เบต้าแลคทาเมส

β-lactamase หมายถึงเอนไซม์ที่ไม่ทำงานซึ่งสามารถเร่งการไฮโดรไลซิสของพันธะเอไมด์ในวงแหวนβ-lactam ในโมเลกุลชีวโมเลกุล การผลิตแบคทีเรียของβ-lactamase เป็นกลไกหลักของการต้านทานแบคทีเรียต่อยาปฏิชีวนะβ-lactam ยาปฏิชีวนะΒ-lactamase รวมถึง penicillins, cephalosporins, β-lactams ผิดปกติ ฯลฯ เป็นยาที่นิยมใช้กันมากที่สุดการศึกษาอย่างกว้างขวางที่สุดและยาที่ใช้กันอย่างแพร่หลาย ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การตรวจสอบและจำแนกโรคติดเชื้อ: การตรวจทางชีวเคมี เพศที่ใช้บังคับ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: ไม่อดอาหาร เคล็ดลับ: ตามภาวะโภชนาการของร่างกายนมไข่ผลไม้นมถั่วเหลือง ฯลฯ จะได้รับในมื้ออาหาร ค่าปกติ ชนิดและสัดส่วนของพืชในร่างกายเป็นเรื่องปกติและร่างกายมนุษย์อยู่ในสมดุล ความสำคัญทางคลินิก กลไกการต้านทานแบคทีเรีย: 1. เอนไซม์ที่ใช้งานแล้ว - ส่วนใหญ่เป็นเบต้าแลคตาเมส (มากกว่า 200 ชนิด) ซึ่งทำให้ยาปฏิชีวนะไม่ได้ผล 2 การเปลี่ยนแปลงเป้าหมาย - เป้าหมายการเปลี่ยนแปลงด้วยยาปฏิชีวนะเพื่อให้บทบาทของยาปฏิชีวนะลดลง 3, การเปลี่ยนแปลงของการซึมผ่านเยื่อหุ้มแบคทีเรีย - เพื่อให้ยาปฏิชีวนะไม่สามารถหรือไม่ค่อยใส่เชื้อแบคทีเรียที่จะไปถึงเป้าหมาย การพัฒนาความต้านทานแบคทีเรียจากสายพันธุ์ของโรงพยาบาล (เช่น Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus) ไปสู่สายพันธุ์นอกโรงพยาบาล (เช่น Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae), ต้านทานต่อยาเดี่ยว ยาดังกล่าวพัฒนาต่อการดื้อยาหลายตัวเช่น Staphylococcus aureus ที่ดื้อต่อยาเพนิซิลลินสายพันธุ์ ESBL สามารถต้านทานต่อยาปฏิชีวนะที่ใช้กันทั่วไป ผลลัพธ์ที่ผิดปกติ Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae และการติดเชื้ออื่น ๆ แต่การใช้ยาปฏิชีวนะไม่ได้ผลหรือไม่ชัดเจน, การต่อต้านเชื้อแบคทีเรีย ผู้ที่ต้องการการตรวจมีผู้ป่วยที่มีเงื่อนไขข้างต้น ข้อควรระวัง ฝูงชนที่ไม่เหมาะสม: ไม่ ต้องห้ามก่อนการตรวจ: ใส่ใจกับนิสัยการกินปกติและใส่ใจกับสุขอนามัยส่วนบุคคล ข้อกำหนดสำหรับการตรวจสอบ: ร่วมมืออย่างแข็งขันกับแพทย์ กระบวนการตรวจสอบ การตรวจจับของβ-lactamase ในตัวอย่างทางคลินิกพบว่า Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae และ Enterococcus ไม่กี่สายพันธุ์ที่ทนต่อยาเพนิซิลลินและแอมพิซิลลิน เนื่องจากสายพันธุ์ดังกล่าวก่อให้เกิดβ-lactamase, ยาปฏิชีวนะดังกล่าวจะถูกไฮโดรไลซ์ วิธีการต่อไปนี้ใช้เพื่อตรวจจับเอนไซม์: 1. วิธีการหายไปของกิจกรรมของจุลินทรีย์ วิธีนี้เป็นตัวบ่งชี้สายพันธุ์ของ Bacillus subtilis ที่ไวต่อยา penicillin มากหากสายพันธุ์ที่จะทดสอบสร้างβ-lactamase และทำลาย penicillin จะมีการเติบโตของเชื้อ Bacillus subtilis ทั้งสองข้างของเส้น วงแหวนต้านแบคทีเรีย 2 ความมุ่งมั่นของแป้งไอโอดีน Beta lactamase จะทำลายวงแหวนเบต้าแลคตัมและไอโอดีนจะรวมกับวงแหวนเบต้าแลคแทมที่เปิดเพื่อแปลงคอมเพล็กซ์แป้งสีน้ำเงิน - ไอโอดีนเป็นไม่มีสี วิธีการ: ระงับเพนิซิลลิน 6,000 μg / ml ถูกเตรียมด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต pH 6.0 โดยวางสารละลาย 0.1 ไมโครลิตรไว้ในแผ่น microdilution โดยทำการคัดเลือกและระงับโคโลนีหลายชนิดที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพิ่มสารละลายแป้ง 2 หยดเพิ่มสารละลายไอโอดีน 1 หยดผสมและสังเกตการเปลี่ยนสีทันทีเมื่อคนที่เป็นบวกเพิ่มสารละลายไอโอดีนก็จะปรากฏเป็นสีฟ้าทันทีเช่นหายไปสีน้ำเงินภายใน 10 นาทีบอกว่าแบคทีเรียผลิตด้านใน lactamase 3. การวัดกรด เพนิซิลลินถูกไฮโดรไลซ์โดยβ-endase ถึงกรดเพนิซิลลินค่าพีเอชลดลงต่ำกว่า 6.8 พร้อมตัวบ่งชี้ฟีนอลสีแดงจากสีแดง (สีม่วง) (โซลูชันสต็อก: ซิเตรทบัฟเฟอร์ pH 8.5) →เหลือง (pH 6.8 ดังต่อไปนี้) 4 ปฏิกิริยาสี cephalosporin thiophene วงแหวนβ-lactam ของ Nitrocefin เปิดโดยβ-lactamase และเมทริกซ์เปลี่ยนจากสีเหลืองเป็นสีแดง วิธีการเหลว: 10 mg ของ cefa nitrothiophene ละลายใน dimethyl sulfoxide 1 มล. แล้วเจือจาง 1:20 ด้วย 0.1 mol / L PBS (pH 7.0) และในที่สุดความเข้มข้น 500 μg / m1 และสารละลายเป็นสีเหลืองหรือสีส้มอ่อน เก็บ 4 ถึง 10 ° C เป็นเวลาหลายสัปดาห์ ใช้สารละลายขนาด 0.05 มล. ในบ่อไมโครเจือจางหรือในหลอดทดลองขนาดเล็กเลือกอาณานิคมของการทดสอบทำการแขวนลอยหนาผสมกับของเหลวเมทริกซ์ในหลุมเว้าและเปลี่ยนไนเตรโตไพโรจน์ไนไตรโรฟีนจากอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 ถึง 30 นาที สีแดงเป็นบวกถ้าสีไม่ชัดเจนการขยายสามารถสังเกตได้ 6 ชั่วโมง มีรายงานว่าผลของวิธีการตรวจจับกระดาษของβ-lactamase โดย Haemophilus influenzae และ Neisseria gonorrhoeae นั้นมีความแม่นยำ แต่สำหรับบางสายพันธุ์มีจำนวนβ-lactamase ที่แน่นอยู่กับเซลล์แบคทีเรียอย่างแน่นหนาเช่น saprophytic Staphylococcus ฯลฯ ดีกว่าด้วยวิธีของเหลว การควบคุมคุณภาพจะถูกนำไปใช้กับวิธีการตรวจจับใด ๆ ข้างต้น ไม่เหมาะกับฝูงชน โดยทั่วไปไม่มีข้อห้าม ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ โดยทั่วไปไม่มีภาวะแทรกซ้อนและอันตราย