Examen microscopique du liquide céphalo-rachidien

La microscopie du liquide céphalorachidien fournit une base pour évaluer diverses maladies en comptant et en classant les cellules du liquide céphalo-rachidien. Le nombre de cellules du liquide céphalo-rachidien doit être effectué à temps, généralement en moins d'une heure; les vaisseaux sanguins sont perforés, entraînant la formation de liquide céphalo-rachidien sanglant, le nombre total de cellules n'a pas de sens, la numération des globules blancs doit être corrigée avant de commencer, la numération des cellules, si davantage de globules rouges sont trouvés Le rétrécissement ou le gonflement doit être décrit pour aider le clinicien à identifier les saignements rassis ou frais. Informations de base Classification de spécialiste: classification de l'examen cardiovasculaire: microscopie Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: pas le jeûne Conseils: la numération des cellules du liquide céphalorachidien doit être réalisée à temps, généralement en moins d'une heure; les vaisseaux sanguins ont été perforés, entraînant la formation de liquide céphalo-rachidien sanglant, le nombre total de cellules n'a pas de sens, la numération des globules blancs doit être corrigée pour donner un sens. Valeur normale 1. Le liquide céphalo-rachidien humain normal contient une petite quantité de globules blancs et pas de globules rouges. Le nombre de cellules est le suivant: adultes (0 ~ 8) × 106 / L enfants (0 ~ 15) × 106 / L. 2. Les cellules du liquide céphalo-rachidien sont principalement de grosses cellules mononucléées et des lymphocytes, dont le rapport est d'environ 37, et parfois des cellules endothéliales. Signification clinique Résultat anormal 1. Le nombre de cellules du liquide céphalo-rachidien peut être augmenté, et le degré d'augmentation et le type de cellules sont liés à la nature de la lésion. Peut être une lésion du système nerveux central. 2, le nombre de cellules du liquide céphalo-rachidien peut être modérément augmenté, souvent en fonction des lymphocytes, en cas d'infection virale du système nerveux central, de tuberculose ou de méningite fongique. 3, le nombre de cellules du liquide céphalo-rachidien a augmenté de manière significative, principalement des neutrophiles, tels que la méningite purulente lors d'une infection bactérienne. 4, quand la maladie parasitaire cérébrale, plus d'éosinophiles peuvent être vus. 5. Lorsque les ventricules ou l'hémorragie sous-arachnoïdienne, la plupart des globules rouges se retrouvent dans le liquide céphalo-rachidien. 6, peuvent parfois trouver des cellules de lupus dans le liquide céphalo-rachidien, pour le lupus. 7, méningite purulente après un traitement antibiotique efficace, le nombre total de cellules a diminué rapidement; méningite tuberculeuse au stade précoce de cellules nucléées lobulaires neutres, plus de lymphocytes plus tard, liquide céphalo-rachidien dans le liquide céphalo-rachidien de patients atteints de liquide céphalo-rachidien Le nombre réduit, combiné avec clinique, indique que le saignement cessera ou s’est arrêté. Nécessité de vérifier les maladies infectieuses du système nerveux central, les maladies cérébrovasculaires, les maladies parasitaires du cerveau, les tumeurs du système nerveux central. Précautions Tabou avant inspection: aucun. Conditions préalables à l'examen: La numération cellulaire du liquide céphalorachidien doit être réalisée à temps, généralement en moins d'une heure, les dommages causés aux vaisseaux sanguins par une perforation conduisant à un liquide céphalo-rachidien sanguinolent, le nombre total de cellules n'a pas de sens, la numération des globules blancs doit être corrigée avant qu'elle soit significative; Un grand nombre de globules rouges ont un rétrécissement ou un gonflement, ce qui devrait être décrit pour aider les cliniciens à identifier les saignements anciens ou nouveaux. "Phénomène, insoluble dans l'acide acétique, après addition de 0,35 mol / L d'acide acétique, la forme initiale reste sous le microscope, tandis que les globules rouges sont dissous par l'acide acétique, tandis que le noyau et le cytoplasme des lymphocytes sont plus évidents. 2, déposez une goutte d'encre indienne, ajoutez un verre de protection, voyez le nouveau film de sclérote de cryptocoque sous fort grossissement, sans coloration, et les globules rouges ou les lymphocytes ne présentent pas ce phénomène. Une fois la plaque de comptage des cellules épuisée, elle est stérilisée à l'alcool à 75% pendant 60 minutes. N'utilisez pas de phénol pour désinfecter, car cela nuirait à l'ampleur du pool de comptage. Processus d'inspection Il y a cinq inspections principales: Tout d'abord, le nombre total de cellules 1, la méthode de comptage direct convient aux échantillons de liquide céphalo-rachidien relativement clairs ou légèrement mélangés. Prélevez une petite quantité de l'échantillon de liquide céphalo-rachidien mélangé avec un compte-gouttes directement dans la plaque de comptage des cellules, remplissez-le dans la cellule de comptage et laissez-le reposer pendant 2 à 3 minutes.Selon le microscope à faible grossissement, compter les quatre coins des deux bassins et la grande grille centrale. Le nombre de cellules à l'intérieur correspond à 1 µl du nombre total de cellules dans le liquide céphalo-rachidien (nombre total de globules rouges et blancs). Lors de la rédaction d'un rapport, il est converti en nombre total de cellules dans chaque liquide céphalo-rachidien. 2. La méthode de comptage par dilution est applicable au liquide céphalo-rachidien si les cellules du liquide céphalo-rachidien sont excessives, troubles ou sanglantes. Une pipette capillaire en hémoglobine peut aspirer 20 µl du liquide céphalorachidien mélangé. Un petit tube à essai contenant une dilution de globules rouges de 0,38 µl est mélangé et déposé dans une cellule de comptage. Le nombre total de cellules de 4 grands carrés est compté par un microscope à faible puissance Le nombre total de cellules par microlitre de liquide céphalo-rachidien est finalement indiqué comme le nombre total de cellules par litre de liquide céphalo-rachidien. Deuxièmement, le nombre de globules blancs 1. Comptage direct: échantillons non sanguins, qui sont tous soufflés après aspiration de l'acide acétique glacial avec une pipette, de sorte que la même pipette ne retient qu'un peu d'acide acétique glacial à la paroi du tube, puis qu'une petite quantité d'échantillon de liquide céphalo-rachidien mélangé est prélevée. Dans le pool de comptage, comptez selon la méthode ci-dessus. 2, nombre de dilutions: Si trop de globules blancs peuvent être dilués avec une dilution de globules blancs, selon la méthode ci-dessus, notez que les résultats de comptage doivent être multipliés par le facteur de dilution. 3. Correction des échantillons sanguins Les échantillons de liquide céphalo-rachidien mélangés à du sang ont été mélangés et dilués avec une solution d'acide acétique glacial à 1% et ont été comptés conformément à la méthode ci-dessus. Afin d'éliminer les globules blancs causés par un saignement, la formule suivante peut être utilisée pour la correction. Corrections de globules blancs par microlitre de LCR = nombre de globules blancs non corrigés par microlitre de LCR - Troisièmement, la classification des globules blancs 1. Classification directe: Après comptage direct des globules blancs, observation au microscope à haute puissance, classification selon la forme et la morphologie nucléaire, 100 globules blancs et cellules endothéliales ont été comptés et la proportion de cellules mononucléées et de neutrophiles a été calculée. , exprimé en pourcentage. Si le nombre total de globules blancs est inférieur à 100, le nombre spécifique de cellules mononucléées et de neutrophiles est directement écrit. Si le nombre total de globules blancs est inférieur à 30, il n'est pas nécessaire d'effectuer une classification et un comptage directs ou de modifier la classification de la coloration. 2, classification de la coloration: centrifugation de l’échantillon de liquide céphalorachidien, prélèvement du précipité, réalisation d’un film uniforme, mise en incubateur à température ambiante ou à 37 ° C, séchage puis coloration à l’aide de Wright, classification microscopique à l’huile. Exprimé en pourcentage. Quatrièmement, l'examen de la morphologie des agents pathogènes 1. Lorsque la bactérie est cliniquement suspectée de méningite cérébro-spinale épidémique ou de méningite suppurée, un frottis bactériologique doit être effectué. L'opération est la suivante: (1) Échantillon de liquide céphalo-rachidien 2 ~ 3 ml, centrifugé à 3000 tr / min pendant 15 minutes, retirer le surnageant, appliquer le précipité sur une plaque de verre propre, fabriquer deux morceaux ensemble, faire un frottis naturel ou sec dans un incubateur à 37 ° C et ne pas Fixé avec une flamme. (2) Une fois le frottis fixé, l’un est coloré au bleu de méthylène et l’autre au Gram. (3) Le frottis de coloration de Gram est utilisé pour contrôler le pneumocoque, le bacille de la grippe, le staphylocoque, le Pseudomonas aeruginosa, le streptocoque, Escherichia coli, etc. La coloration au bleu de méthylène est utilisée pour contrôler le méningocoque. Si des bactéries sont trouvées, elles sont signalées en fonction de leurs propriétés de coloration et de leur morphologie. (4) En cas de suspicion de méningite tuberculeuse, l'échantillon de liquide céphalo-rachidien peut être laissé au repos pendant 24 heures. Le frottis de film liquide est prélevé et séché dans un incubateur à 37 ° C pour une coloration résistant à l'acide. (5) Faites attention à la pollution lors de la collecte des spécimens. L'observation microscopique doit prêter attention à la morphologie bactérienne à l'intérieur et à l'extérieur de la cellule, qui doit être décrite lors de la déclaration. 2, examen fongique - inspection du nouveau cryptocoque (1) Prélevez l’échantillon de liquide céphalorachidien, centrifugez à 2000 tr / min pendant 10 minutes, étalez le précipité sur le frottis, ajoutez une goutte d’encre fine filtrée, mélangez et couvrez avec un microscope en verre. (2) Observez d'abord avec un microscope à faible puissance.Si on découvre qu'il y a une petite tache circulaire transmettant la lumière sur un fond noir, il y a un matériau rond avec une taille de cellule au centre, c'est-à-dire que la structure est soigneusement observée par un microscope à haute puissance et que le diamètre du nouveau Cryptococcus est de 5-20 µm. , épais film visible, entouré d’une forte réfraction et de spores sphériques germées. (3) Si les caractéristiques ci-dessus sont trouvées, on peut indiquer que le frottis d’encre a trouvé "Cryptococcus". Une culture fongique supplémentaire est requise. Ne convient pas à la foule Foule inappropriée: Aucune.