkörperchen und 0,5U sollte unlöslich sein. Beispielsweise zeigt die vollständige Auflösung der 0,5U-Komplementkontrolle an, dass die Komplementmenge übermäßig hoch ist, und wenn das 2U-Kontrollröhrchen keine Hämolyse aufweist, was darauf hinweist, dass die Komplementmenge unzureichend ist, werden die Ergebnisse beeinträchtigt, und der Test sollte wiederholt werden. Die Ergebnisse des Komplementfixierungstests zeigten, dass das Testserum nicht hämolysiert und die Hämolyse negativ war. Nicht für die Menge geeignet Wer keine Indikation zur Untersuchung hat, sollte diese Prüfung nicht durchführen. Nebenwirkungen und Risiken Im Allgemeinen keine Komplikationen und Schäden.