Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas

El ensayo inmunosorbente ligado a enzimas es un ensayo inmunosorbente ligado a enzimas. Se utiliza para detectar el antígeno (o anticuerpo) a analizar que está recubierto en el pozo de la placa de fase sólida. Es decir, el anticuerpo se marca con una enzima, y ​​el antígeno o anticuerpo conocido se adsorbe en la superficie del vehículo en fase sólida, y la reacción antígeno-anticuerpo se lleva a cabo en la superficie del vehículo en fase sólida, y el componente libre en la fase líquida se lava mediante lavado, y finalmente la enzima actúa sobre él. El color se desarrolla después del sustrato para juzgar el resultado. La profundidad de la reacción de color es proporcional a la cantidad del anticuerpo o antígeno correspondiente en la muestra. Esta reacción de color puede determinarse cuantitativamente mediante un detector ELISA, que combina la sensibilidad de la reacción química enzimática con la especificidad de la reacción antígeno-anticuerpo, haciendo que el método ELISA sea un método de detección tanto específico como sensible. Información básica Clasificación de especialistas: clasificación de verificación de crecimiento y desarrollo: examen inmunológico Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican en ayunas: no en ayunas Resultados de análisis: Debajo de lo normal: Valor normal: No Por encima de lo normal: Negativo: Normal Positivo: El cuerpo humano está en un equilibrio dinámico y en un estado poco saludable. Consejos: Relájate mientras revisas. Valor normal El tipo y la proporción de la flora en el cuerpo son normales, y el cuerpo humano se encuentra en un estado de equilibrio dinámico y salud. Importancia clínica El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas es la técnica más utilizada en inmunoensayo enzimático. Los métodos ELISA de uso común incluyen un método sandwich de doble anticuerpo y un método indirecto, el primero para detectar antígenos macromoleculares y el segundo para medir anticuerpos específicos. En términos de enfermedades parasitarias, se utiliza para el diagnóstico serológico de Plasmodium, Ameba, Liegemann, Trypanosoma, Schistosomiasis, cisticercosis, Toxoplasma, Esquistosomiasis, Fluke hepático, Gusano de sangre, Triquinosis Esto es importante tanto para médicos como para veterinarios. Se ha usado para detectar anticuerpos contra Streptococcus, Salmonella, Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Haemophilus, Vibrio cholerae, Neisseria gonorrhoeae, Candida, etc., y también se puede usar para la antitoxina tetánica y la antitoxina Vibrio cholerae. Se puede diagnosticar la determinación y detección de anticuerpos contra la infección por rickettsia. Rickettsia también se puede utilizar para identificar especies estrechamente relacionadas. También hay informes para examinar anticuerpos contra Chlamydia psittaci. Virus de la influenza, virus de las paperas, sarampión, rubéola, rotavirus, virus del herpes, citomegalovirus, virus EB, adenovirus, enterovirus, virus de la encefalitis, virus de la fiebre amarilla, rabia Tóxicos y poliovirus, etc., son más sensibles que los métodos de inspección utilizados actualmente. En las enfermedades inmunológicas, existen pruebas para la detección de enfermedades autoinmunes y el diagnóstico de alergias, como anticuerpos contra diversos alérgenos, anticuerpos de ADN y anticuerpos de tiroglobulina, anticuerpos eritematosos y similares. En higiene, puede usarse para detectar enterotoxina estafilocócica y toxina de salmonella en los alimentos. Los resultados positivos pueden ser enfermedades: epidermólisis ampollosa adquirida, tripanosomiasis, esquistosomiasis y enfermedades hepatobiliares, escleritis por toxoplasmosis, síndrome de Gestman, toxoplasmosis congénita neonatal, duela hepática, Fiebre manchada de rickettsia siberiana, piriflagelado intestinal, precauciones para la diarrea turística 1. Sustrato: Varias enzimas tienen especificidad por el sustrato, por lo que el uso de diferentes tipos de enzimas requiere diferentes sustratos. Una vez que se ha determinado el conjugado enzimático (por ejemplo, AP o HRP), el rango de sustratos disponibles para la selección es muy limitado. La forma de seleccionar un sustrato adecuado dentro del alcance de este sustrato limitado debe seleccionarse de acuerdo con las siguientes condiciones: (1) El sustrato debe ser incoloro antes de ser catalizado por la enzima y tener un color obvio después de ser catalizado por la enzima. Cambie, para que los resultados se puedan distinguir claramente; (2) el color es fácil de secar y eluir; (3) el producto después del desarrollo del color debe ser estable, la sustancia coloreada producida en la determinación cuantitativa debe ser soluble; (4) el precio Barato, fácil de conseguir y no tóxico. Por lo tanto, para el conjugado enzimático AP, generalmente se usa el fosfato de nitrofenilo, y el color es naranja después del desarrollo del color, y el color es estable. La reacción se termina con 2 mol / L de NaOH, y el valor de OD se puede medir a una longitud de onda de 403 nm. 2. Detergente y diluyente: Para maximizar la cantidad de anticuerpo específicamente unida, el antígeno recubierto en el pocillo de la microplaca debe ser ligeramente excesivo. Sin embargo, durante la incubación o el lavado, parte del antígeno adsorbido puede eliminarse del soporte sólido. Por lo tanto, es probable que la proteína que no sea el anticuerpo específico agregado al suero de prueba se adsorba al blanco del hoyo recubierto con antígeno original, aumentando el color de fondo y generando una reacción falsa positiva, que es un factor que limita la especificidad del ELISA. Muchos académicos han agregado varios agentes protectores a los diluyentes y detergentes para inhibir la adsorción competitiva de proteínas no específicas. Proceso de inspección El método básico es adsorber un antígeno o anticuerpo conocido en la superficie de un vehículo en fase sólida (placa de microreacción de poliestireno), hacer reaccionar la reacción antígeno-anticuerpo marcada con enzima en la superficie de la fase sólida y lavar los componentes libres en la fase líquida mediante lavado. Excepto De acuerdo con el portador de fase sólida utilizado en ELISA, se divide en tres tipos: uno es ELISA usando microplaca de poliestireno como portador, que es el ELISA (ELISA de microplaca) al que generalmente nos referimos; el otro está usando membrana de nitrocelulosa como portador. El ELISA se llama ELISA puntual (Dot-ELISA); el otro es ELISA usando un paño de poliéster hidrófobo como portador, llamado ELISA de tela (C-ELISA). En el ELISA de microplacas, se divide además en ELISA indirecto, ELISA sandwich de doble anticuerpo, ELISA sandwich doble, ELISA de competición, ELISA de bloqueo y ELISA de captura de anticuerpos según sus propiedades. No apto para la multitud. No hay tabúes especiales. Reacciones adversas y riesgos No hay complicaciones y riesgos relacionados.