Testy immunologiczne na niepłodność

Immunologiczne badania niepłodności obejmują męską niepłodność autoimmunologiczną przeciw plemnikom, żeńską niepłodność allogeniczną przeciw plemnikom i żeńską niepłodność przeciw Zona pellucida. Dieta kontrolna: 1, większość przedmiotów testowych wymaga pobrania krwi rano na pusty żołądek, powinna być na czczo kawa, mocna herbata, napoje o wysokiej zawartości cukru i coli; 2, czynność wątroby, lipidy krwi, krzepnięcie krwi i inne przedmioty wymagają postu przez 12-16 godzin oraz Kolacja z jednodniowym wyprzedzeniem powinna unikać picia alkoholu, zakazać wysokotłuszczowej, wysokobiałkowej diety; 3, dieta ma znaczący wpływ na badanie lipidów we krwi, przynajmniej w ciągu 3 dni przed pobraniem krwi, aby zwrócić uwagę na utrzymanie normalnej diety. Podstawowe informacje Klasyfikacja specjalistyczna: klasyfikacja badania eugeniki i wyższości: badanie płynów ustrojowych Obowiązująca płeć: czy mężczyźni i kobiety stosują post: post Wyniki analizy: Poniżej normy: Wartość normalna: Nie Powyżej normalnego: Negatywne: Wynik testu negatywnego powinien być normalny. Pozytywne: Pozytywny wynik testu wskazuje na chorobę niepłodną. Wskazówki: Zatrzymaj stosunek seksualny na 4 do 7 dni. Nie można było stosować propionianu testosteronu, fenylooctanu testosteronu i fenylopropionianu nantrolonu na tydzień przed badaniem. Wartość normalna Wyniki różnych testów immunologicznych były prawidłowe i negatywne. Znaczenie kliniczne Nieprawidłowe wyniki Wiele testów immunologicznych wskazuje na bezpłodność. Należy zbadać pacjentów z niepłodnością męską i żeńską. Pozytywnymi wynikami mogą być choroby: niepłodność, niepłodność męska, pseudohermafrodytyzm kobiet, środki ostrożności dotyczące wad rozwojowych narządów płciowych mężczyzn Nieodpowiednie osoby: jeszcze nie znane. Tabu przed inspekcją: Po pierwsze, podczas pobierania nasienia: 1. Przed opuszczeniem nasienia pacjent powinien przerwać stosunek seksualny na 4–7 dni. Nie można było stosować propionianu testosteronu, fenylooctanu testosteronu i fenylopropionianu nantrolonu na tydzień przed badaniem. Picie należy przerwać w ciągu 1 miesiąca przed badaniem. 2, podczas przyjmowania nasienia do masażu prącia można użyć miękkiego mydła lub oleju parafinowego, próbki są zbierane w sterylnych probówkach; można stosować prezerwatywy (myte w czystości, bez środków plemnikobójczych) lub nasienie można zbierać podczas stosunku płciowego, ale w ten sposób Zebrana ilość jest często niewielka. 3. Jeśli nasienie nie zostanie uzyskane powyższą metodą, pęcherzyk nasienny i koniec nasieniowodów można masować przez odbytnicę, a mocz można zebrać, aby sprawdzić, czy w osadach znajduje się sperma. 4. Nie wystawiać nasienia na przegrzanie i zimno. Podaj lekarzowi w celach informacyjnych, nie więcej niż 30 minut. Zachowaj ciepło w chłodne dni i przechowuj w kieszeni bielizny podczas wysyłania. 5. Jeśli ma zostać przeprowadzona hodowla bakteryjna, otwór cewki moczowej należy przepłukać i zdezynfekować, a nasienie należy zebrać w sterylnej probówce. Po drugie, przed wymaganiami dotyczącymi pobierania surowicy: (1) Kontrolowanie diety 1. Większość przedmiotów kontrolnych wymaga rano pobrania próbek krwi na pusty żołądek. Należy pościć kawę, herbatę, napoje o wysokiej zawartości cukru i colę. 2, czynność wątroby, lipidy krwi, krzepnięcie krwi i inne przedmioty wymagają postu przez 12-16 godzin, a jeden dzień przed obiadem powinien unikać picia, zakazując diety wysokotłuszczowej i wysokobiałkowej. 3, dieta ma znaczący wpływ na badanie lipidów we krwi, przynajmniej w ciągu 3 dni przed pobraniem krwi, aby zwrócić uwagę na utrzymanie normalnej diety. (B) w celu uniknięcia efektów narkotykowych Wpływ leków na testy biochemiczne i kulturę bakteryjną jest złożony. Dlatego, jeśli to możliwe, pacjent powinien przerwać przyjmowanie wszystkich leków na 1-2 dni przed testem. Jeśli do leczenia konieczne są leki, podczas analizy wyników testu należy wziąć pod uwagę działanie leku. (3) Unikanie wpływu ćwiczeń fizycznych 1, intensywne ćwiczenia mogą spowodować zmianę wielu składników krwi, nawet przez ponad 24 godziny, więc po intensywnym wysiłku nie należy natychmiast pobierać krwi i chodzić szybko, co najmniej 10-15 minut po odpoczynku, a następnie pobierać krew. 2, powinien być w spokojnym stanie, aby pobierać krew, aby uniknąć emocji emocjonalnych. Wymagania do kontroli: 1. W celu zapewnienia dokładnego zrozumienia wyników badania lekarskiego po badaniu lekarskim, przed badaniem lekarskim należy dokładnie wypełnić formularz badania lekarskiego i każdy arkusz testowy Pismo powinno być wyraźne, zwłaszcza nazwa. 2, po zażyciu surowicy, powinieneś siedzieć nieruchomo przez 15-20 minut. Proces kontroli -, kontrola niepłodności immunologicznej nasienia Odporność na spermę obejmuje odporność humoralną przeciwko plemnikom (przeciwciała przeciwko plemnikom) i odporność na komórki plemników. (1) Wykrywanie przeciwciał przeciw plemnikom 1. Test po stosunku: weź śluz szyjny w ciągu 6 ~ 24 godzin po stosunku seksualnym i obserwuj liczbę plemników policzonych pod mikroskopem dużej mocy. W każdym polu dużej mocy znajduje się ≥ 21 niezwykle żywych czynników specyficznych dla plemników. Jeśli miano surowicy wynosi ≥1: 32, można uznać, że zawiera ono przeciwciała plemników. Inne mają aglutynację kapilarną i aglutynację płytkową, które są rzadziej stosowane. 2. Test cytotoksyczności zależny od dopełniacza i test hamowania nasienia: Przeciwciało plemnikowe wiąże się z antygenem nasienia, aktywuje układ dopełniacza i powoduje uszkodzenie przepuszczalności i integralności błony komórkowej. Jeśli jest przeciwciałem hamującym, traci aktywność i hamuje. Wartość ≥ 2 jest dodatnia; jeśli jest to przeciwciało cytotoksyczne, jest pozytywnie wybarwione niektórymi barwnikami, wymagającymi ruchliwości plemników> 70%. Metoda mikro potrzebuje tylko kilku mikrolitrów próbki. W przypadku próbek o niskim wskaźniku aktywności plemników żywe plemniki można pobrać metodą wyższą, a wskaźnik przeżycia może osiągnąć ponad 90%. Praktyka może wykrywać tylko przeciwciała działające na ogon plemnika. Silna specyficzność, niska czułość i wysoki współczynnik fałszywych ujemnych 3. Pasywna metoda hemaglutynacji: Traktowane czerwone krwinki są uczulone ekstraktem nasienia i osoczem nasiennym, a uczulone czerwone krwinki reagują z rozcieńczoną surowicą, która ma być badana na płytce do mikro reakcji, a aglutynacja czerwonych krwinek jest dodatnia. Na tę metodę nie ma wpływu żywotność plemników, liczenie, drobnoustroje lub fragmenty tkanek w plemnikach. Naukowcy uważają, że ta metoda jest specyficzna i wrażliwa, ale istnieje niewiele doniesień, a jej wiarygodność i wykonalność musi jeszcze zostać potwierdzona. 4. Test immunoenzymatyczny połączony z enzymem (ELISA) i test immunoabsorpcyjny związany z enzymem biotyna-awidyna (BA-ELISA): zastosowanie nienaruszonego plemnika lub powleczonego antygenem błony nasiennej nośnika fazy stałej, przeciwciała plemnikowego w próbce, która ma być badana i hodowana Następnie może związać się z powierzchnią antygenu. Następnie drugie przeciwciało znacznika enzymu może również wiązać się z powierzchnią, a następnie dodaje się substrat enzymu, a wynik ocenia się na podstawie zmiany koloru substratu. Można to zaobserwować gołym okiem, można również zmierzyć za pomocą czytnika mikropłytek, ten drugi obiektywny i dokładny, ogólnie więcej niż grupa ujemnej gęstości optycznej surowicy plus 2-krotność odchylenia standardowego jest dodatnia. Ponieważ nienaruszone plemniki są łatwo niespecyficznie zaadsorbowane, jeśli są pokryte rozpuszczalnym antygenem błony plemnikowej, metoda jest wrażliwa, swoista, obiektywna i ilościowa i może określić rodzaj przeciwciała i jest łatwa w obsłudze. BA-ELISA to nowa generacja testu ilościowego opracowanego na podstawie konwencjonalnego testu ELISA, który ma większą czułość i swoistość niż konwencjonalne metody. 5. Test immunobath (1mmunbeadTest, IBT): Mikrosfery poliakryloamidowe pokryte przeciwciałem przeciw ludzkiej immunoglobulinie mogą wiązać się z powierzchnią nasienia związaną przeciwciałem nasienia, a immunobead można zobaczyć z nasieniem pod mikroskopem z kontrastem fazowym lub mikroskopem elektronowym. Uruchom, jeśli odsetek nasienia w połączeniu z jednym lub więcej immunobead jest ≥lo% dodatni. Ta metoda określa miejsce, rodzaj i proporcję związanych plemników i może wykryć przeciwciała związane z powierzchnią żywych plemników. Jego czułość, swoistość i odtwarzalność są dobre, operacja jest nieco uciążliwa, a próbek wymaganych do testowania jest niewiele. Można go stosować do wykrywania próbek śladowych, takich jak śluz szyjny i płyn z jajowodów. 6. Znakowana izotopowo immunoglobulina lub białko A: Znakowana izotopowo antyludzka immunoglobulina lub sadzonka winogron Białko wiąże się z przeciwciałami nasienia związanymi z powierzchnią nasienia, a radioaktywność powierzchni mierzy się za pomocą licznika x. Jeśli jako antygen stosuje się żywe plemniki, jego specyficzność i czułość są wysokie i można określić rodzaj przeciwciała. Jednak ze względu na różne źródła żywych plemników w każdym eksperymencie wyniki są mniej powtarzalne, a sprzęt jest drogi. Operator jest podatny na uszkodzenia radioaktywne, więc ta metoda jest mniej zgłaszana. 7. Pośredni test immunofluorescencyjny: Po związaniu powierzchni z antygenem może on związać się z drugim przeciwciałem znakowanym fluoresceiną, a odsetek pozytywnych plemników wykazujących fluorescencję obserwuje się pod mikroskopem fluorescencyjnym. Ponieważ test wymaga utrwalenia metanolu, aby spowodować uszkodzenie błony, wewnętrzny antygen jest odsłonięty, a przeciwciało przeciw wewnętrznemu antygenowi jest wszechobecne u zbędnych ludzi, więc wynik fałszywie dodatni jest zbyt wysoki i nie ma klinicznej wartości praktycznej. W ostatnich latach kultura w fazie ciekłej nie została ustalona podczas eksperymentu, a wartość użytkowa tej metody została na nowo zdefiniowana. 8. Bezpośrednia kontrola drobnych interakcji jaj (1) Test wiązania lub penetracji przezroczystej spermy: Ludzkie jajo uzyskane z laparoskopii jest lepsze niż plemniki po inkubacji w określonych warunkach i czy plemniki mogą przejść przez strefę pellucida do przestrzeni wokół komórki jajowej, jeśli plemnik nie może być noszony Minąć strefę pellucida i rozważyć obecność przeciwciała hamującego. Ten test jest również zakłócany przez inne czynniki. (2) test penetracji nasienia chomika z nieprzezroczystym nasieniem (SPA): zoptymalizowane ekstrahowane żywe nasienie miesza się z jajami bez chomika i obserwuje pod mikroskopem z kontrastem fazowym. Jeżeli jajo zawiera spuchniętą główkę nasienia (z ogonem) Penetracja SPA można wykorzystać do określenia: 1 zdolności zapłodnienia nasienia przeciwciałami w osoczu nasienia; 2 znaczenia różnych przeciwciał w zapobieganiu ciąży. Na ten test może mieć wpływ wiele różnych czynników. (dwa) wykrycie odporności przeciwko komórkom plemników Istnieje niewiele badań nad komórkową odpornością na spermę, a każdy wniosek jest inny. Eksperymenty na zwierzętach i testy na ludziach wykazały, że antysensowna odporność komórkowa może być jedną z przyczyn niepłodności. Testy do wykrywania antysensownych odpowiedzi immunologicznych za pośrednictwem komórek obejmują test transformacji limfocytów, test hamowania adhezji leukocytów, test hamowania migracji leukocytów lub makrofagów, test skórny i test aktywności prokoagulacyjnej leukocytów we krwi obwodowej. Stosowane antygeny są różne, takie jak świeżo umyte plemniki, zamrożone rozmrożone nasienie, częściowo oczyszczone nasienie i tym podobne. Obecnie, ponieważ stosowane antygeny nie są jednolite, metody wykrywania są różne, liczba przypadków badawczych jest niewielka, specyficzność każdej metody jest trudna do oceny, a wyniki trudno porównywać. Po drugie, wykrycie nieprzezroczystej niepłodności immunologicznej Źródło ludzkiej zona pellucida jest ograniczone i trudne do uzyskania, ale ludzka zona pellucida i świńska zona pellucida mają krzyżową antygenowość, dlatego w rzeczywistej praktyce zamiast ludzkiej zona pellucida stosuje się ludzką zona pellucida do wykrywania przeciwciała zona pellucida w ludzkiej surowicy. Ponieważ obecność heterologicznej lektyny (głównie IgM) w niektórych normalnych surowicach ludzkich zakłóca wyniki eksperymentalne, świeże czerwone krwinki czerwone świni są wymagane do wchłonięcia badanej surowicy przed badaniem. 1. Reakcja strącania pasma szkockiego: po związaniu powierzchni zona pellucida z przeciwciałem współczynnik załamania światła zmienia się pod mikroskopem świetlnym lub mikroskopem ciemnego pola. Ta metoda jest najczęściej stosowana do identyfikacji surowicy, ma niską czułość i jest trudna do zastosowania w praktyce klinicznej. 2. Test radioimmunologiczny: Po radioznakowanym antygenie świńskim zona pellucida i surowicy, które mają być badane, kompleks antygen-przeciwciało jest izolowany i mierzona jest jego radioaktywność. Ta metoda może być ilościowa, specyficzna i wrażliwa, ale z powodu uszkodzeń radioaktywnych, a doniesień jest niewiele, ta metoda jest nadal trudna do potwierdzenia. 3. Pośredni test immunofluorescencyjny: po tym, jak ludzkie przeciwciało anty-Zona pellucida wiąże się z powierzchnią jaja świni, przeciwludzkie przeciwciało immunoglobuliny znakowane fluoresceiną wiąże się z powierzchnią zona pellucida i wykazuje oczywistą peri-fluorescencję pod mikroskopem fluorescencyjnym. Wiarygodność tego prawa zależy od innych obiektywnych metod. 4. Metoda ELISA i BALISA: nośnik w fazie stałej pokrywa się antygenem świńskiej strefy zona pellucida, dodaje się surowicę, drugie przeciwciało i badane podłoże, a płukanie przeprowadza się krok po kroku, a na końcu ocenia się wynik na podstawie zmiany koloru podłoża. Ta metoda wymaga mniejszej wielkości próbki, nie wymaga specjalnego sprzętu, jest łatwa w obsłudze, może ilościowo określać przeciwciała i określać typ przeciwciał oraz ma dobrą swoistość i czułość. Test BA-ELISA ma zalety konwencjonalnego testu ELISA, a jego czułość została znacznie poprawiona. 5. Pasywna metoda hemaglutynacji Oczyszczony świński antygen zona pellucida służy do powlekania czerwonych krwinek innych gatunków jako celu antygenowego, aw obecności przeciwciała zona pellucida aglutynuje uczulone czerwone krwinki. Istnieje niewiele raportów na temat tej metody i trudno jest ocenić jej czułość i swoistość. 6. Test wiązania lub penetracji pasm przezroczystych dla nasienia: Ta metoda może być dodatnia, jeśli istnieje przeciwciało zona pellucida lub przeciwciało anty-plemnikowe. Ponieważ na czynniki wpływają w dużej mierze czynniki środowiska hodowli, wyniki badań różnych laboratoriów są trudne do porównania. Metodę tę można zastosować w połączeniu z innymi metodami w celu wzajemnego uzupełniania się w celu zapewnienia wiarygodności wyników. Nie nadaje się dla tłumu Badanie jest mniej inwazyjne i ogólnie nie ma przeciwwskazań. Działania niepożądane i ryzyko Ten test jest mniej inwazyjny i na ogół nie powoduje poważnych komplikacji ani innych zagrożeń.