beta-lattamasi

La β-lattamasi si riferisce a un enzima inattivante in grado di catalizzare l'idrolisi di un legame ammidico in un anello β-lattamico in una biomolecola. La produzione batterica di β-lattamasi è il principale meccanismo di resistenza batterica agli antibiotici β-lattamici. Gli antibiotici Β-lattamasi, tra cui penicilline, cefalosporine, β-lattamici atipici, ecc., Sono i farmaci più utilizzati, più studiati e più utilizzati. Informazioni di base Classificazione specialistica: ispezione e classificazione delle malattie infettive: esame biochimico Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: non il digiuno Suggerimenti: in base allo stato nutrizionale di tutto il corpo, durante il pasto vengono forniti latte, uova, frutta, latte di soia, ecc. Valore normale Il tipo e la proporzione della flora nel corpo sono normali e il corpo umano è in equilibrio dinamico. Significato clinico Il meccanismo di resistenza batterica: 1. Enzimi inattivati ​​- principalmente beta-lattamasi (oltre 200 tipi), che rendono inefficaci gli antibiotici. 2, cambiamenti nell'obiettivo - l'obiettivo cambia con gli antibiotici, in modo che il ruolo degli antibiotici diminuisca. 3, il cambiamento della permeabilità della membrana batterica - in modo che gli antibiotici non possano o raramente entrare nei batteri per raggiungere l'obiettivo. Lo sviluppo di resistenza batterica da ceppi ospedalieri (come Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus) a ceppi extra-ospedalieri (come Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae), resistenza alla resistenza a un singolo farmaco Il farmaco sviluppa resistenza multi-farmaco, come la resistenza di Staphylococcus aureus alla penicillina; il ceppo ESBL è resistente a una varietà di antibiotici comunemente usati. Risultati anormali Enterobatteriacee, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae e altre infezioni, ma l'uso di antibiotici non è efficace o l'effetto non è evidente, i batteri producono resistenza ai farmaci. Le persone che hanno bisogno di un esame hanno pazienti con le condizioni di cui sopra. precauzioni Folla inappropriata: no Vietato prima dell'esame: presta attenzione alle normali abitudini alimentari e presta attenzione all'igiene personale. Requisiti per l'ispezione: collaborare attivamente con il medico. Processo di ispezione Rilevazione della β-lattamasi In campioni clinici, Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae e alcuni ceppi di Enterococcus sono stati recentemente trovati resistenti alla penicillina e all'ampicillina. Poiché il ceppo sopra produce β-lattamasi, l'antibiotico sopra menzionato viene idrolizzato. I seguenti metodi vengono utilizzati per rilevare l'enzima: 1. Metodo di scomparsa dell'attività microbica Questo metodo è un ceppo indicatore del Bacillus subtilis che è altamente sensibile alla penicillina.Se il ceppo da testare produce β-lattamasi e distrugge la penicillina, c'è crescita del Bacillus subtilis su entrambi i lati della linea, altrimenti l'indicatore è ancora molto grande. Anello antibatterico. 2, determinazione amido-iodio La beta-lattamasi distrugge l'anello beta-lattamico e lo iodio si combina con l'anello beta-lattamici aperto per convertire il complesso blu di amido-iodio in incolore. METODI: Una sospensione di penicillina 6000 μg / ml è stata preparata con una soluzione tampone fosfato a pH 6,0. 0,1 ml della soluzione sono stati posti in un pozzetto di una piastra di microdiluizione. Sono state selezionate e sospese in essa diverse colonie del ceppo di test, agitate per 30 minuti e lasciate riposare a temperatura ambiente per 1 ora. Aggiungi 2 gocce di soluzione di amido, aggiungi 1 goccia di soluzione di iodio, mescola e osserva immediatamente il cambiamento di colore. Quando la persona positiva aggiunge una soluzione di iodio, apparirà immediatamente blu, come la scomparsa di blu entro 10 minuti, suggerendo che i batteri producono β-interno lattamasi. 3. Misura acida La penicillina viene idrolizzata dalla β-endasi in acido penicillina, il valore del pH scende al di sotto di 6,8, con indicatore rosso fenolo, dal colore rosso (viola) (soluzione madre: tampone citrato pH 8,5) → giallo (pH 6,8 Quanto segue). 4, reazione colore cefalosporina tiofene L'anello β-lattamico della nitrocefina viene aperto dalla β-lattamasi e la matrice cambia da giallo a rosso. Metodo liquido: 10 mg di nitrofenofene di cefa sono stati sciolti in 1 ml di dimetil solfossido, quindi diluiti 1:20 con 0,1 mol / L PBS (pH 7,0), e infine la concentrazione era di 500 μg / m1 e la soluzione era gialla o arancione chiaro. Conservare da 4 a 10 ° C per diverse settimane. Prendi 0,05 ml di soluzione nel pozzetto della micropiastra di diluizione o nella piccola provetta, scegli la colonia del test, fai una sospensione spessa, mescola con il liquido della matrice nel foro concavo e cambia il nitrotiofene di cefalosporina dal giallo alla temperatura ambiente a temperatura ambiente per 10-30 minuti. Il rosso è positivo Se il colore non è evidente, l'osservazione può essere estesa per 6 ore. È stato riportato che i risultati del metodo cartaceo per la rilevazione della β-lattamasi da parte di Haemophilus influenzae e Neisseria gonorrhoeae sono accurati, ma per alcuni ceppi, una piccola quantità di β-lattamasi, che è strettamente legata alle cellule batteriche, come il saprofita Staphylococcus, ecc., Meglio con metodo liquido. Il controllo di qualità viene applicato a uno dei metodi di rilevazione sopra indicati. Non adatto alla folla Generalmente nessun tabù. Reazioni e rischi avversi Generalmente nessuna complicazione e danno.