p-N-acetylglukosaminidas

P-N-acetylglukosaminidas (NAG) hydrolyserar ß-N-acetylglukosaminid och hydrolyserar också ß-N-acetylgalaktosamin. Enzymet är allmänt närvarande i olika vävnader, organ, kroppsvätskor och blodceller och är ett surt hydrolas i lysosomer. Mätmetoderna är kolorimetri och fluorometri. Grundläggande information Specialklassificering: urinundersökningsklassificering: biokemisk undersökning Tillämpligt kön: om män och kvinnor tillämpar fasta: fasta Analysresultat: Under normala: Sällsynta. Normalt värde: Serum-P-N-acetylglukosaminidas: 15,14-27,94 U / L Över normal: Rörsjukdomars tungmetaller (kvicksilver, bly, kadmium, etc.) och läkemedelsinducerad njurskada, ischemi, hypoxi, blodförlust, chock, etc. kan orsaka en ökning av NAG-aktiviteten. negativt: positivt: Tips: Enligt hela kroppens näringsstatus ges mjölk, ägg, frukt, sojamjölk etc. i måltiden. Normalt värde 1, p-nitrofenol kolorimetrisk metod: serum NAG21,54 ± 6,4 U / L, urin NAG är normalt fördelat, median är 9,13 U / g kreatinin, 95: e procentilen övre gränsen är 16,10U / g kreatinin. 2. Fluorescensmetod: Vuxenserum: 9,94 ± 2,77U / L Vuxenurin: 6,39 ± 3,19 U / LCre. Klinisk betydelse Bestämningen av NAG-aktivitet i blod och urin är känslig för förändringar av njurparenkymala lesioner, särskilt akut skada och aktiv sjukdom, och används främst för tidig övervakning av njurskador och observation av sjukdomar. 1, tungmetaller i njurrörssjukdomar (kvicksilver, bly, kadmium, etc.) och läkemedelsinducerad njurskada, ischemi, hypoxi, blodförlust, chock, etc. kan orsaka en ökning av NAG-aktiviteten. 2, nefrotiskt syndrom urinvägs-NAG ofta ökade avsevärt, minskade remissionstiden, snabb återhämtning vid återfall, det kan användas som en indikation för klinisk observation. Den akuta fasen av glomerulonefrit varierar kraftigt, men förändringen är mindre än den för njurrörsskada. 3, platsen för urinvägsinfektionsdiagnos för akut och kronisk pyelonefrit urinvägsstigning i urinvägar, kan skiljas från enkel cystit. Kan användas för diagnos av tidiga urinvägsinfektioner. 4, avstötning av njurtransplantation övervakning avstötning av njurtransplantation tidigt NAG kan ökas, mer känslig än urinprotein, serumkreatinin, kreatininclearance. 5, tidig diagnos av diabetisk nefropati, diabetisk nefropati, förhöjd urin NAG, är tidig diagnos av denna sjukdom bättre än urinalbumin och β2-mikroglobulin. Höga resultat kan vara sjukdomar: nefrotiskt syndrom, urinvägsinfektioner (1) p-nitrofenol kolorimetrisk metod: 1 Substratet p-nitrofenol bör renas och förformas vid 50 ° C under 24 timmar. Koncentrationen justerades till 0,04 mmol / L med 10 mmol / L NaOH, och absorptionskurvan skannades med en smal bandbreddspektrofotometer, Xmax = 401 nm, enligt IFCC-standarden, Amamax = 0,7316 till 0,7388 och Emamax = 18380 ± 90 (25 ° C). 2 Lösligheten hos substratet är liten. Vid beredning bör det justeras till en pasta med en lämplig mängd pH 4,6-buffert och tillsätt sedan bufferten gradvis till önskad mängd. 3 När mätresultaten ligger inom det ultralinjära intervallet bör provet spädas med fysiologisk saltlösning och testas igen. Resultatet multipliceras med utspädningsfaktorn. 4 Urinenzymkoncentrationen påverkas starkt av urinvolymen, urinvolymen i 24 timmar bör bibehållas. Om enzymutsöndringshastigheten beräknas med förhållandet NAG / g kreatinin, det vill säga, det påverkas inte av koncentration eller utspädning av urin, och inget behov av att lämna 24 timmar urin. (2) Fluorescensmetod: 1 Fluorescensmetod för mätning av NAG har ett hushållssats som har hög känslighet och inte påverkas av urin. 2 Det kan också användas med Shanghai No.3 Analytical Instrument Factory för att producera 930 fluorescensfotometer, excitationsfilter 360 och emission filter (400 + 450) komposit, med tillfredsställande resultat. 3 Koncentrationen av varje komponent i enzymreaktionslösningen är: 1,33 mmol / L substrat, 20 mmol / L citronsyra och 432 mmol / L Na2HPO. 4 Lösningsmedel som används i reagenserna ska vara destillerat vatten, substratet ska vara fritt från 4-MU, BSA ska vara fritt från enzymet eller upphettas vid 50 ° C under 2 timmar. 5 NAG i serum är stabilt under flera timmar till flera dagar vid 4 ° C och är stabilt under flera månader vid -20 ° C. Urinprovet var stabilt vid 4 ° C under 1 vecka och antikoagulerad plasma av citrat användes också. 6P-N-acetylglukosaminid kan katalyseras av två enzymer, en är ß-N-acetylglukosaminidas (EC 3.2.1.30) och den andra är ß-N-acetylglukosidas (EC3) .2.1.52) Endast EC3.2.1.30 eller EC3.2.1.52 kan definieras för rena enzymer. NAG, som ofta hänvisas till i den inhemska litteraturen, är strikt uppkallad efter det använda substratet, snarare än specificiteten hos enzymet för substratet. Därför benämns den nuvarande utländska litteraturen ofta P-N-acetylglukosaminidas. Inspektionsprocess (1) p-nitrofenol kolorimetrisk blandning, vid 405 nm våglängd, 1 cm optisk väg, destillerat vatten noll, läs absorbansen för varje rör och kontrollera standardkurvan med skillnaden (AU-AC). 1 Substratet p-nitrofenol bör renas och förformas vid 50 ° C under 24 timmar. Koncentrationen justerades till 0,04 mmol / L med 10 mmol / L NaOH, och absorptionskurvan skannades med en smal bandbreddspektrofotometer, Xmax = 401 nm, enligt IFCC-standarden, Amamax = 0,7316 till 0,7388 och Emamax = 18380 ± 90 (25 ° C). Molär absorptionskoefficient enligt p-nitrofenol 2 Lösligheten hos substratet är liten. Vid beredning bör det justeras till en pasta med en lämplig mängd pH 4,6-buffert och tillsätt sedan bufferten gradvis till önskad mängd. 3 När mätresultaten ligger inom det ultralinjära intervallet bör provet spädas med fysiologisk saltlösning och testas igen. Resultatet multipliceras med utspädningsfaktorn. 4 Urinenzymkoncentrationen påverkas starkt av urinvolymen, urinvolymen i 24 timmar bör bibehållas. Om enzymutsöndringshastigheten beräknas med förhållandet NAG / g kreatinin, det vill säga, det påverkas inte av koncentration eller utspädning av urin, och inget behov av att lämna 24 timmar urin. (2) Fluorescenspektrofotometri: först utspädd serum eller urin med en buffert som inte innehåller något bovint serumalbumin (BSA), Blanda, excitationsvåglängden är 364 nm, emissionens våglängd är 448 nm, för att stoppa vätske-nolljusteringen, och fluorescensintensiteten för 6 μmol / L 4-MU-röret justeras till 100, och fluorescensintensiteten hos det tomma röret och mätröret mäts. 1 Fluorescensmetod för mätning av NAG har ett hushållssats som har hög känslighet och inte påverkas av urin. 2 Det kan också användas med Shanghai No.3 Analytical Instrument Factory för att producera 930 fluorescensfotometer, excitationsfilter 360 och emission filter (400 + 450) komposit, med tillfredsställande resultat. 3 Koncentrationen av varje komponent i enzymreaktionslösningen är: 1,33 mmol / L substrat, 20 mmol / L citronsyra och 432 mmol / L Na2HPO. 4 Lösningsmedel som används i reagenserna ska vara destillerat vatten, substratet ska vara fritt från 4-MU, BSA ska vara fritt från enzymet eller upphettas vid 50 ° C under 2 timmar. 5 NAG i serum är stabilt under flera timmar till flera dagar vid 4 ° C och är stabilt under flera månader vid -20 ° C. Urinprovet var stabilt vid 4 ° C under 1 vecka och antikoagulerad plasma av citrat användes också. 6P-N-acetylglukosaminid kan katalyseras av två enzymer, en är ß-N-acetylglukosaminidas (EC 3.2.1.30) och den andra är ß-N-acetylglukosidas (EC3) .2.1.52) Endast EC3.2.1.30 eller EC3.2.1.52 kan definieras för rena enzymer. NAG, som ofta hänvisas till i den inhemska litteraturen, är strikt uppkallad efter det använda substratet, snarare än specificiteten hos enzymet för substratet. Därför benämns den nuvarande utländska litteraturen ofta P-N-acetylglukosaminidas.