Détermination de la concentration en protéines

La détermination de la concentration en protéines est la détermination de la concentration en protéines par des méthodes chimiques ou physiques. Il s'agit d'une méthode importante souvent utilisée pour calculer le taux de récupération des méthodes de purification. La méthode biuret La méthode biuret est la première méthode de détermination de la concentration en protéines par colorimétrie. L'ammonium soufre n'interfère pas avec le développement de la couleur, les liaisons peptidiques Cu2 + et protéiques et le complexe de résidus de tyrosine formant un bleu violet. Le composé a une absorption maximale à une longueur d'onde de 540 nm. La méthode du biuret est couramment utilisée pour la détermination de solutions de protéines dans la gamme de 0,5 g / L à 10 g / L. Informations de base Classification de spécialiste: classification de l'examen cardiovasculaire: examen du sang Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: le jeûne Résultats d'analyse: En dessous de la normale: Commun dans les maladies telles que la malnutrition. Valeur normale: Valeur normale: 60-80g / L Au-dessus de la normale: Commun dans les maladies telles que l'obésité. Négatif: Positif: Conseils: Ne consommez pas d'aliments trop gras et riches en protéines la veille, et évitez de boire trop. Valeur normale La valeur normale du corps humain est généralement de 60 à 80 g / L. Signification clinique Résultat anormal 1. Méthode du biuret: La méthode du biuret est la première méthode de détermination de la concentration en protéines par colorimétrie. L’ammonium soufre n’interfère pas avec le développement de la couleur, les liaisons peptidiques Cu2 + et protéiques et le complexe de résidus de tyrosine formant un pourpre. Le complexe bleu a une absorption maximale à une longueur d’onde de 540 nm. La méthode du biuret est couramment utilisée pour la détermination de solutions de protéines dans la gamme de 0,5 g / L à 10 g / L. 2. Méthode de Lowry: Cu + forme un complexe avec une protéine dans une solution alcaline, puis le complexe réduit le réactif phosphore molybdène phosphore-acide phosphorique (réactif de Folin-phénol) et donne une couleur bleu foncé. Cette méthode est beaucoup plus sensible que la méthode du biuret et convient à la détermination de solutions de protéines dans la gamme de 20 mg / L à 400 mg / L. 3. Méthode d’absorption ultraviolette: la plupart des protéines ont la capacité d’absorption maximale caractéristique à la longueur d’onde de 280 nm, en raison de la présence de tyrosine, de tryptophane et de phénylalanine dans la protéine, ce qui permet de déterminer la teneur de 0,1-0,5 mg / ml. Solution de protéines. Personnes à contrôler Il y a des gens qui sont faibles et faibles, qui ont sommeil, la peau, les muqueuses et l'inattention. Maladies: malnutrition, dystrophie musculaire résultats élevés: obésité, précautions simples contre l'obésité Tabou avant le test: évitez de manger des aliments trop gras et riches en protéines la veille du test, afin d'éviter une consommation excessive d'alcool. La teneur en alcool dans le sang affecte directement les résultats du test. Après 20 heures la veille de l'examen médical, vous devriez jeûner. Conditions préalables à l'examen: Lors de la prise de sang, vous devez vous détendre l'esprit pour éviter la contraction des vaisseaux sanguins causée par la peur et augmenter la difficulté de la collecte de sang. Lors de la mesure, une petite quantité du complexe protéine-colorant est adsorbée sur la paroi de la cuvette et la quantité d'adsorption du complexe est négligeable. Après la mesure, la cuvette bleue peut être lavée à l'éthanol. Processus d'inspection Les sujets ont été collectés de manière veineuse et dosés à temps pour la séparation du sérum. Tracez une courbe standard: Prenez une plaque de microtitration à 96 puits et ajoutez les réactifs. Après avoir ajouté le réactif, absorber avec précision 20 µl de la solution échantillon dans le puits d’enzyme standard, ajouter 200 µl de réactif BCA, agiter doucement, incuber à 37 ° C pendant 30 à 60 min, refroidir à température ambiante, utiliser à blanc comme contrôle et comparer à 590 nm sur le lecteur de microplaques. La couleur, avec la teneur en albumine sérique bovine en abscisse et l’absorbance en ordonnée, trace une courbe standard. En utilisant la courbe standard à blanc comme témoin, la teneur en protéines de l'échantillon a été déterminée à partir de la courbe standard en fonction de l'absorbance de l'échantillon. Ne convient pas à la foule Les personnes ayant une tendance significative à saigner. Effets indésirables et risques 1, hémorragie sous-cutanée: en raison d'un temps de pressage inférieur à 5 minutes ou si la technologie de prélèvement sanguin ne suffit pas, etc. peut provoquer un saignement sous-cutané. 2, inconfort: le site de ponction peut apparaître douleur, gonflement, sensibilité, ecchymose sous-cutanée visible à l'œil nu. 3, étourdissements ou évanouissements: dans le sang, en raison d'une surcharge émotionnelle, d'une peur, d'un réflexe provoqué par l'excitation du nerf vague, d'une diminution de la pression artérielle, etc. causée par un apport sanguin insuffisant au cerveau, provoqués par des évanouissements ou des vertiges. 4. Risque d'infection: Si vous utilisez une aiguille malpropre, vous courez un risque d'infection.