Badanie mikroskopowe płynu mózgowo-rdzeniowego

Mikroskopia płynu mózgowo-rdzeniowego stanowi podstawę do oceny różnych chorób poprzez zliczanie i klasyfikację komórek płynu mózgowo-rdzeniowego. Liczbę komórek płynu mózgowo-rdzeniowego należy przeprowadzić na czas, zwykle w ciągu 1 godziny; uszkodzenie nakłucia naczyń krwionośnych, prowadzące do krwawego płynu mózgowo-rdzeniowego, całkowita liczba komórek jest bez znaczenia, liczba białych krwinek musi zostać skorygowana przed znaczeniem; liczba komórek, jeśli znaleziono więcej czerwonych krwinek Należy opisać skurcz lub obrzęk, aby pomóc klinicyście w wykryciu nieświeżego lub świeżego krwawienia. Podstawowe informacje Klasyfikacja specjalistyczna: klasyfikacja badań sercowo-naczyniowych: mikroskopia Obowiązująca płeć: czy mężczyźni i kobiety stosują post: nie na czczo Wskazówki: Liczbę komórek płynu mózgowo-rdzeniowego należy przeprowadzić na czas, zwykle w ciągu 1 godziny; uszkodzenie nakłucia naczyń krwionośnych, prowadzące do krwawego płynu mózgowo-rdzeniowego, całkowita liczba komórek jest bez znaczenia, liczbę białych krwinek należy skorygować, aby mieć sens. Wartość normalna 1. Normalny ludzki płyn mózgowo-rdzeniowy ma niewielką ilość białych krwinek i nie ma czerwonych krwinek. Liczba komórek to osoby dorosłe (0 ~ 8) × 106 / L dzieci (0 ~ 15) × 106 / L. 2. Komórki w płynie mózgowo-rdzeniowym to głównie duże komórki jednojądrzaste i limfocyty, których stosunek wynosi około 37, a czasami komórki śródbłonka. Znaczenie kliniczne Nieprawidłowy wynik 1. Liczbę komórek płynu mózgowo-rdzeniowego można zwiększyć, a stopień wzrostu i rodzaj komórek są związane z charakterem zmiany. Może być uszkodzeniem centralnego układu nerwowego. 2, liczbę komórek płynu mózgowo-rdzeniowego można umiarkowanie zwiększyć, często w oparciu o limfocyty, w przypadku infekcji wirusowej ośrodkowego układu nerwowego, gruźlicy lub grzybiczego zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych. 3, liczba komórek płynu mózgowo-rdzeniowego znacznie wzrosła, głównie neutrofile, takie jak ropne zapalenie opon mózgowych podczas infekcji bakteryjnej. 4, gdy choroba pasożytnicza mózgu, widać więcej eozynofili. 5. Kiedy krwotoki komorowe lub podpajęczynówkowe, większość czerwonych krwinek jest widoczna w płynie mózgowo-rdzeniowym. 6, czasami można znaleźć komórki tocznia w płynie mózgowo-rdzeniowym, dla tocznia. 7, ropne zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych po skutecznym leczeniu antybiotykowym, całkowita liczba komórek gwałtownie spadła; pacjenci z gruźliczym zapaleniem opon mózgowych we wczesnym stadium obojętnych zrazikowych komórek jądrzastych, więcej limfocytów później; płyn mózgowo-rdzeniowy w płynie mózgowo-rdzeniowym pacjentów z płynem mózgowo-rdzeniowym Zmniejszona liczba w połączeniu z klinicznym wskazuje, że krwawienie ustanie lub ustanie. Konieczność sprawdzenia chorób zakaźnych ośrodkowego układu nerwowego, chorób naczyń mózgowych, chorób pasożytniczych mózgu, guzów centralnego układu nerwowego. Środki ostrożności Tabu przed inspekcją: Brak. Wymagania do badania: Liczbę komórek płynu mózgowo-rdzeniowego należy przeprowadzić na czas, zwykle w ciągu 1 godziny; uszkodzenie nakłucia naczyń krwionośnych, prowadzące do krwawego płynu mózgowo-rdzeniowego, całkowita liczba komórek jest bez znaczenia, liczba białych krwinek musi zostać skorygowana przed znaczeniem; liczba komórek, jeśli stwierdzono Wiele czerwonych krwinek ma skurcz lub obrzęk, co należy opisać, aby pomóc klinicystom zidentyfikować stare lub świeże krwawienie. Podczas liczenia komórek należy uważać na odróżnienie czerwonych krwinek lub limfocytów od Cryptococcus neoformans: 1. Cryptococcus neoformans mają „kiełkowanie” „Zjawisko nierozpuszczalne w kwasie octowym, po dodaniu 0,35 mola / l kwasu octowego, oryginalny kształt pozostaje pod mikroskopem, podczas gdy czerwone krwinki są rozpuszczane przez kwas octowy, a jądro i cytoplazma limfocytów są bardziej oczywiste. 2, upuść kroplę tuszu indyjskiego, dodaj szklankę, zobacz nowy film sklerotium kryptokokowego w dużym powiększeniu, bez zabarwienia, a czerwone krwinki lub limfocyty nie mają tego zjawiska. Po zużyciu płytki do zliczania komórek sterylizuje się ją 75% alkoholem przez 60 minut. Nie używaj fenolu do dezynfekcji, ponieważ jest on szkodliwy dla skali puli liczenia. Proces kontroli Istnieje pięć głównych inspekcji: Po pierwsze, całkowita liczba komórek 1, metoda bezpośredniego zliczania jest odpowiednia dla próbek płynu mózgowo-rdzeniowego są względnie klarowne lub lekko zmieszane. Narysuj wkraplaczem niewielką ilość zmieszanej próbki płynu mózgowo-rdzeniowego bezpośrednio do płytki zliczającej komórki, napełnij ją do komórki zliczającej i pozostaw na 2 ~ 3 minuty. Pod mikroskopem o małym powiększeniu policz cztery rogi w dwóch basenach i środkowej dużej siatce. Liczba komórek w środku wynosi 1 μl całkowitej liczby komórek w płynie mózgowo-rdzeniowym (całkowita liczba czerwonych i białych krwinek). Podczas pisania raportu jest on przeliczany na całkowitą liczbę komórek w każdym płynie mózgowo-rdzeniowym. 2. Metoda zliczania rozcieńczeń ma zastosowanie do płynu mózgowo-rdzeniowego, jeśli komórki płynu mózgowo-rdzeniowego są nadmierne, mętne lub zakrwawione. 20 μl zmieszanego płynu mózgowo-rdzeniowego można odessać za pomocą pipety kapilarnej hemoglobiny i dodać do małej probówki z rozcieńczeniem czerwonych krwinek 0,38 μl, zmieszać i upuścić do komórki zliczającej, a całkowitą liczbę komórek 4 dużych kwadratów zlicza się pod mikroskopem małej mocy, pomnożonym przez 50, to znaczy: Całkowita liczba komórek na mikrolitr płynu mózgowo-rdzeniowego jest ostatecznie zgłaszana jako całkowita liczba komórek na litr płynu mózgowo-rdzeniowego. Po drugie, liczba białych krwinek 1. Bezpośrednie zliczanie: próbki krwi, z których wszystkie są wydmuchiwane po wyssaniu pipety lodowatym kwasem octowym, tak że do ścianki probówki zostaje przymocowana niewielka ilość lodowatego kwasu octowego, a następnie ta sama pipeta pobiera niewielką ilość zmieszanej próbki płynu mózgowo-rdzeniowego. Po kilku minutach czerwone krwinki całkowicie się rozpuszczają, a następnie opadają. W puli liczenia policz powyższą metodą. 2, liczba rozcieńczeń: Jeśli zbyt wiele białych krwinek można rozcieńczyć rozcieńczeniem białych krwinek, zgodnie z powyższą metodą, należy pamiętać, że wyniki zliczania należy pomnożyć przez współczynnik rozcieńczenia. 3. Korekta krwistych próbek Próbki płynu mózgowo-rdzeniowego zmieszane z krwią zmieszano i rozcieńczono 1% lodowatym roztworem kwasu octowego i nadal liczono zgodnie z powyższą metodą. Aby wyeliminować białe krwinki spowodowane krwawieniem, do korekcji można zastosować następujący wzór. Korekty białych krwinek na mikrolitr CSF = liczba nieskorygowanych białych krwinek na mikrolitr CSF - Po trzecie, liczy się klasyfikacja białych krwinek 1. Bezpośrednia klasyfikacja: Po bezpośrednim zliczeniu białych krwinek, obserwacji mikroskopem dużej mocy, klasyfikacji według kształtu komórki i morfologii jądra, zliczono 100 białych krwinek i komórek śródbłonka, i obliczono odsetek komórek jednojądrzastych i neutrofili. , wyrażone jako procent. Jeśli całkowita liczba białych krwinek jest mniejsza niż 100, zapisywana jest bezpośrednio liczba komórek jednojądrzastych i neutrofili. Jeśli łączna liczba białych krwinek jest mniejsza niż 30, nie trzeba przeprowadzać bezpośredniej klasyfikacji i liczenia ani zmieniać klasyfikacji barwienia. 2, klasyfikacja barwienia: wirowanie próbki płynu mózgowo-rdzeniowego, pobranie rozmazu strąceniowego, wykonanie jednolitej folii, umieszczenie w inkubatorze w temperaturze pokojowej lub 37 ° C, wysuszenie, a następnie zabarwienie Wrightem, klasyfikacja mikroskopowa olejowa. Wyrażony jako procent. Po czwarte, badanie morfologii patogenu 1. W przypadku klinicznego podejrzenia bakterii o epidemiczne mózgowo-rdzeniowe zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych lub ropne zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych, należy wykonać rozmaz bakteriologiczny. Operacja wygląda następująco: (1) Próbka płynu mózgowo-rdzeniowego 2 ~ 3 ml, wirowana przy 3000 rpm przez 15 minut, usuń supernatant, nałóż osad na czystą szklaną płytkę, zrób dwa kawałki razem, rozmazuj naturalnie lub wysusz w inkubatorze w 37 ° C i nie Naprawiono płomieniem. (2) Po utrwaleniu rozmazu jeden wybarwia się błękitem metylenowym, a drugi wybarwia Grama. (3) Rozmaz barwienia metodą Grama służy do sprawdzania obecności pneumokoków, pałeczki grypy, gronkowca, Pseudomonas aeruginosa, paciorkowca, Escherichia coli itp., Barwienie błękitem metylenowym służy do sprawdzania meningokoków. W przypadku znalezienia bakterii są one zgłaszane zgodnie z ich właściwościami barwiącymi i morfologią. (4) Jeżeli podejrzewa się gruźlicze zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych, próbkę płynu mózgowo-rdzeniowego można odstawić na 24 godziny, a rozmaz ciekłej błony pobiera się i suszy w inkubatorze w 37 ° C w celu barwienia kwasoodpornego. (5) Podczas pobierania próbek należy zwrócić uwagę na zanieczyszczenie. Obserwacje mikroskopowe powinny zwracać uwagę na morfologię bakterii wewnątrz i na zewnątrz komórki, którą należy opisać przy zgłaszaniu. 2, badanie grzybicze - kontrola nowego kryptokoku (1) Weź próbkę płynu mózgowo-rdzeniowego, odwiruj przy 2000 obr / min przez 10 minut, rozmazuj osad, dodaj kroplę przefiltrowanego drobnego tuszu, wymieszaj i przykryj mikroskopem szklanym. (2) Najpierw obserwuj za pomocą mikroskopu o niskiej mocy. Jeśli okaże się, że na czarnym tle jest okrągły, przepuszczający światło mały punkt, na środku znajduje się okrągły materiał o wielkości komórki, to znaczy struktura jest uważnie obserwowana przez mikroskop o dużej mocy, a średnica nowego Cryptococcus wynosi 5-20 μm. , widoczny gruby gruby film, otoczony silnym załamaniem i porośnięte kuliste zarodniki. (3) Jeśli powyższe cechy zostaną znalezione, rozmaz atramentu można zgłosić w celu znalezienia „Cryptococcus”. Wymagana jest dalsza kultura grzybowa. Nie nadaje się dla tłumu Niewłaściwy tłum: Brak.