淋病
はじめに
go病の紹介 Go病は、Ne菌（caused菌と呼ばれる）によって引き起こされる泌尿生殖器系の化膿性感染症です。また、目、咽頭、直腸、骨盤、播種性感染症にも侵入することがあり、一般的な性感染症の1つです。 。 Go病は性交を介して伝染し、少数は患者の膿汚染物質を介して伝染する可能性があり、これは産道を介して赤ちゃんに伝染します。 基礎知識 病気の割合：0.012％ 感受性のある人：主に若い男性と女性に発生します 伝達様式：性的に伝達された接触 合併症：前立腺炎、精嚢炎、精巣上体炎、尿道炎、尿道狭窄、骨盤内炎症性疾患、骨盤膿瘍、腹痛
病原体
go病の原因
形態と染色（25％）：
Ne菌は楕円形または豆型です。細菌の長さは0.6〜0.8μm、幅は約0.5μmです。それらはペアで配置されることが多く、隣接する面は2つの豆がペアになっている、鞭毛、胞子がないように平らまたはわずかに凹んでいます。急性感染体では、その形態はより典型的で、主に細胞質にあり、慢性期では細胞外にあり、菌グラム染色は陰性であり、アルカリ性メチレンブルーで染色すると、細菌は青色で、パペハイム・ザートホフで染色されます当時、セルは赤で、背景は空色です。これは非常に明確です。 Ne菌は、人工培地上に5つの異なるコロニー形態、すなわちT1、T2、T3、T4、T5を持ち、そのうちT1とT2は病原性であり、T3とT4は不毛であり、ヒトに感染することはできません。
セル構造（20％）：
Ne菌の病原性は、細胞外の構造と密接に関係しています。iss菌の外側の構造は外膜です。外膜の主成分は膜タンパク質、リポ多糖、および線毛であり、膜タンパク質はヒト粘膜に付着します。ヒト細胞への細胞食作用、細胞の増殖、細胞崩壊、粘膜下層へのto菌の広がりにより感染を引き起こし、線毛は病原性および感染性の子宮腔および口腔上皮細胞の表面に付着する傾向があります。
抵抗（25％）：
iss菌はより繊細で、乾燥を最も恐れており、湿度、温度35〜36°C、2.5％〜5.0％の二酸化炭素を含む成長に適しています。成長に最適なpHは7.0〜7.5です。Ne菌の物理化学的要因完全に乾燥した環境では1〜2時間以内に死にますが、下着や寝具に付けた場合、18〜24時間生き残ることができます。厚い膿や濡れた物体で数日間生き残ることができます。 50°Cは5分間しか生存できません。Ne菌は一般的に使用される粘菌性殺菌剤に対して非常に弱く、可溶性銀塩に特に敏感です.1：4000の硝酸銀溶液は7分以内に死ぬ可能性があるため、膿は2分でNe菌になります死の中で、1％フェノール（炭酸）溶液は3分以内に殺すことができます。耐性菌に加えて、Ne菌は抗生物質に敏感ですが、抗生物質の最小発育阻止濃度は徐々に改善されます。
病原体は、ne菌としても知られるne菌であり、Ne菌と呼ばれ、iss菌、ナイセリアに属する。
1. 1879年、ナイサーは急性尿道炎、膣炎、および新生児急性結膜炎の35の分泌物からgo病を分離したことを発見し、1885年にBummはヒト、ウシ、またはヒツジの凝固血清培地に使用されました。 Ne菌の培養は成功し、健康な人の尿道にこの株を接種することで同じ症状を引き起こすことができましたが、この時点でNe菌はgo病の病原体であるという結論が確立されました。
2.培養、生化学的特性は、血液、血清、卵黄、腹水などの動物性タンパク質を含む培地でよく成長します。培養に適した温度は35〜36°C、適切なpHは7.5で、5％二酸化炭素環境で培養する必要があります。 。
人間の尿道では、グルコースは発酵できますが、フルクトースは発酵できないため、この特性は、fermentationマトリックスと硫化水素を生成しない髄膜炎菌と同定するためのグルコース発酵試験として使用できます。オキシダーゼの産生は、早期発見において特定の重要性を持っています。
3.栄養素の分類gon菌培養に必要なアミノ酸および核酸の栄養基盤によれば、Ne菌は35種類の栄養素に分類できます。そのうち、Arg、Hyx、Ura型のiss菌は無症候性go病および播種性go病を引き起こす可能性があります。血清に耐性がありますが、ペニシリンおよび他の薬物に敏感です。
病因
（1）上皮への親和性：iss菌は円柱上皮と移行上皮に特別な親和性があり、男性と女性の尿道、女性の子宮頸部は円柱上皮と移行上皮を覆っているため、男性の舟状骨と女性の膣は影響を受けやすい層状扁平上皮は一般に強い抵抗で覆われており、一般に浸潤しないか、炎症が非常に軽いため、adult菌性膣炎は成人女性ではまれです。膣粘膜は円柱上皮であるため、若い女の子は感染しやすく、皮膚は容易に菌性ではありません感染症、原発性gon菌性皮膚感染症のまれなケース、人間は菌性細菌に対する先天性免疫を持たず、回復後に再感染が起こる可能性があります。
（2）接着：gon菌線毛の特定の受容体は粘膜細胞の対応する部分に結合できます;外膜タンパク質IIは接着プロセスを媒介できます;また、IgA1分解酵素を放出して細胞の拒絶に抵抗できます。 Ne菌と上皮細胞は互いに急速に接着し、微小環境、イオンブリッジ、疎水性構造、性ホルモンのpHも接着プロセスを促進します。
（3）侵入と感染：Ne菌が上皮細胞の微絨毛に吸着し、外膜タンパク質Iが細胞膜に移動し、then菌が細胞に貪食され、Ne菌が精子にすばやく吸着される子宮頸管に上行すると、子宮頸管の粘液がNe菌の子宮腔への一時的な侵入を防ぎ、子宮頸部の円柱上皮細胞で病気を引き起こします。菌細胞が細胞に侵入すると、それらは増殖して上皮細胞を損傷します。粘膜下空間への球菌、粘膜下感染を引き起こす。
（4）病変の形成：Ne菌は粘膜下層に侵入し、増殖を続けます。36時間以内に第一世代で増殖します。エンドトキシンリポ多糖、補体、IgMの相乗作用により、炎症反応を形成し、同時に白血球の赤みと腫れを引き起こします。凝集および死、上皮細胞の壊死および脱落、膿が現れ、病変は腺および陰窩開口部で最も重度でした。
（5）スプレッドの広がり：菌感染による炎症は尿路に沿って広がり、生殖管の広がり、男性では前立腺、精嚢、輸精管および精巣上体に広がり、女性では子宮、卵管および骨盤に広がり、深刻Ne菌は血流に入り、体中のさまざまな組織や器官に広がり、播種性感染症を引き起こす可能性があります。
防止
Go病予防
go病の予防には、go病患者が子供、特に女の子、風呂または公衆浴場、バスタオルなどと一緒に寝ることを禁止する必要があることにも注意する必要があります。目薬。
1.性感染症の知識を促進し、高貴な道徳を促進し、売春を禁止します。
2.コンドームを使用して、菌感染の発生を減らします。
3.抗生物質の予防的使用は感染のリスクを減らすことができます性交の前後にノルフロキサシンまたはアモキシシリンを服用すると、性感染症を効果的に防ぐことができます。
4.性的パートナーも同時に扱われます。
5.患者は、家族、子供、特に女の子、お風呂で寝るのではなく、個人の衛生と隔離に注意を払う。
6.新生児の硝酸銀溶液または他の抗生物質の液滴のシステムを実装して、菌性眼炎を防ぎます。
合併症
Go病の合併症 合併症前立腺炎精嚢炎精巣上体炎尿道炎尿道狭窄骨盤内炎症性疾患骨盤膿瘍腹痛
男性のgo病の合併症
1、前立腺炎の症状を伴うgo病：急性前立腺炎の発症の1日前または半日前にしばしば膿または膿の減少が止まり、患者は高熱、頻繁な排尿および痛み、直腸検査で前立腺肥大、圧痛、尿を示した液体の濁り、治療がタイムリーでない場合、前立腺は膿瘍を形成する可能性があり、慢性前立腺炎の患者には一般に明らかな症状はなく、目覚めた後の最初の排尿、尿道開口部に密閉現象があり、陰茎が圧迫されると少量の白い分泌物が分泌される、分泌物検査により、上皮細胞、少数の膿細胞および菌が明らかになることがあります。
2、精嚢炎の症状を伴うgo病：急性発熱、頻尿、排尿障害、尿末期の混濁および血液、直腸検査は腫れた精嚢に触れることができ、重度の圧痛、慢性症状、直腸検査なし精嚢が硬くて線維性であることを示しています。
3、精巣上体炎の症状を伴うgo病：一般に急性尿道炎、片側性、主に低熱、精巣上体の腫れと圧痛、同側径部と下腹部に反射痛があり、触診で精巣上体の腫れが見られる激しい圧痛、尿の混濁。
4、男性のgo病は尿道狭窄と組み合わせることができます：繰り返されるgo病は、尿道狭窄、少数の輸精管、さらには梗塞、さらには二次精液嚢胞と不妊を引き起こす可能性があります。
女性のgo病の合併症
女性のgo病および急性卵管炎、子宮内膜炎、破裂、腹膜炎などに起因する二次卵管卵巣膿瘍および骨盤膿瘍を含むtreatment菌性骨盤内炎症性疾患の症状、治療、虐待、女性のgo病患者、極度の泌尿生殖器感染症から骨盤および副感染症へと進行しやすく、不妊、腹痛、さらには生命を脅かすような深刻な結果を引き起こします。
症状
go 病の症状 一般的な 症状背中の痛みの欠如、白い粘液、尿、吐き気、性欲、激しい痛み、炎症、食欲不振、肛門のかゆみ
gon菌感染の臨床症状は、感染の程度、生物の感受性、細菌の毒性、感染の場所、および感染の長さに依存します。 同時に、それは体の健康、性生活が過度であるかどうか、およびアルコール依存症に関連しています。 臨床症状によると、go病はgo病なしと併発性nor病、無症候性および症候性nor病、播種性nor病および急性および慢性nor病に分けることができます。
まず、合併症のないgo病
（a）男性の合併症のないno病
急性菌性尿道炎（急性go病）：潜伏期間は1〜14日、多くの場合2〜5日です。 当初から、尿道の急性尿道炎、発赤、かゆみ、わずかなうずき、続いて薄い粘液が排尿の不快感を引き起こし、約2日後、分泌物がべとつくようになり、尿道が溢れ、膿が深くなりました。黄色または黄緑色、陰茎亀頭および尿道の一部で発生した尿路不快感、発赤および腫脹の症状の増加、頻尿、尿意切迫感、排尿障害、排尿困難、不便な動き、夜間の陰茎勃起の増加を伴う。 in径部リンパ節の腫れ、発赤、痛みがあり、化膿することもあります。 急性症状の最初の週が最も深刻で、治療せずに放置すると、症状は約1か月後に徐々に減少または消失します。 急性前部尿道炎の発症から2週間後、患者の約50〜70％が後部尿道の菌浸潤を起こします。これは、尿路dis迫、頻尿、および急性尿閉を特徴としています。 排尿障害の特徴は、痛みまたは痛みが排尿の終わりに悪化し、それが鍼治療のようであるということです。会陰痛があり、血尿がない場合もあります。 1〜2週間後、症状は徐々に消えました。 全身症状は一般に軽度であり、38°Cまでの発熱、全身mal怠感、食欲不振などがある場合があります。
慢性菌性尿道炎（慢性go病）：2か月以上続く症状は、慢性菌性尿道炎と呼ばれます。 治療が徹底的でないため、Ne菌は尿道体、傍尿道腺、および尿道陰窩に隠され、疾患の経過を慢性化させる可能性があります。 患者の体質が弱く、貧血、結核に苦しんでいる場合、主に前部および後部尿道複合感染、尿道球、膜および前立腺への良好な浸潤のために、状態は慢性プロセスから始まります。 尿道の臨床症状には、かゆみ、,熱感、または軽度のうずき、細かい尿の流れ、排尿の弱さ、しずくが見られることがよくあります。 ほとんどの患者は、早朝に尿路に少量の漿液性sealの封印があり、生殖器または陰茎の根が圧迫されると、薄い粘液が溢れます。 尿は基本的に透明ですが、絹があります。
（2）合併症go病のない女性
女性の原発性oc菌感染症の主な部分は子宮頸部であり、Ne菌は重層扁平上皮に付着することがあり、。菌の感染部位は子宮頸部の扁平円柱上皮の接合部で観察されます。 go病性子宮頸管炎の患者は、多くの場合、初期段階で症状を示さないため、潜伏期間を決定することは困難です。 子宮頸部うっ血、圧痛、化膿性分泌物の増加、性器のかゆみやburning熱感、しばしば腹痛と腰痛を軽減します。 これらの非定型症状により、患者はしばしば診療所に行かないため、感染の主な原因になります。菌性尿道炎は、性交、尿道うっ血、圧痛および化膿性分泌物、軽度の軽症の2-5日後に発生します頻繁な排尿、尿意切迫、排尿、排尿時のburning熱感、尿道の化膿性分泌;菌の前庭腺の炎症はしばしば片側性、発赤および腺の開口部の腫れ、激しい痛み、重度の膿瘍形成。 発熱やその他の全身症状があります; gon菌性膣炎はそれほど一般的ではなく、高齢者の症状は軽度であり、一部の患者は腹部の腫れ、背中の痛み、膣分泌物があり、一部の患者は腹痛および月経過多が少ない;女性の菌性外陰部外陰部および膣の炎症として現れる膣炎。 膣の化膿性分泌物が多く、膣と尿道に黄色と緑色の分泌物があり、外陰部に痛みを伴う排尿、発赤があります。 分泌物が肛門に流れ、刺激を引き起こす可能性があります。 重症の場合、直腸に感染して菌性直腸炎を引き起こす可能性があります。
第二に、go病の合併症があります
（a）男性にはcom病が併存しています：
Go病性尿道炎には、主に前立腺炎、精嚢炎、精巣上体炎などのさまざまな併存疾患があります。
1.前立腺炎：急性前立腺炎は、前立腺に流入するNe菌の排出管と腺によって引き起こされ、排尿を伴う発熱、悪寒、会陰痛、尿路感染症があります。 検査すると、前立腺は腫れて柔らかくなっています。 しかし、Ne菌は急性前立腺炎の一般的な原因ではありません。 iss菌による前立腺の主な特徴は慢性病変です。症状は軽度で、会陰部の不快感、陰茎の痛みがあり、朝の尿道口に「口」現象があり、尿のリンパが見られます。前立腺マッサージ液には膿とレシチンがあります。 、塗抹標本または文化は菌を見つけるために、肛門検査は前立腺の小さな結節に触れることができ、不快感や痛みがあり、排尿チューブ近くの膿の排液は瘢痕収縮を形成し、射精に影響を与え、不妊症になります。
2.精巣上体炎：通常、急性尿道炎の後に、主に片側に発生します。 低熱、精巣上体の腫脹痛、同側のin径部および下腹部に反射痛があり、開始および精巣の境界が明確で、徐々に不明瞭で、精巣の圧痛、腫脹、重度の圧痛があります。 尿はしばしば濁っています。 前立腺と精嚢炎が同時に存在する可能性があります。
3.精嚢炎：発熱、頻尿、尿意切迫感、排尿障害、尿の混濁なし、血液。 直腸検査では腫れた精嚢に触れることができ、重度の圧痛があります。慢性精嚢炎は一般に症状がありません。直腸検査では精嚢が硬くて線維性であることがわかります。
4.尿道腺の炎症：会陰またはその周辺で発生し、指の大きさの結節、痛み、急性化膿および潰瘍、尿道の圧迫および排尿障害があり、発熱、進行の遅れなどの全身症状があります。
5.尿道狭窄：繰り返される著者は、尿道狭窄を引き起こす可能性があり、少数の輸精管または閉塞が生じる可能性があり、排尿障害、尿路のthin薄化、および重度の尿閉が生じます。 二次輸精管、精嚢嚢胞および不妊。
（2）女性にはcom病が併存している
女性のgo病の主な合併症は、急性卵管炎、子宮内膜炎、破裂、腹膜炎に起因する二次卵管卵巣膿瘍および骨盤膿瘍などのgon菌性ボックス炎症です。 月経後の突然の発症、高熱、悪寒、頭痛、吐き気、嘔吐、下腹部痛、化膿性白帯下の増加があります。 アタッチメントの両側は厚く、柔らかいです。
第三に、go病の他の部分：
1. Go病性結膜炎：新生児は出生後2〜3日以上で出現し、ほとんどが両側性、まぶたの腫れ、化膿性分泌物、成人はほとんどが自己接種で、しばしば片側性で、同じ新生児を示します。 膿のオーバーフローのために、「膿の目」が遅れると、角膜が蒸し暑くなり、角膜が穿孔されます。 失明につながる。
2. gon菌性咽頭炎：主にオーラルセックスで見られる、いわゆる「口」西洋同性愛者または異性愛者がより一般的であり、急性咽頭炎または急性扁桃炎、時折の発熱および頸部リンパ節腫脹として現れる。 のどの乾燥した不快感、のどの痛み、のどの痛みなどの症状があります。
3. Ne菌：主に男性の同性愛で見られます。 女性は主に膣感染症によって引き起こされます。 テーブルは緊急で重いです、膿と血、肛門管粘膜の混雑、化膿性分泌、gon菌培養陽性があります。
第四に、播種性菌感染
播種性菌感染症は、oc菌の細菌が血流を介して全身に広がり、より深刻な全身感染を引き起こすためです。 発生率はgo病患者の約1％です。 播種性gon菌感染症を引き起こす菌株のほとんどは、AHU栄養性であり、正常なヒト血清に対して安定した耐性を持っています。また、正常なヒト血清は、oc菌リポ多糖に対するIgM抗体を持っています。ほとんどの菌には殺菌効果があり、C5、C6、C7、およびC8補体成分を欠く患者は、菌敗血症または菌性髄膜炎を起こしやすい。
（1）菌性敗血症：患者は発熱し始め、体温は40°Cまで上昇しますが、通常は38°C〜40°Cの間で、悪寒は一般的ではなく、一部の患者は皮膚丘疹、斑状出血、膿疱、出血を起こしますまたは壊死性の皮膚損傷、一部の皮膚病変には痛みの症状があります。 病変では、蛍光免疫染色を使用して、Ne菌または培養Ne菌の増殖を検出し、PCRによりNe菌のDNA陽性を検出できます。 病変の病理組織は、膿形成を伴う表在性潰瘍、真皮および皮下組織のびまん性炎症、多形核白血球浸潤、小血管の関与、血栓症および限局性壊死である。
（B）菌性関節炎：1つまたは複数の敗血症性関節炎の関節の腫れ、痛み。 一般に非対称で、めったに股関節、肩関節、脊椎関節に関与しません。 関節液検査にはgo病があり、骨の破壊と骨および関節の硬直によって引き起こされる線維症を引き起こす可能性があります。
（C）菌性角化症：菌またはその毒素が原因である可能性があり、皮膚病変に菌性病変を見つけることができず、多くの場合、can菌性関節炎を伴い、皮膚病変は手足、足首のかかとと腰に良い。 通常平らでわずかに膨らんだパッチまたはプラーク、円錐形、黄色、または銅赤または灰色がかった白。 手掌の皮膚病変は、角質の過形成と大きな角質化を示した。
（D）菌性心内膜炎：菌は抗生物質使用の最初の数十年で心内膜炎の主な病原体であり、gon菌性心内膜炎はほとんど目に見えない、菌性心内膜炎およびその他のタイプ心内膜炎の臨床症状は同じです。 心内膜炎は大動脈弁または僧帽弁、弁の急速な破壊による亜急性または急性心内膜炎をしばしば伴い、死に至る。
（5）gon菌性髄膜炎：まれで、関節炎と典型的な発疹に関連して、髄膜炎菌性髄膜炎を区別します。
第五に、妊娠と新生児に対するgo病の影響
女性が卵管炎でgo病になると、不妊症になる可能性があります。 女性のgo病によって引き起こされる不妊症の発生率は約20％であり、不妊症の発生率は感染数の増加とともに増加します。 go病に3回以上感染した女性の場合、不妊の発生率は70％に達する可能性があります。 子宮頸部菌の炎症は、膜の早期破裂、羊膜内感染、子宮内感染、子宮内発育遅延、および早産につながる可能性があります。 新生児は、早産、低体重、敗血症により罹患率と死亡率が高い。 出生後の菌の上流感染は、子宮内膜炎、産per熱、重度の産後敗血症、新生児gon菌性結膜炎、および膣膣炎を引き起こす可能性があります。
調べる
Go病検査
実験室検査：
Ne菌の実験室検査には、塗抹標本、Ne菌を検査するための培養、抗原検出、薬剤感受性検査およびPPNG決定、および遺伝子診断が含まれます。
（1）スミア検査：
グラム染色のために患者の尿道分泌物または子宮頸部分泌物を採取し、多形核白血球でグラム陰性を見つけます
Diplococcus、膿性分泌物の多い単純な菌性前部尿道炎患者の塗抹標本、この方法の陽性率は約90％で、最初に診断できる、女性の結腸分泌物、より多くの細菌、感度と特異性が低い陽性率は50-60％であり、偽陽性があります。したがって、世界保健機構は、培養法を使用して女性患者を検査することを推奨しています。慢性go病は分泌物中の陽性gon菌菌が少ないため、陽性率は低いため、前立腺マッサージ液を服用する必要があります。検出率を上げます。
咽頭塗抹標本では、咽頭では他のナイセリア種が正常であるため、グラム陰性双球菌はgo病を診断できず、非定型症状に対して陽性の塗抹標本をさらに検査する必要があることがわかりました。
（2）トレーニングと検査：
Ne菌の培養は診断の重要な証拠です。培養法は、軽度または無症候性の症状のある男性にとって敏感な方法です。培養が陽性である限り、診断を確認できます。遺伝子診断の前に、培養は世界保健機構によって推奨されます。 go病をスクリーニングする唯一の方法は、改良型セイヤーマーチンTM培地とニューヨークシティ（NYC）培地を使用することですチョコレート寒天培地または血液寒天培地の国内使用には抗生物質が含まれ、任意で他の多くの細菌の増殖、36°C、湿度70％、5％-10％CO2（キャンドル）環境での培養、24-48時間の観察、コロニー形態、グラム染色、酸化を抑制酵素試験および糖発酵試験による同定では、培養の陽性率は男性で80％〜95％、女性で80〜90％です。
（3）抗原検出
1.固相酵素免疫測定法（EIA）：臨床検体中の菌抗原の検出に使用できます。有病率の高い地域の女性集団で使用でき、培養できないか、検体を長期間送る必要があります。菌感染症を診断する。
2.直接免疫蛍光アッセイ：Ne菌の外膜タンパク質Iに対するモノクローナル抗体の検出による直接検出
流行性蛍光検査ですが、現在、男性と女性の双極子検体の感度は高くなく、特異性は低く、実験者の判断レベルなので、実験は菌感染症の診断にはお勧めできません。
（4）遺伝子診断
1. iss菌の遺伝子プローブ診断
gon菌遺伝子プローブのプローブは、プラスミドDNAプローブ、染色体遺伝子プローブ、rRNA遺伝子プローブです。
（1）プラスミドDNAプローブ
1隠されたプラスミドDNAプローブ、Neisseria gonorrhoeaeプラスミドは、最大の分子である接合性プラスミド、36 kb DNA、薬物耐性プラスミドはそれぞれ2つのプラスミド、DNAの長さ5.6 kbおよび7.1 kb、隠されたプラスミド4.2 kb、クリプティックプラスミドは、contain菌の臨床分離株の96％に存在します。他のナイセリアにはこのプラスミドが含まれていないため、その配列を特定のDNAプローブとして使用してNe菌を検出できます。トーレスは核酸ハイブリダイゼーション技術を使用してnucleic菌を検出します。プラスミドを隠すために、プローブを使用して134菌の134株と131の関連株を検出しました。124菌の124株はハイブリダイゼーションが陽性で、93％を占め、他のナイセリア種と交差反応する可能性もありました。針の感度試験により、ナイセリアNe菌の102 CFUを検出できることが示されました。潜在プラスミドのCPPB遺伝子配列がすべての菌染色体（プラスミドのない系統を含む）にあることが証明されたため、CPPB遺伝子プローブは良好な特異性と感度を持っています。 Sex、Torresらは、CPPB遺伝子プローブを使用して、感度と特異性がそれぞれ95％と98％の非放射性ジゴキシン標識システムを使用して201の臨床検体を検出しました。
2薬剤耐性プラスミドDNAプローブ
iss菌耐性プラスミドは、以下に分類できます。
1毒素産生菌（PPNG）は、β-ラクタマーゼ陽性です。
2は、プラスミドを介したテトラサイクリン菌（TRNG）に対する耐性が高い。
PPNG株は1976年に実験室で最初に分離されました。この株にはセロトニン産生酵素をコードする遺伝子が含まれており、この遺伝子は染色体またはプラスミドDNAに組み込まれます。毒素酵素プラスミド、それぞれ7.4 kbと5.3 kbの2種類のプラスミドペスカドールは、1998年に菌β-ラクタマーゼ遺伝子を検出するための特異的プローブを設計し、酵素化学発光、液相ハイブリダイゼーションで標識しました。 PPNG株の104-105 CFUは4時間以内に検出できますTRNG株はテトラサイクリンに耐性がありますが、通常はβ-ラクタマーゼとキノロン系抗生物質に敏感です。ペスカドールはテトラサイクリンine菌（TRNG）tetm遺伝子に対するオリゴヌクレオチドプローブを使用しますが、これはテトラサイクリンによって媒介され、酵素化学発光で標識され、液相でハイブリダイズします。 tetm遺伝子を含む1.5×104 CFuのNe菌が臨床検体から直接検出された。
（2）染色体プローブ
染色体プローブには、ヒト細胞の菌感染の過程で重要な役割を果たすピリ線毛DNAプローブやpaI遺伝子プローブなどの既知の遺伝子プローブが含まれます;これらのプローブは機能が不明な遺伝子プローブです上記の2つの染色体プローブは、Ne菌の相補配列のコピー数が少ないため検出数が少ないため、検出感度が低いため、通常は使用されません。特別な研究目的があります。
（3）rRNA遺伝子プローブ
rRNA遺伝子プローブは、rRNAに相補的なDNAをプローブとして使用し、プローブのターゲット配列はrRNA配列であり、rRNAの遺伝子プローブは次の特徴があります。
1はプローブ検出の感度を高めることができ、rRNA遺伝子プローブはrRNA分子とDNA分子を同時に検出できます。
2rRNAは進化的に保存されています。
3ハイブリダイゼーション法は簡単で迅速です。
4 rRNAの含有量が高いため、検体を濃縮する必要はありません。米国のGen-Probeが生産する菌検出プローブPACE Cは、rRNAとその遺伝子を検出対象配列として使用し、放射能標識されており、2時間以内に検出できます。 Peterはこのプローブを使用して395の臨床検体を検出し、感度と特異度はそれぞれ92.9％と99.4％であり、PACE Cシステムは臨床検体中のgon菌のスクリーニングに信頼できる方法であると考えました。無症状の菌感染。これは現在達成が困難です。
2、菌遺伝子増幅検出
上記のプローブ技術は、culture菌法を検出しますが、培養法よりも感度、特異性、利便性が大幅に向上していますが、ほとんどの場合検体を必要とするNe菌などの特定の制限があります。濃度は非常に高く、PCRテクノロジーとリガーゼ連鎖反応の出現により、Ne菌の検出感度がさらに向上します。迅速、高感度、特異的、簡単な利点があり、臨床検体中のごく少量の病原体を直接検出できます。
（1）Ne菌DNAの抽出
1培養からのDNA抽出
培養されたNe菌は、102 cfu / mlの濃度でアルカリ溶解物に溶解された。溶解物は、1 M NaCl 1 M NaOHおよび1％ドデシル硫酸ナトリウムで構成された。溶解物は1分間混合され、その後100μlで煮沸された。アルカリ溶解物を1 M Tris pH 7.0で中和し、Tris平衡フェノールで1回抽出し、フェノール-クロロホルムで1回抽出した後、無水エタノールまたはイソプロパノールで沈殿させました。抽出したDNAを30μlの蒸留水またはTEバッファーに溶解しました。液体中。
2臨床綿棒検体抽出
分泌物の入った綿棒を2 mlの滅菌生理食塩水またはPBSバッファーで1分間絞って、検体をできるだけ溶液に溶かし、綿棒を廃棄し、懸濁液は2〜3000 r /毎分5分間遠心分離し、上清を吸引し、0.4％Tween 20および200μg/ mlプロテイナーゼKを含む1 x PCRバッファー100μlに細胞を再溶解します。細胞懸濁液を50-60°Cで1時間加温し、その後、95°Cで10分間加熱しました。不活化プロテイナーゼKを12000 r / minで10分間遠心分離し、上清にDNAテンプレートを含めました。
（2）PCRプライマーの設計
Ne菌のCPPB遺伝子は、oc菌の染色体と4.2 kbの潜在プラスミドに、そしてNe菌の96％に存在するため、多くのPCRプライマーがCPPB遺伝子領域に設計されています。
標的遺伝子プライマー配列断片長（bp）
CPPB NG1 5'GTT TGG CTG GTT GAT TCA AG 3 '633
NG2 5'GCA AGA TTT CCG ATTT GGC G 3 '
CPPB HO1 5'GCT ACG CAT ACC CGC GTT GC 3 '390
HO2 5'CGA AGA CCT TCG AGC AGA CA 3 '
rRNAプライマー1 5'-AGG CTG TTG CCA ATA TCG GC-3 '206
プライマー2 5'-ACA CTC GAG TCA CCC AGT TC-3 '
CPPB GC1 5'CTT ATC GTT TGG CTG GTT GAT TC 3 '435
GC2 5'ACC AAG ACC AAA GGT TTG ACA CTG 3 '
GC3 5'ATT TTC CAG TGT CAA AC 3 '241
GC4 5'TAT TCA AGC CCT ATC TG 3 '
（3）PCR増幅
Neisseria gonorrhoeae DNA抽出物2μlを取り、反応溶液28μlを加える。最終PCR反応溶液には、100μmol/ LのdNTP、0.5μmol/ Lのプライマー、1 UのTaq DNAポリメラーゼ、1.5 mmol / LのMg2 +、および滅菌パラフィンオイルが含まれています。 30μl、30秒間1000 r /分の遠心分離、PCR増幅サイクル、反応条件：94°C変性1分、その後94°C 30秒、57°C 1分、72°C 1分、合計30サイクル、最後に72°C延長5分
増幅産物を2％アガロースゲルで30分間電気泳動し、エチジウムブロマイドで染色し、増幅されたDNA蛍光バンドを紫外光下で観察しました。増幅された分子のサイズは、増幅された標的配列のサイズと一致するはずです。
（4）PCRの感度と特異性
CPPBには、潜在プラスミドを含まないC菌染色体にもCPPB遺伝子が含まれるため、96菌の96％に潜在プラスミドが含まれるため、CPPBをターゲット配列として使用するプライマーの感度は非常に高くなります。ワンステップPCR（GC1-GC2）メソッドでは3つのナイセリアdetect菌を検出できますが、シングルチューブネストPCR（GC2-GC4）では0.3以下のナイセリアgo菌（9 CPPB遺伝子）を検出できます。 Ne菌のDNAを増幅できますが、N。gonorrhoeaeに特異的な産物は産生しません。
（5）シングルチューブネストPCR法
従来のネストされたPCRに基づいて、2組のPCRプライマーが特別に設計されました。2つの外側のプライマー（GC1、GC2）は25b、アニーリング温度は比較的高く（68°C）、ネストされた内側の2つのプライマーGC3-GC4 17bアニーリング温度が低い（46°C）ため、PCR反応溶液の他の成分は一般的なPCRと同じであるため、20〜30サイクル（初回）後にアニーリング温度（68°C）を制御することにより外側のプライマーが最初に増幅されますPCR）、アニーリング温度（46°C）を下げて、インナープライマーがネスト増幅のテンプレートとして最初のPCR産物を使用するようにすると、PCRの感度は0.3菌0.3に達する可能性があります。
（6）iss菌リガーゼ連鎖反応（LCP）検出法
現在、Neisseria gonorrhoeaeのPCR検出法は広く使用されており、その特異性と感度は継続的に改善されています。同時に、別の遺伝子診断技術であるリガーゼ連鎖反応（LCP）も高い特異性と高感度で適用されています。球菌の検出では、LCPはPCRと異なり、LCPは4組のプライマーを使用し、使用される酵素はリガーゼであり、リガーゼは2つの隣接するプライマーを接続でき、2つのプライマーは他の2つのプライマーのテンプレートとして使用できます。後者はリガーゼの作用下でライゲーションでき、30〜40サイクルのテンプレートとして使用できます。LCPに使用するテンプレート処理方法はPCRテンプレートの調製と同等です。LCPに使用するプローブはCPPB遺伝子で設計できます。 opa-1遺伝子などの染色体遺伝子配列に基づいて設計されたAbbott Laboratoriesは、opa-1遺伝子が菌の染色体に11回存在するため、opa-1遺伝子の48 bp領域に4つのLCPプローブを設計しました。したがって、LCPプローブのセットには高い感度と特異性、LCP反応プロセスがあります。
テンプレートをLCP反応溶液、LCP反応溶液に追加しました：20 mmol / L Tris-HCl pH 7.6; 100 mmol / L KCl 10 mmol / L MgCl2; 1 mmol / L EDTA; 10 mmol / L NAD +; 10 mmol / L DTT 、各40fmol / Lのラベルが付いた2つの隣接するプローブ、各40fmol / Lのラベルのないプローブ、15U耐熱リガーゼ、反応条件：97°C 1秒、55°C 1秒、62°C 50秒、40サイクル100μlの反応生成物をマイクロプレートのマイクロプレートに加え、呈色反応を行った。最後に、マイクロプレートリーダーで光の値を読み取った。Buimerの実験によれば、男性尿道綿棒検体の検出におけるLCPの感度は100％であり、尿が得られた。標本は88.9％、女性の子宮頸部スワブ標本は95.4％、LCPメソッドの特異性は100％と高く、これはPCRの特異性よりも有意に高く、偽陽性の発生を回避しました。
3. Ne菌の臨床的遺伝子診断に関する注意事項
現在、Ne菌の臨床的検出のための遺伝子診断法は主にPCR法を採用していますが、この方法は臨床的検出におけるいくつかの問題に注意を払う必要があります。
（1）プライマー設計上記の菌PCRプライマーに加えて、他の遺伝子から設計することもできますが、
細菌の染色体が大きく、多くの遺伝子配列が明確ではないため、特異的であるのはプライマー配列です。同時に、細菌間に特定の相同性があり、細菌に含まれるプラスミド配列にも相同性があります。したがって、遺伝子データベースの比較分析用にプライマーを設計する必要があり、特異性と感度の実験を実施し、臨床検出用にプライマーを選択する必要があります。
（2）臨床検体の処理臨床検体の場合、PCRテンプレートの要件が高ければ高いほど、検体を収集する際に適切な位置を取る必要があります。無症候性の患者の場合、病原菌の収集を確実にするために適切なサンプリングを実行する必要があります。さらに、臨床検体は複雑であるため、検体のPCR増幅が理想的でない場合がありますが、これは過剰な不純物が原因である可能性があり、さらに精製する必要があります。この精製方法は面倒であり、臨床検体からの高純度DNAの比較的簡単な抽出のために、現在市販のDNA精製キットが利用可能です。
（3）PCR産物の検出方法近年、clinical菌の臨床的PCR検出は、ほとんどすべて電気泳動を用いてPCR産物を同定するが、この方法には肉眼的観察の主観による偽陽性および偽陰性結果などの多くの問題がある。結果の特異性と感度を向上させるために、電気泳動の代わりにハイブリッド比色法が現在使用されています。
結論として、PCR法とLCP法は、従来の培養法に比べて感度と特異性が大幅に向上し、時間も大幅に短縮されました。遺伝子診断技術の継続的な改善により、PCR法とLCP法が菌で検出されました日常的な検出方法になります。
（5）感受性試験：培養陽性後のさらなる感受性試験、ペーパー拡散法による感度試験、または寒天プレート希釈法による最小発育阻止濃度（MIC）により、抗生物質の選択をガイドします。
（6）PPNG検出 ：β-ラクタマーゼ、ペーパー酸性度定量法、Whatman I濾紙PP-NGを使用して、菌株は青色から黄色への色変化、PPNGに対して陽性、N-PPNGに対して陰性になります。
診断
go病の診断
1. go病の男性と女性によって特定される病気
（1）非特異性尿道炎：カテーテルの挿入、尿道プローブ、尿生殖路または隣接臓器の炎症など、疾患の明らかな原因がしばしばあり、分泌塗抹染色はグラム陽性球菌を検出できます。
（2）NGU：臨床症状はgo病に似ていますが、light病よりも軽く、潜伏期間は最長1から3週間で、分泌物は小さくて漿液性で、排尿はまれで、全身症状はなく、検査のために分泌物が採取されます。クラミジアやマイコプラズマがよく見られます。
（3）ソフトスクワット：損傷は一般に外陰部にあり、尿道で発生し、肩甲窩は膿性分泌物、尿道発赤、激しい痛みを伴い、潰瘍はDucrey Haemophilusを検出できます。
（4）性器ヘルペス：HSVにより引き起こされる、損傷は通常、外性器にあるクラスター水疱、肛門周囲、時には子宮頸部にあり、尿道に発生し、少量の分泌物と尿道のうずきまたは不快感があり、しばしば局所的なburning熱感を伴う痛みは明らかであり、繰り返すことができます。
（5）薬疹の固定：主にスルホンアミド、バルビツール酸塩、サリチル酸塩またはテトラサイクリンによって引き起こされる薬または注射薬の病歴があり、多くの場合、性器皮膚粘膜接合部の紅斑、浮腫、水疱、かゆみや痛みを伴うびらんや滲出など。尿道に発赤や外反がない。
（6）結核性尿道炎：尿道のうずきと少量の分泌物がありますが、性的接触の履歴はなく、no菌を見つけることができず、結核の症状の他の部分を伴う結核を見つけることができます。
2.男性のgo病によって特定される病気
（1）包皮の亀頭炎：包皮で一般的な長すぎるまたは包茎、主にスメグマ刺激および二次化膿性感染、嚢内内葉、亀頭および冠状溝の発赤、より多くの汚れおよび化膿性分泌物によって引き起こされる、尿路症状がなく、尿道、膿などの発赤や腫れがない。
（2）尿濁度：尿は乳白色であり、放置すると症状を伴わずに塩が結晶化した沈殿物があります。
3.女性のgo病によって特定される病気
（1）カンジダ炎：生殖器および膣の開口部のかゆみ、水様または凝乳様、膣粘膜の発赤、びらんなどのより多くの膣分泌物、膣壁に白いフィルムが付着している可能性があり、白いフィルムを塗って顕微鏡検査絹と胞子。
（2）トリコモナス膣炎：意識的に膣の膣そうpr症、膣分泌物はしばしばピンク色の泡、膣粘膜はより出血し、子宮頸部はイチゴのような突起と涙点出血、膣分泌物を有することがあるトリコモナスを検出できます。
（3）細菌性膣炎：主に難治性白帯下、灰色がかった白色、非化膿性、「魚臭い」匂い、ガードナー菌および嫌気性細菌が膣分泌物から検出されます。
（4）若い女性の黄色ブドウ球菌外陰炎：就学前または学齢期の少女でより一般的で、夏、外陰部、肛門周囲の発赤、膿疱または化膿性分泌物、痛みまたはかゆみ、分泌物塗抹標本を伴うグラム陽性球菌が検出されました。
4. GPIDで特定される疾患
急性虫垂炎、感染性流産、骨盤子宮内膜症、子宮外妊娠、卵巣嚢胞有茎捻転または破裂があります。
