Essai de sorption combiné enzymatique

Le dosage immunosorbant lié à une enzyme (désigné ci-après par ELISA) est la technique la plus largement utilisée dans le dosage immunoenzymatique. Il est utilisé pour détecter l’antigène (ou anticorps) à tester revêtu dans le puits de la plaque en phase solide. C'est-à-dire que l'anticorps est marqué avec une enzyme et que l'antigène ou l'anticorps connu est adsorbé à la surface du support en phase solide et que la réaction antigène-anticorps est effectuée à la surface du support en phase solide et que le composant libre dans la phase liquide est lavé et finalement agi par l'enzyme. La couleur est développée après le substrat pour juger du résultat. Informations de base Classification de spécialiste: classification de contrôle de croissance et de développement: examen biochimique Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: le jeûne Conseils: Respectez les instructions du médecin lors de la vérification. Valeur normale Le rapport du sérum à tester sur le sérum négatif connu (P / N) était <2,1 et la valeur OD du sérum à tester était <0,4, ce qui a été jugé négatif. Signification clinique Résultats anormaux: le rapport entre le sérum à tester et le sérum négatif connu (P / N) ≥ 2,1 et la valeur DO du sérum à tester est ≥ 0,4; il est considéré comme positif. Besoin de contrôler la foule: détecter l'antigène et les anticorps. Précautions Contre-indications avant inspection: Préparez diverses solutions d’emballage et réglez la concentration. Tabou lors de la vérification: 1. Des facteurs de contrôle stricts affectant l'efficacité du marquage, tels que la température, la durée, le pH, l'enzyme et la quantité d'anticorps. 2. Lors de l'installation de la colonne, uniformisez-la, la surface du cylindre est plane, sans bulles ni fissures. Processus d'inspection Les méthodes ELISA couramment utilisées comprennent une méthode sandwich à double anticorps et une méthode indirecte, la première pour détecter les antigènes macromoléculaires et la seconde pour mesurer les anticorps spécifiques. ELISA indirect Cette méthode est principalement utilisée pour détecter des anticorps. La procédure d’ELISA indirect est la suivante. (1) matériaux 1 liquide de revêtement, liquide de lavage, liquide de conservation de la chaleur, liquide de substrat et liquide d'arrêt. Antigène revêtu de 2DVH, anticorps anti-anticorps marqués, sérum de référence DVH positif et négatif. 3 Détecteur ELISA, échantillonneur, microplaque en polystyrène. (2) étapes de la méthode 1 couche d'antigène plus → 4 ° C pendant la nuit, lavée trois fois, sécher à sec. 2 plus sérum à tester → 37 ° C pendant 2 heures, lavé trois fois, séché au jet. 3 Ajoutez l'anticorps marqué à l'enzyme → 37 ° C pendant 2 heures, lavez trois fois, séchez-le. 4 Ajoutez la solution de substrat → 37 ° C pendant 30 minutes, ajoutez la solution d'arrêt. 5 La valeur OD a été mesurée par un détecteur ELISA et le rapport P / N a été calculé. 2. ELISA sandwich double anticorps Cette méthode est principalement utilisée pour détecter les antigènes macromoléculaires. 1 Ajouter une couche d'anticorps → 4 ° C pendant la nuit, laver trois fois, sécher au sec. 2 Ajoutez l'antigène à tester → 37 ° C pendant 30 minutes, lavez trois fois, séchez-le. 3 Ajoutez l'anticorps marqué à l'enzyme → 37 ° C pendant 30 minutes, lavez trois fois, séchez-le. 4 Ajoutez la solution de substrat → 37 ° C pendant 15 minutes, ajoutez la solution d'arrêt. 5 La valeur de la densité optique a été mesurée par un testeur ELISA. Ne convient pas à la foule Ne convient pas à la foule: non. Effets indésirables et risques Aucune complication ou danger associé.