telomerasa

La telomerasa es una transcriptasa inversa especial que consiste en ARN y proteínas involucradas en la síntesis de telómeros (una secuencia y estructura de nucleótidos específica) en los extremos del ADN de las células eucariotas. La longitud del telómero de las células somáticas normales se acorta gradualmente a medida que la célula se divide, y la actividad de la telomerasa aumenta, y la longitud del telómero puede mantenerse sin acortarse, de modo que las células puedan proliferar y volverse cancerosas. Por lo tanto, la detección de telomerasa y sus inhibidores se pueden usar para el diagnóstico y tratamiento de tumores. Información básica Clasificación del especialista: clasificación del examen oncológico: examen inmune Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican en ayunas: no en ayunas Resultados de análisis: Debajo de lo normal: Valor normal: No Por encima de lo normal: Negativo: Normalmente negativo Positivo: El cáncer de pulmón de células pequeñas ha aumentado la actividad de la telomerasa en la etapa inicial, y el cáncer de pulmón de células no pequeñas tiene más cambios de actividad que en la etapa intermedia. Consejos: mantenga una mentalidad normal. Valor normal Negativo Importancia clínica Es adecuado para el diagnóstico y diagnóstico diferencial de diversas enfermedades tumorales. Elevación: cáncer de hígado (93.88 OD / 30 μg de proteína), cáncer que rodea el tejido (24.09 OD / 30 μg de proteína). El cáncer de pulmón de células pequeñas ha aumentado la actividad de la telomerasa en la etapa inicial, y el cáncer de pulmón de células no pequeñas tiene más cambios de actividad que en la etapa intermedia. Los resultados positivos pueden ser enfermedades: precauciones para el cáncer de páncreas y el cáncer de tiroides 1. Preste atención para evitar la contaminación del laboratorio y los falsos positivos o falsos negativos. 2. Preste atención para eliminar el inhibidor de polimerasa contenido en la muestra de tejido para reducir los falsos negativos. 3. La tecnología de análisis de centelleo, el método ELISA, el método de hibridación in situ son más confiables que el método TRAP. Proceso de inspección Inmediatamente después de recolectar las muestras de sangre, se envían para su examen e inmunoensayo tumoral. Operación de detección: El ADN genómico fue de 0.1 μg, el tampón contenía 50 mmol / L de cloruro de potasio, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8.4), 1.5 mmol / L de cloruro de magnesio, 100 μg de gelatina, cada cebador fue de 0.25 μmol / L; dATP, dCTP, dGTP El dTIP fue de 200 μmol / L cada uno, la ADN polimerasa fue de 2.5 U y el volumen final fue de 100 μl. Agregue unas gotas de parafina líquida para evitar la evaporación. Ciclo de reacción: 1 desnaturalización: 90 ° C durante 30-60 s, temperatura de recocido de 2 cebadores y plantilla: 40-60 ° C 30-60 s, 3 extensión: 72 ° C 1-2 min. Después de ciclos repetidos de 30 a 40 veces, la última extensión del cebador de 7 ° 72 ° C se terminó durante 7 minutos. Después de la eliminación de la parafina líquida, el producto está disponible para su análisis. Después de la electroforesis en gel de agarosa, se tiñó con bromuro de etidio, y se observó una tira fluorescente de la longitud de amplificación esperada por irradiación con una lámpara UV. El producto también puede hibridarse con una transferencia Southern o una transferencia puntual con una sonda oligonucleotídica radiomarcada o no radiomarcada. Es más conveniente usar el instrumento automático de PCR. Después de agregar el reactivo de reacción, la plantilla de ADN y la polimerasa Taq-ADN al tubo de ensayo, se coloca en el procedimiento ajustado, es decir, la temperatura, el tiempo y la extensión requeridos de la temperatura y el tiempo respectivos y el número de ciclos. La reacción se lleva a cabo en un instrumento automático para obtener un producto de amplificación satisfactorio. No apto para la multitud. Aquellos que no tienen una indicación para el examen no deben ser evaluados. Reacciones adversas y riesgos 1. Infección: Preste atención a la operación aséptica al recolectar sangre, evite la contaminación del agua y otras partes en el sitio de recolección de sangre para evitar la infección local. 2, sangrado: después de que la sangre recibe un tiempo de compresión completo, especialmente coagulopatía, tendencia a sangrado, para evitar exudación subcutánea local, hematomas e hinchazón.