Prova di neutralizzazione

Il test di neutralizzazione si basa sulla determinazione dell'infettività del virus e sulla capacità del siero immunitario di neutralizzare il virus in base al confronto dell'infettività residua del virus dopo la neutralizzazione da parte del siero immunitario. Quando un animale viene infettato da un virus, nel corpo viene prodotto un anticorpo neutralizzante specifico che si lega specificamente al virione corrispondente, impedendo così al virus di assorbire la cellula sensibile o inibire la sua invasione, in modo che il virus perda la sua capacità di infettare. Informazioni di base Classificazione specialistica: esame delle malattie infettive e classificazione: esame immunologico Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: non il digiuno Risultati dell'analisi: Al di sotto del normale: Valore normale: no Sopra normale: negativo: Meno di 10 è negativo e nessun virus. 10 a 49 sono sospetti. positivo: In generale, un indice di neutralizzazione maggiore di 50 è considerato positivo ed è presente un virus. Suggerimenti: prestare attenzione alle normali abitudini alimentari e prestare attenzione all'igiene personale. Valore normale Metodo fisso del virus della diluizione del siero: per i virus, di solito l'indice di neutralizzazione è maggiore di 50 e da 10 a 49 sono sospetti e meno di 10 è negativo. Valore normale del test di neutralizzazione: il corpo umano è in equilibrio dinamico e stato sano. Significato clinico Questo test viene utilizzato principalmente per rilevare gli anticorpi dal siero da testare o per rilevare virus dal materiale della malattia, quindi diagnosticare le infezioni virali; 2 per controllare le tossine nei materiali con siero anti-tossina o per identificare il tipo di tossine nei batteri; Siero virale o titolo anti-tossina; 4 Identificazione e tipizzazione di virus appena isolati, test di neutralizzazione possono essere effettuati non solo su animali sperimentali sensibili, ma anche su colture cellulari o embrioni di pollo. I metodi di test comprendono principalmente test qualitativi semplici, metodo del virus della diluizione del siero fisso, metodo del siero della diluizione del virus fisso e metodo di riduzione della placca. I risultati positivi possono essere malattie: parotite, AIDS, febbre dengue, encefalite giapponese, rash da virus Coxsackie, afta epizootica, precauzioni contro la rabbia Vietato prima dell'esame: presta attenzione alle normali abitudini alimentari e presta attenzione all'igiene personale. Requisiti per l'ispezione: collaborare attivamente con il medico. Processo di ispezione (1) Semplice test di neutralizzazione qualitativa Questo metodo viene utilizzato principalmente per rilevare il virus nel materiale della malattia e può anche essere inizialmente identificato o finalizzato. Gli animali da testare (o gli embrioni di pollo, la coltura cellulare) e le vie di inoculazione vengono prima selezionati in base alla suscettibilità virale. Il materiale viene macinato e diluito a una certa concentrazione (circa 100 LD50 ~ 1000 LD50 o TCID50). I materiali contaminati devono essere aggiunti antibiotici (da 200 a 1000 unità di penicillina e streptomicina) o filtrati con un filtro batterico, miscelati con antisiero noto (opportunamente diluito o non diluito) e diluiti con siero normale Per confronto. Dopo la miscelazione, le cellule sono state inoculate a 37 ° C per 1 ora e almeno 3 animali in ciascun gruppo. Alimentazione per isolamento, osservazione di morbilità e mortalità. Gli animali di controllo morirono, mentre gli animali del gruppo di neutralizzazione non morirono, il che confermò che la malattia conteneva il virus corrispondente all'antisiero. Questo metodo può essere utilizzato anche per l'identificazione e la tipizzazione di tossine (come le tossine). (2) Corretto il metodo del virus della diluizione del siero In questo metodo, il virus è stato diluito 10 volte in incrementi e sono state posizionate due provette, la prima colonna è stata aggiunta con siero normale (gruppo di controllo) e la seconda colonna è stata aggiunta con siero per essere testato (gruppo test). Dopo la miscelazione, le cellule sono state inoculate a 37 ° C per 1 ora e ciascuna miscela di provette è stata inoculata separatamente negli animali da test selezionati e sono stati usati da 3 a 5 animali per ciascuna diluizione. Dopo l'inoculo, osservare quotidianamente e registrare il numero di decessi. Dopo l'osservazione, calcolare l'indice LD50 e l'indice di neutralizzazione (Tabella 7-1, Tabella 7-2). Questo metodo è applicabile al rilevamento di un gran numero di campioni. Questo metodo viene utilizzato principalmente per rilevare anticorpi neutralizzanti nel siero da testare. Per i virus, l'indice di neutralizzazione è generalmente maggiore di 50 ed è positivo, da 10 a 49 è sospetto e meno di 10 è negativo. (3) Corretto il metodo del siero di diluizione del virus Questo metodo viene utilizzato per determinare il prezzo di neutralizzazione del siero antivirale: il siero da testare viene diluito 2 volte e viene aggiunta la soluzione virale con lo stesso valore tossico (mescolata con siero, ogni dose contiene virus 100LD50), agitare bene. Gli animali da test sono stati inoculati a 37 ° C per 1 ora. Nota: [1] Dose di inoculo 0,1 ml, contenente virus 100LD50. [2] si riferisce alla diluizione dopo la miscelazione con il virus. [3] Il denominatore è il numero di inoculazioni e il numeratore è il numero di protezione. [4] PD50 è una mezza protezione e il suo metodo di calcolo è lo stesso del calcolo LD50. (4) metodo di riduzione della placca Il test di neutralizzazione del virus è stato condotto sulla coltura cellulare e negli ultimi anni è stato frequentemente utilizzato il metodo di riduzione della placca. Innanzitutto, il virus viene diluito a una concentrazione appropriata, in modo tale che 80-100 PFU (unità formanti placca) per 0,2 ml vengano miscelate con le diverse diluizioni del siero da testare e poste a 37 ° C per 1 ora a 2 ore per misurare la PFU, rispettivamente. Una diluizione sierica del 50% della placca è il prezzo di neutralizzazione del siero. Vedi tabella 7-4. Tabella 7-4 Esempio di test di neutralizzazione per il metodo di riduzione della placca Nota: [1] Il siero è stato diluito in incrementi di 4 volte. [2] La placca è ridotta del 50% della diluizione del siero e il metodo di calcolo è lo stesso del calcolo di LD50. Non adatto alla folla Le persone con ridotta funzionalità ematopoietica come leucemia, varie anemie, sindrome mielodisplastica o persone con trombocitopenia devono prestare attenzione al prelievo di sangue e non devono assumere più o più sangue. Reazioni e rischi avversi 1. Dopo aver prelevato il sangue, non premere il foro dell'ago per evitare l'ematoma sottocutaneo. Se c'è un piccolo livido nel sangue, è leggermente tenero, per favore non farti prendere dal panico, puoi fare impacchi caldi dopo 24 ore per favorire l'assorbimento del sangue. La piccola quantità generale di congestione si assorbirà gradualmente in 3-5 giorni e il colore diventerà più chiaro e tornerà alla normalità. 2. Dopo il prelievo del sangue, i sintomi come vertigini, vertigini, affaticamento, ecc. Devono essere immediatamente supini, bere una piccola quantità di sciroppo e quindi sottoporsi a un esame fisico dopo che i sintomi sono stati alleviati.