Saggio di assorbimento combinato enzimatico

Il saggio di immunoassorbimento enzimatico (di seguito denominato ELISA) è la tecnica più ampiamente utilizzata nel saggio immunoenzimatico. Viene utilizzato per rilevare l'antigene (o l'anticorpo) da testare che viene rivestito nel pozzetto della piastra in fase solida. Cioè, l'anticorpo è etichettato con un enzima e l'antigene o l'anticorpo noto viene adsorbito sulla superficie del portatore di fase solida, e la reazione antigene-anticorpo viene effettuata sulla superficie del portatore di fase solida e il componente libero nella fase liquida viene lavato via mediante lavaggio e infine agito dall'enzima. Il colore viene sviluppato dopo il substrato per giudicare il risultato. Informazioni di base Classificazione specialistica: classificazione del controllo di crescita e sviluppo: esame biochimico Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: il digiuno Suggerimenti: osservare le istruzioni del medico durante il controllo. Valore normale Il rapporto tra il siero da testare e il siero negativo noto (P / N) era <2,1 e il valore di OD del siero da testare era <0,4, che era giudicato negativo. Significato clinico Risultati anormali: il rapporto tra il siero da testare e il siero negativo noto (P / N) ≥ 2,1 e il valore di OD del siero da testare è ≥ 0,4, è considerato positivo. È necessario controllare la folla: rilevare l'antigene e l'anticorpo. precauzioni Controindicazioni prima dell'ispezione: preparare varie soluzioni di imballaggio e impostare la concentrazione. Tabù durante il controllo: 1. Controllare rigorosamente i fattori che influenzano l'efficienza dell'etichettatura come temperatura, tempo, pH, enzima e quantità di anticorpi. 2. Durante l'installazione della colonna, rendere uniforme la colonna, la superficie del cilindro è piatta, senza bolle o crepe. Processo di ispezione I metodi ELISA comunemente usati includono un metodo sandwich a doppio anticorpo e un metodo indiretto, il primo per rilevare gli antigeni macromolecolari e il secondo per misurare specifici anticorpi. ELISA indiretto Questo metodo viene utilizzato principalmente per rilevare anticorpi. La procedura per ELISA indiretto è la seguente. (1) Materiali 1 liquido di rivestimento, liquido di lavaggio, liquido di conservazione del calore, liquido di substrato e liquido di arresto. Antigene rivestito con 2DVH, anticorpo marcato con enzima, siero di riferimento DVH negativo e positivo. 3 rivelatore ELISA, campionatore, micropiastra in polistirene. (2) Passaggi del metodo 1 più rivestimento antigene → 4 ° C durante la notte, lavato tre volte, gettato a secco. 2 più siero da testare → 37 ° C per 2 ore, lavato tre volte, gettato a secco. 3 Aggiungere l'anticorpo marcato con enzima → 37 ° C per 2 ore, lavare tre volte, asciugare. 4 Aggiungere la soluzione di substrato → 37 ° C per 30 minuti, aggiungere la soluzione di arresto. 5 Il valore OD è stato misurato da un rivelatore ELISA ed è stato calcolato il rapporto P / N. 2. ELISA sandwich doppio anticorpo Questo metodo viene utilizzato principalmente per rilevare antigeni macromolecolari. 1 Aggiungere rivestimento anticorpale → 4 ° C durante la notte, lavare tre volte, asciugare. 2 Aggiungere l'antigene da testare → 37 ° C per 30 minuti, lavare tre volte, asciugare. 3 Aggiungere l'anticorpo marcato con enzima → 37 ° C per 30 minuti, lavare tre volte, asciugare. 4 Aggiungere la soluzione di substrato → 37 ° C per 15 minuti, aggiungere la soluzione di arresto. 5 Il valore OD è stato misurato da un tester ELISA. Non adatto alla folla Non adatto alla folla: no. Reazioni e rischi avversi Nessuna complicanza o rischio correlato.