fibrinopeptide A

Il fibrinopepide-A (FPA) è una scissione della catena peptidica tra spermatozoi 16 e glicina-17 della catena fibrinogena α (A) sotto l'azione della trombina ed è composta da 1 a 16 aminoacidi. Peptide di fibrina A. È un indicatore affidabile dell'attività della coagulazione nel corpo e della formazione finale di trombo nella fibrina. L'aumento dei livelli plasmatici di FPA riflette l'attivazione del sistema di coagulazione e la generazione di trombina. Pertanto, si trova nello stato ipercoagulabile e nella malattia trombotica, nell'identificazione della fibrinolisi primaria e secondaria e negli indicatori di monitoraggio durante la terapia anticoagulante. Informazioni di base Classificazione specialistica: classificazione dell'esame di crescita e sviluppo: esame del sangue Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: il digiuno Suggerimenti: la raccolta del sangue non deve essere> 45 secondi e i primi 2 ml devono essere eliminati La siringa deve essere silicizzata o in plastica. Valore normale 1,2 ± 0,8 μg / L. Significato clinico L'aumento dei livelli plasmatici di FPA riflette l'attivazione del sistema di coagulazione e la generazione di trombina. Pertanto, si trova nello stato ipercoagulabile e nella malattia trombotica, nell'identificazione della fibrinolisi primaria e secondaria e negli indicatori di monitoraggio durante la terapia anticoagulante. Alti risultati possono essere malattie: coagulazione intravascolare disseminata nei bambini, gravidanza con malattia trombotica, coagulazione intravascolare disseminata negli anziani (1) La raccolta del sangue deve essere regolare e non deve essere> 45 secondi, pertanto i primi 2 ml devono essere eliminati La siringa deve essere silicizzata o in plastica. (2) Immediatamente dopo la raccolta del sangue, iniettare nella provetta contenente anticoagulante e miscelarlo rapidamente in acqua ghiacciata.Se deve essere conservato, è più adatto a -20 ° C dopo il trattamento di adsorbimento con bentonite. Processo di ispezione (1) Raccolta di campioni di plasma: 4,5 ml di sangue venoso sono stati prelevati senza problemi con una siringa di plastica (i primi 2 ml sono stati scartati) e sono state aggiunte una provetta contenente 0,5 ml di un anticoagulante (eparina sodica 500u e aprotinina 5000u) e immediatamente miscelate. Centrifugare a 3000 r / min per 20 minuti, separare il plasma e aspirare il plasma superiore in un'altra provetta per il trattamento o la conservazione immediata a -20 ° C. (2) Trattamento di adsorbimento con bentonite di campioni di plasma: lo scopo è rimuovere completamente il fibrinogeno. 40 mg di bentonite sono stati aggiunti a una provetta da 45 ml in polipropilene per centrifuga in plastica, sono stati aggiunti 0,5 ml di tampone di adsorbimento e la miscela è stata accuratamente miscelata, sono stati aggiunti 1 ml di plasma, agitati e miscelati su un miscelatore a ciclone e agitati lentamente per 10 minuti. Centrifugare a 5000 r / min per 15 minuti, aspirare il surnatante in un'altra provetta, quindi trattarlo una volta con la bentonite come descritto sopra. Quindi, 1 ml del surnatante è stato aspirato e aggiunto a una provetta contenente 50 ml di una soluzione 20 g / LT tra 20 e miscelato. Il campione finale è stato diluito 20 volte. (3) Rivestimento FPA: 1 μg / ml di FPA è stato sciolto nel tampone di rivestimento, è stata aggiunta una piastra di reazione in polistirene, 200 μl / pozzetto, tappato e per una notte a 37 ° C. Il buco è stato scartato il giorno successivo. La piastra è stata lavata 5 volte con una soluzione di lavaggio, 3 minuti ogni volta, asciugata e risparmiata. (4) Standard FPA: 6 tipi di diverse concentrazioni come 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 ng / ml. 0,9 ml sono stati aspirati separatamente in una serie di piccole provette e 0,1 ml di concentrazione di lavoro di FPA anti-uomo di coniglio sono stati aggiunti a ciascuna provetta. I campioni di plasma da testare con il trattamento di adsorbimento con bentonite sono stati operati come sopra e le concentrazioni di 1: 2, 1: 4 volte erano come sopra. Ciascuno dei tubi di cui sopra è stato fatto reagire a 37 ° C per 3 ore. (5) 200 ml di ciascuna delle suddette provette dopo l'incubazione sono state pipettate in ciascun pozzetto dell'FPA rivestito e la piastra è stata incubata a 37 ° C per 2 ore, lavata per 5 volte ed essiccata. (6) Ogni pozzetto è stato aggiunto con IgG anti-coniglio di capra HRP (diluito alla concentrazione di lavoro mediante diluizione standard) 200 μl / pozzetto e la piastra è stata incubata a 37 ° C per 2 ore, lavata per 5 volte ed essiccata. (7) Aggiungere 200 μl della soluzione di substrato appena preparata a ciascun pozzetto e reagire accuratamente a 37 ° C per 3 minuti al buio, quindi aggiungere immediatamente 3 mol / L H 2 SO 450 μl a ciascun pozzetto per terminare la reazione. Il valore A (492 nm) di ciascun pozzetto è stato determinato sull'etichetta dell'enzima. Non adatto alla folla Emofilia e coagulazione intravascolare diffusa. Reazioni e rischi avversi Rischio di infezione: se si utilizza un ago sporco, si può essere a rischio di infezione.