Telomerasi

La telomerasi è una speciale trascrittasi inversa costituita da RNA e proteine ​​coinvolte nella sintesi di telomeri (una specifica sequenza e struttura di nucleotidi) alle estremità del DNA delle cellule eucariotiche. La lunghezza dei telomeri delle normali cellule somatiche viene gradualmente accorciata man mano che la cellula si divide e l'attività della telomerasi viene potenziata e la lunghezza del telomero può essere mantenuta senza accorciamento, in modo che le cellule possano proliferare e diventare cancerose. Pertanto, il rilevamento della telomerasi e i suoi inibitori possono essere utilizzati per la diagnosi e il trattamento del tumore. Informazioni di base Classificazione specialistica: Classificazione dell'esame oncologico: esame immunitario Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: non il digiuno Risultati dell'analisi: Al di sotto del normale: Valore normale: no Sopra normale: negativo: Normalmente negativo. positivo: Il carcinoma polmonare a piccole cellule ha aumentato l'attività della telomerasi nella fase iniziale e il carcinoma polmonare non a piccole cellule ha più cambiamenti di attività rispetto allo stadio intermedio. Suggerimenti: mantenere una mentalità normale. Valore normale Negativo. Significato clinico È adatto per la diagnosi e la diagnosi differenziale di varie malattie tumorali. Elevazione: carcinoma epatico (93,88 OD / 30 μg di proteina), carcinoma del tessuto circostante (24,09 OD / 30 μg di proteina). Il carcinoma polmonare a piccole cellule ha aumentato l'attività della telomerasi nella fase iniziale e il carcinoma polmonare non a piccole cellule ha più cambiamenti di attività rispetto allo stadio intermedio. I risultati positivi possono essere malattie: precauzioni per il cancro del pancreas e della tiroide 1. Prestare attenzione a prevenire contaminazioni di laboratorio e falsi positivi o falsi negativi. 2. Prestare attenzione a rimuovere l'inibitore della polimerasi contenuto nel campione di tessuto per ridurre i falsi negativi. 3. La tecnologia di analisi della scintillazione, il metodo ELISA, il metodo di ibridazione in situ sono più affidabili del metodo TRAP. Processo di ispezione Immediatamente dopo che i campioni di sangue sono stati raccolti, vengono inviati all'esame e all'analisi immunologica del tumore. Operazione di rilevamento: Il DNA genomico era 0,1 μg, tampone contenente 50 mmol / L cloruro di potassio, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8,4), 1,5 mmol / L cloruro di magnesio, 100 μg di gelatina, ogni primer era 0,25 μmol / L; dATP, dCTP, dGTP Il dTIP era di 200 μmol / L ciascuno, la DNA polimerasi era di 2,5 U e il volume finale era di 100 μl. Aggiungi alcune gocce di paraffina liquida per evitare l'evaporazione. Ciclo di reazione: 1 Denaturazione: 90 ° C per 30-60 s, temperatura di ricottura di 2 primer e modello: 40-60 ° C 30-60 s, 3 prolunghe: 72 ° C 1-2 min. Dopo ripetuti cicli da 30 a 40 volte, l'ultima estensione del primer 7 ° 72 ° C è stata terminata per 7 minuti. Dopo la rimozione della paraffina liquida, il prodotto è disponibile per l'analisi. Dopo elettroforesi su gel di agarosio, è stato colorato con bromuro di etidio e si è osservata una striscia fluorescente della lunghezza di amplificazione prevista mediante irradiazione con una lampada UV. Il prodotto può anche essere ibridato con una macchia Southern o una macchia spot con una sonda oligonucleotidica radiomarcata o non radiomarcata. È più conveniente utilizzare lo strumento automatico PCR. Dopo aver aggiunto il reagente di reazione, il modello di DNA e la Taq-DNA polimerasi alla provetta, viene inserito nella procedura regolata, ovvero la temperatura, il tempo richiesti e l'estensione della rispettiva temperatura e tempo e il numero di cicli. La reazione viene condotta in uno strumento automatico per ottenere un prodotto di amplificazione soddisfacente. Non adatto alla folla Coloro che non hanno un'indicazione per l'esame non dovrebbero essere testati. Reazioni e rischi avversi 1. Infezione: prestare attenzione all'operazione asettica durante la raccolta del sangue, evitare la contaminazione di acqua e altre parti nel sito di raccolta del sangue per evitare l'infezione locale. 2, sanguinamento: dopo che al sangue è stato concesso un tempo di compressione completo, in particolare coagulopatia, tendenza al sanguinamento, per evitare trasudazioni, ecchimosi e gonfiore sottocutaneo locale.