Dosage immuno-enzymatique

Le dosage immuno-enzymatique est un dosage immuno-enzymatique. Il est utilisé pour détecter l’antigène (ou anticorps) à tester revêtu dans le puits de la plaque en phase solide. C'est-à-dire que l'anticorps est marqué avec une enzyme et que l'antigène ou l'anticorps connu est adsorbé à la surface du support en phase solide et que la réaction antigène-anticorps est effectuée à la surface du support en phase solide et que le composant libre dans la phase liquide est lavé et finalement agi par l'enzyme. La couleur est développée après le substrat pour juger du résultat. La profondeur de la réaction colorée est proportionnelle à la quantité d'anticorps ou d'antigène correspondant dans l'échantillon. Cette réaction colorée peut être déterminée quantitativement par un détecteur ELISA, qui associe la sensibilité de la réaction chimique enzymatique à la spécificité de la réaction antigène-anticorps, faisant de la méthode ELISA une méthode de détection à la fois spécifique et sensible. Informations de base Classification de spécialiste: classification de contrôle de croissance et de développement: examen immunologique Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: pas le jeûne Résultats d'analyse: En dessous de la normale: Valeur normale: Non Au-dessus de la normale: Négatif: Normal Positif: Le corps humain est dans un équilibre dynamique et dans un état malsain. Conseils: Détendez-vous tout en vérifiant. Valeur normale Le type et la proportion de la flore dans le corps sont normaux et le corps humain est dans un état d'équilibre et de santé dynamiques. Signification clinique Le dosage immuno-enzymatique est la technique la plus largement utilisée dans le dosage immuno-enzymatique. Les méthodes ELISA couramment utilisées comprennent une méthode sandwich à double anticorps et une méthode indirecte, la première pour détecter les antigènes macromoléculaires et la seconde pour mesurer les anticorps spécifiques. En termes de maladies parasitaires, il est utilisé pour le diagnostic sérologique de Plasmodium, Amoeba, Liegemann, Trypanosoma, Schistosomiase, Cysticercose, Toxoplasma, Schistosomiase, Fluke du foie, Ver de sang, Trichinose Ceci est important pour les médecins et les vétérinaires. Il a été utilisé pour détecter des anticorps contre Streptococcus, Salmonella, Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Haemophilus, Vibrio cholerae, Neisseria gonorrhoeae, Candida, etc. La détermination et la détection d'anticorps contre l'infection à rickettsia rickettsia peuvent être diagnostiquées. Les rickettsies peuvent également être utilisées pour identifier des espèces étroitement apparentées. Il existe également des rapports sur l'examen des anticorps contre Chlamydia psittaci. Virus de la grippe, virus des oreillons, rougeole, rubéole, rotavirus, virus de l'herpès, cytomégalovirus, virus EB, adénovirus, entérovirus, virus de l'encéphalite, virus de la fièvre jaune, rage Les toxiques et les poliovirus, etc., sont plus sensibles que les méthodes d'inspection actuellement utilisées. Dans les maladies immunologiques, il existe des tests pour la détection des maladies auto-immunes et le diagnostic des allergies, tels que des anticorps contre divers allergènes, des anticorps contre l'ADN et des anticorps anti-thyroglobuline, des anticorps anti-érythémateux, etc. En hygiène, il peut être utilisé pour détecter l’entérotoxine staphylococcique et la toxine de salmonelle dans les aliments. Les résultats positifs peuvent être des maladies: épidermolyse bulleuse acquise, trypanosomiase, schistosomiase et maladies hépatobiliaires, sclérite à toxoplasmose, syndrome de Gestman, toxoplasmose congénitale néonatale, douve du foie, Rickettsie de Sibérie Fièvre tachetée, piriflagellé intestinal, précautions contre la diarrhée touristique 1. Substrat: Différentes enzymes ayant une spécificité pour le substrat, l'utilisation de différents types d'enzymes nécessite différents substrats. Une fois que le conjugué enzyme a été déterminé (par exemple, AP ou HRP), la gamme de substrats disponibles pour la sélection est très limitée. La manière de choisir un substrat approprié dans le cadre de ce substrat limité doit être choisie selon les conditions suivantes: (1) Le substrat doit être incolore avant d'être catalysé par l'enzyme et avoir une couleur évidente après avoir été catalysé par l'enzyme. Changement, afin que les résultats puissent être clairement distingués, (2) la couleur est facile à sécher et à éluer, (3) le produit après le développement de la couleur doit être stable, la substance colorée produite lors de la détermination quantitative doit être soluble, (4) le prix Bon marché, facile à obtenir et non toxique. Par conséquent, pour le conjugué enzyme AP, on utilise généralement le phosphate de nitrophényle, dont la couleur est orange après le développement de la couleur et qui est stable. La réaction est terminée avec du NaOH à 2 mol / L et la valeur de DO peut être mesurée à une longueur d'onde de 403 nm. 2. Détergent et diluant: Afin de maximiser la quantité d'anticorps spécifiquement liés, l'antigène déposé dans le puits de la microplaque doit être légèrement en excès. Cependant, pendant l'incubation ou le lavage, une partie de l'antigène adsorbé peut être éliminée par lavage du support solide. Par conséquent, la protéine autre que l'anticorps spécifique ajouté au sérum à tester est susceptible de s'adsorber sur le blanc de la fosse recouverte d'antigène d'origine, ce qui augmente la couleur de fond et génère une fausse réaction positive, ce qui limite la spécificité de l'ELISA. De nombreux chercheurs ont ajouté divers agents protecteurs aux diluants et aux détergents pour inhiber l'adsorption compétitive de protéines non spécifiques. Processus d'inspection La méthode de base consiste à adsorber un antigène ou un anticorps connu à la surface d'un vecteur en phase solide (microplaque de polystyrène), à ​​faire réagir la réaction antigène-anticorps marquée à l'enzyme à la surface de la phase solide et à laver les composants libres en phase liquide par lavage. Sauf Selon le support en phase solide utilisé dans le test ELISA, il est divisé en trois types: le premier est le test ELISA utilisant une microplaque en polystyrène comme support, qui est le test ELISA (ELISA pour microplaque) auquel nous nous référons habituellement, l'autre utilisant une membrane de nitrocellulose comme support. Le test ELISA est appelé test ELISA ponctuel (Dot-ELISA), le second est un test ELISA utilisant un tissu de polyester hydrophobe comme support, appelé ELISA de tissu (C-ELISA). Dans l’ELISA pour microplaques, il est ensuite divisé en ELISA indirect, ELISA sandwich double anticorps, ELISA double sandwich, ELISA compétition, ELISA bloquant et ELISA de capture d’anticorps en fonction de ses propriétés. Ne convient pas à la foule Il n'y a pas de tabous spéciaux. Effets indésirables et risques Il n'y a pas de complications ni de risques associés.