Pruebas inmunológicas para la infertilidad

Los exámenes inmunológicos de infertilidad incluyen infertilidad autoinmune anti-esperma masculina, infertilidad alogénica femenina anti-esperma e infertilidad femenina anti-Zona pelúcida. Dieta de control: 1, la mayoría de los elementos de prueba requieren una muestra de sangre con el estómago vacío por la mañana, deben tomar café en ayunas, té fuerte, bebidas con alto contenido de azúcar y cola; 2, la función hepática, los lípidos en sangre, la coagulación de la sangre y otros elementos requieren ayuno durante 12-16 horas, y La cena con un día de anticipación debe evitar beber alcohol, prohibir la dieta alta en grasas y proteínas; 3, la dieta tiene un impacto significativo en la prueba de lípidos en la sangre, al menos dentro de los 3 días anteriores a la extracción de sangre para prestar atención a mantener una dieta normal. Información básica Clasificación de especialistas: clasificación de examen de eugenesia y superioridad: examen de fluidos corporales Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican el ayuno: ayuno Resultados de análisis: Debajo de lo normal: Valor normal: No Por encima de lo normal: Negativo: El resultado de la prueba negativa debe ser normal. Positivo: Una prueba positiva indica una enfermedad que puede ser infértil. Consejos: Detenga las relaciones sexuales durante 4 a 7 días. El propionato de testosterona, el fenilacetato de testosterona y el fenilpropionato de nantrolona no se pudieron usar 1 semana antes de la prueba. Valor normal Los resultados de varias pruebas inmunológicas fueron normales y negativos. Importancia clínica Resultados anormales Múltiples pruebas inmunológicas indican infertilidad. Los pacientes con infertilidad masculina e infertilidad femenina deben ser examinados. Los resultados positivos pueden ser enfermedades: infertilidad, infertilidad masculina, pseudohermafroditismo femenino, precauciones de malformación genital masculina Personas inapropiadas: aún no conocidas. Tabú antes de la inspección: Primero, al recolectar esperma: 1. Antes de abandonar el semen, el paciente debe interrumpir las relaciones sexuales durante 4 a 7 días. El propionato de testosterona, el fenilacetato de testosterona y el fenilpropionato de nantrolona no se pudieron usar 1 semana antes de la prueba. Debe dejar de beber dentro de 1 mes antes de la prueba. Esto debe hacerse. 2, cuando se toma semen, se puede usar jabón suave o aceite de parafina para masaje en el pene, las muestras se recolectan en tubos de ensayo estériles; se pueden usar condones (lavados, sin drogas de espermicida) o se puede recolectar semen mediante relaciones sexuales, pero de esta manera La cantidad recaudada es a menudo pequeña. 3. Si el semen no se obtiene mediante el método anterior, la vesícula seminal y el extremo del conducto deferente se pueden masajear a través del recto y se puede recoger la orina para verificar si hay espermatozoides en el sedimento. 4. No exponga el semen a ambientes sobrecalentados y fríos. Entréguesela al médico como referencia, no más de 30 minutos. Mantenga el calor en climas fríos y guárdelo en el bolsillo de su ropa interior cuando lo envíe. 5. Si se va a realizar un cultivo bacteriano, la abertura uretral debe enjuagarse y desinfectarse, y el semen debe recogerse en un tubo de ensayo estéril. En segundo lugar, antes de los requisitos de recolección de suero: (1) Dieta de control 1. La mayoría de los artículos de inspección requieren tomar muestras de sangre con el estómago vacío por la mañana. El café, el té, las bebidas con alto contenido de azúcar y cola deben estar en ayunas. 2, la función hepática, los lípidos sanguíneos, la coagulación de la sangre y otros elementos requieren ayuno durante 12-16 horas, y un día antes de la cena debe evitar beber, prohibiendo una dieta alta en grasas y alta en proteínas. 3, la dieta tiene un impacto significativo en las pruebas de lípidos en la sangre, al menos dentro de los 3 días anteriores a la extracción de sangre para prestar atención a mantener una dieta normal. (B) para evitar efectos de drogas Los efectos de las drogas en las pruebas bioquímicas y el cultivo bacteriano son complejos. Por lo tanto, si es posible, el sujeto debe dejar de tomar todos los medicamentos 1-2 días antes de la prueba. Si la medicación es necesaria para el tratamiento, se deben considerar los efectos del medicamento al analizar los resultados de la prueba. (3) Evitar el impacto del ejercicio 1, el ejercicio extenuante puede hacer que cambien muchos componentes sanguíneos, incluso durante más de 24 horas, por lo que después del ejercicio vigoroso no debe tomar sangre de inmediato y caminar rápidamente, al menos 10-15 minutos después del descanso, luego tomar sangre. 2, debe estar en un estado tranquilo para extraer sangre, para evitar la emoción emocional. Requisitos para la inspección: 1. Para asegurarse de que puede comprender con precisión los resultados de su examen físico después del examen médico, complete cuidadosamente el formulario de examen médico y cada hoja de prueba antes del examen médico. La escritura debe ser clara, especialmente el nombre. 2, después de tomar suero, debe permanecer quieto durante 15-20 minutos. Proceso de inspección -, control de infertilidad inmune anti-esperma La inmunidad antiesperma incluye la inmunidad humoral antiesperm (anticuerpos antiespermáticos) y la inmunidad antitérmica. (1) Detección de anticuerpos anti-esperma 1. Prueba posterior a la relación sexual: tome moco cervical dentro de las 6 ~ 24 horas posteriores a la relación sexual y observe el número de espermatozoides contados con un microscopio de alta potencia. En cada campo de alta potencia, hay ≥ 21 factores específicos de esperma extremadamente vivos. Si el título de suero es ≥1: 32, se puede considerar que contiene anticuerpos espermáticos. Otros tienen aglutinación capilar y aglutinación en placa, que son menos utilizados. 2. Prueba de citotoxicidad dependiente del complemento y prueba de frenado espermático: el anticuerpo espermático se une al antígeno espermático, activa el sistema del complemento y causa daños a la permeabilidad e integridad de la membrana celular. Si es un anticuerpo de freno, pierde su actividad y frena. Un valor de ≥ 2 es positivo; si es un anticuerpo citotóxico, se tiñe positivamente con ciertos colorantes, lo que requiere una motilidad espermática> 70%. El micro método solo necesita unos pocos microlitros de muestra. Para las muestras con baja tasa de actividad de los espermatozoides, los espermatozoides vivos se pueden extraer mediante el método aguas arriba, y la tasa de supervivencia puede alcanzar más del 90%. La práctica solo puede detectar anticuerpos que actúan sobre la cola del esperma. Fuerte especificidad, poca sensibilidad y alta tasa de falsos negativos. 3. Método de hemaglutinación pasiva: los glóbulos rojos tratados se sensibilizan con el extracto de esperma y el plasma seminal, y los glóbulos rojos sensibilizados se hacen reaccionar con el suero diluido para analizar en la placa de microreacción, y la aglutinación de los glóbulos rojos es positiva. Este método no se ve afectado por la viabilidad de los espermatozoides, el recuento, los fragmentos microbianos o de tejido en los espermatozoides. Los investigadores creen que este método es específico y sensible, pero hay pocos informes, y su confiabilidad y practicabilidad aún no se han confirmado. 4. Ensayo inmunosorbente ligado a enzimas (ELISA) y ensayo inmunosorbente ligado a la enzima biotina-avidina (BA-ELISA): aplicación de esperma intacto o portador de fase sólida recubierto con antígeno de membrana espermática, anticuerpo espermático en la muestra a analizar y cultivar Luego puede unirse a la superficie del antígeno. Posteriormente, el segundo anticuerpo de la etiqueta enzimática también puede unirse a la superficie, y luego se agrega el sustrato enzimático, y el resultado se juzga de acuerdo con el desarrollo del color del sustrato. Puede observarse a simple vista, también puede medirse con un lector de microplacas, este último objetivo y preciso, generalmente más que un grupo de densidad óptica sérica negativa más 2 veces la desviación estándar es positiva. Dado que el esperma intacto se adsorbe fácilmente de manera no específica, si está recubierto con antígeno de membrana de esperma soluble, el método es sensible, específico, objetivo y cuantitativo, y puede determinar el tipo de anticuerpo y es fácil de operar. BA-ELISA es una nueva generación de ensayo cuantitativo desarrollado sobre la base de ELISA convencional, que tiene más sensibilidad y especificidad que los métodos convencionales. 5. Prueba de inmunobath (1mmunbeadTest, IBT): las microesferas de poliacrilamida recubiertas con anticuerpo de inmunoglobulina humana pueden unirse a la superficie del esperma unida al anticuerpo de esperma, y ​​las inmunobeads pueden verse con esperma bajo microscopio de contraste de fase o microscopio electrónico. Ejecutar, si la proporción de esperma combinada con una o más inmunoperlas es ≥lo% positiva. Este método determina el sitio, el tipo y la proporción de esperma unido, y puede detectar anticuerpos unidos a la superficie del esperma vivo. Su sensibilidad, especificidad y reproducibilidad son buenas, la operación es un poco engorrosa y las muestras requeridas para la prueba son pocas. Puede usarse para la detección de muestras traza tales como moco cervical y líquido de las trompas de Falopio. 6. Método de inmunoglobulina o proteína radiomarcada A: inmunoglobulina antihumana o plántula de uva marcada con isótopo Una proteína se une a los anticuerpos espermáticos unidos a la superficie del esperma, y ​​la radioactividad de la superficie se mide mediante un contador x. Si se usa esperma vivo como antígeno, su especificidad y sensibilidad son altas, y se puede determinar el tipo de anticuerpo. Sin embargo, debido a las diferentes fuentes de esperma vivo en cada experimento, los resultados son menos reproducibles y el equipo es costoso. El operador es susceptible al daño radioactivo, por lo que este método se informa menos. 7. Prueba de inmunofluorescencia indirecta: después de que la superficie se une al antígeno, puede unirse al segundo anticuerpo marcado con fluoresceína, y la proporción de espermatozoides positivos que muestran fluorescencia se observa bajo un microscopio de fluorescencia. Debido a que la prueba requiere la fijación de metanol para causar daño a la membrana, el antígeno interno está expuesto, y el anticuerpo contra el antígeno interno es ubicuo en las personas redundantes, por lo que el falso positivo es demasiado alto y no tiene valor clínico práctico. En los últimos años, el cultivo en fase líquida no se ha reparado durante el experimento, y el valor de uso de este método se ha redefinido. 8. Inspección directa de interacción de huevo fino (1) Prueba de unión o penetración de banda transparente a los espermatozoides: el óvulo humano obtenido de la laparoscopia es mejor que los espermatozoides después de la incubación bajo ciertas condiciones, y si el esperma puede pasar a través de la zona pelúcida al espacio alrededor del óvulo, si el esperma no puede usarse Pase la zona pelúcida y considere la presencia de un anticuerpo de freno. Esta prueba también es interferida por otros factores. (2) prueba de penetración de óvulos de hámster transparente al esperma (SPA): el esperma vivo extraído optimizado se mezcla con los huevos sin hámster y se observa bajo un microscopio de contraste de fase. Si el óvulo contiene una cabeza de esperma hinchada (con cola) Penetración El SPA puede usarse para determinar: 1 la capacidad de fertilización de los espermatozoides con anticuerpos plasmáticos seminales; 2 la importancia de varios anticuerpos para prevenir el embarazo. Esta prueba también puede verse afectada por una variedad de factores. (dos) detección de inmunidad contra células de esperma Existen pocos estudios sobre la inmunidad anti-esperma mediada por células, y cada conclusión es diferente. Los experimentos con animales y las pruebas en humanos han demostrado que la inmunidad celular antisentido puede ser una de las causas de infertilidad. Los ensayos para detectar respuestas inmunes antisentido mediadas por células incluyen el ensayo de transformación de linfocitos, el ensayo de inhibición de la adhesión de leucocitos, el ensayo de inhibición de la migración de leucocitos o macrófagos, la prueba cutánea y el ensayo de actividad procoagulante de leucocitos de sangre periférica. Los antígenos utilizados son diferentes, como esperma recién lavado, esperma congelado-descongelado, esperma semipurificado y similares. En la actualidad, debido a que los antígenos utilizados no son uniformes, los métodos de detección son diferentes, el número de casos de investigación es pequeño, la especificidad de cada método es difícil de evaluar y los resultados son difíciles de comparar. En segundo lugar, la detección de infertilidad inmune anti-transparente. La fuente de la zona pelúcida humana es limitada y difícil de obtener, pero la zona pelúcida humana y la zona pelúcida porcina tienen antigenicidad cruzada, por lo tanto, en la práctica real, la zona pelúcida porcina se usa en lugar de la zona pelúcida humana para detectar el anticuerpo de la zona pelúcida en suero humano. Dado que la presencia de lectina heteróloga (principalmente IgM) en algunos sueros humanos normales interfiere con los resultados experimentales, se requieren glóbulos rojos porcinos frescos para absorber el suero de prueba antes de la prueba. 1. Reacción de precipitación de la banda escocesa: después de que la superficie de la zona pelúcida se une al anticuerpo, el índice de refracción cambia bajo un microscopio óptico o un microscopio de campo oscuro. Este método se usa principalmente para identificar suero, tiene baja sensibilidad y es difícil de usar en la práctica clínica. 2. Radioinmunoensayo: después del antígeno y el suero de la zona pelúcida porcina radiomarcados a analizar, se aísla el complejo antígeno-anticuerpo y se mide su radioactividad. Este método puede ser cuantitativo, específico y sensible, pero debido al daño radiactivo, y los informes no son muchos, este método aún es difícil de afirmar. 3. Ensayo de inmunofluorescencia indirecta: después de que el anticuerpo anti-zona pelúcida humana se une a la superficie del huevo porcino, el anticuerpo de inmunoglobulina anti-humano marcado con fluoresceína se une a la superficie de la zona pelúcida y exhibe peri-fluorescencia obvia bajo un microscopio de fluorescencia. La fiabilidad de esta ley depende de otros métodos objetivos. 4. Método ELISA y BALISA: el portador de fase sólida se recubre con el antígeno porcino de la zona pelúcida, y se añaden el suero, el segundo anticuerpo y el sustrato a analizar, y el lavado se lleva a cabo paso a paso, y finalmente el resultado se juzga de acuerdo con el cambio de color del sustrato. Este método requiere menos tamaño de muestra, no requiere equipo especial, es fácil de operar, puede determinar cuantitativamente los anticuerpos y determinar el tipo de anticuerpo, y tiene buena especificidad y sensibilidad. El BA-ELISA tiene las ventajas de un ELISA convencional, y su sensibilidad mejora considerablemente. 5. Método de hemaglutinación pasiva El antígeno purificado de la zona pelúcida porcina se usa para recubrir los glóbulos rojos de otras especies como el objetivo del antígeno, y en presencia del anticuerpo de la zona pelúcida, los glóbulos rojos sensibilizados se aglutinan. Existen pocos informes sobre este método, y es difícil evaluar su sensibilidad y especificidad. 6. Prueba de unión o penetración de banda transparente a los espermatozoides: este método puede ser positivo si hay un anticuerpo de zona pelúcida o un anticuerpo antiespermático. Debido a que la prueba está muy influenciada por los factores del entorno de cultivo, los resultados de la investigación de diferentes laboratorios son difíciles de comparar. Este método se puede aplicar junto con otros métodos para complementarse entre sí y garantizar la fiabilidad de los resultados. No apto para la multitud. El examen es menos invasivo y generalmente no tiene contraindicaciones. Reacciones adversas y riesgos Esta prueba es menos invasiva y generalmente no causa complicaciones graves u otros riesgos.