กิจกรรมเทโลเมียร์

Telomeres เป็นโครงสร้างพิเศษที่ส่วนท้ายของโครโมโซมในยูคาริโอตและประกอบด้วยลำดับดีเอ็นเอซ้ำที่อุดมไปด้วย guanine และโปรตีนที่เกี่ยวข้อง Telomeres มีความสำคัญต่อความเสถียรของโครโมโซม การบำรุงรักษาความยาวของ telomere นั้นจะต้องมีกิจกรรมของ telomerase cytokines ภายนอกมีบทบาทสำคัญในการอยู่รอดในระยะยาวของเซลล์อมตะและเซลล์เนื้องอก Telomerase เป็นคอมเพล็กซ์ของ RNA และโปรตีนมันเป็น transcriptase reverse-based RNA ที่เฉพาะเจาะจงมันสามารถสังเคราะห์ DNA telomeric ที่ส่วนท้ายของโครโมโซมจาก RNA ของตัวเองเพื่อสร้าง telomere ในระหว่างการแบ่งเซลล์ การสูญเสียของดีเอ็นเอรักษาความยาวของ telomeres รักษาสมดุลแบบไดนามิกของโครโมโซมและทำให้เซลล์อมตะ นับตั้งแต่การก่อตั้งวิธีที่ใช้พีซีอาร์พีที่มีความไวสูงในการตรวจจับ telomerase telomerase ได้รับความสนใจอย่างกว้างขวาง พบว่า telomerase มีความสัมพันธ์ใกล้ชิดกับการเพิ่มจำนวนเซลล์ความแตกต่างและความเป็นอมตะและกลายเป็นหนึ่งในฮอตสปอตของการวิจัยขั้นพื้นฐานเกี่ยวกับเนื้องอกและอายุ ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกประเภทการตรวจมะเร็ง: การตรวจภูมิคุ้มกัน เพศที่ใช้บังคับ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: ไม่อดอาหาร ผลการวิเคราะห์: ต่ำกว่าปกติ: ค่าปกติ: ไม่ เหนือปกติ: เชิงลบ: ค่าปกติเป็นลบ บวก: (1) ผู้ป่วยมะเร็งตับมีอัตราบวก telomerase สูงกว่า (85%) (2) Telomerase มีการแสดงออกอย่างมากในเนื้อเยื่อมะเร็งส่วนใหญ่เช่น neuroblastoma (94%), มะเร็งเต้านม (93%), มะเร็งลำไส้ใหญ่ (93%), มะเร็งกระเพาะอาหาร (85%), มะเร็งต่อมลูกหมาก (84%) มะเร็งปอด (80%) เป็นต้น กิจกรรมของ Telomerase เกี่ยวข้องกับระยะทางคลินิกและการพยากรณ์โรคของเนื้องอกอย่างใกล้ชิด (3) อาจมีกิจกรรม telomerase อ่อนแอในรอยโรคที่เป็นพิษเป็นภัยไม่กี่ (เช่นตับอักเสบ, โรคตับแข็ง, meningioma อ่อนโยน ฯลฯ ) เคล็ดลับ: อาจมีกิจกรรม telomerase ที่อ่อนแอในรอยโรคที่เป็นพิษเป็นภัยไม่กี่ (เช่นตับอักเสบ, โรคตับแข็ง, meningioma อ่อนโยน ฯลฯ ) ค่าปกติ เชิงลบ ความสำคัญทางคลินิก 1 ผู้ป่วยโรคมะเร็งตับมีอัตราบวก telomerase ที่สูงขึ้น (85%) กิจกรรม telomerase ระดับ AFP บวกบวกอย่างมีนัยสำคัญสูงกว่ากิจกรรมเชิงลบ telomerase อย่างมีนัยสำคัญ กิจกรรมของ Telomerase ไม่มีความสัมพันธ์กับขนาดของเนื้องอกเกรดเนื้อเยื่อและการแพร่กระจายของเนื้องอก Telomerase อาจเป็นตัวบ่งชี้มะเร็งสำหรับการวินิจฉัยโรคมะเร็งตับ 2. Telomerase มีการแสดงออกอย่างมากในเนื้อเยื่อมะเร็งส่วนใหญ่เช่น neuroblastoma (94%), มะเร็งเต้านม (93%), มะเร็งลำไส้ใหญ่ (93%), มะเร็งกระเพาะอาหาร (85%) และมะเร็งต่อมลูกหมาก ( 84%) มะเร็งปอด (80%) เป็นต้น กิจกรรมของ Telomerase เกี่ยวข้องกับระยะทางคลินิกและการพยากรณ์โรคของเนื้องอกอย่างใกล้ชิด ดังนั้น telomerase จึงเป็นตัวบ่งชี้เนื้องอกที่จำเพาะและเป็นสากลมากที่สุด 3. อาจมีกิจกรรม telomerase ที่อ่อนแอในรอยโรคที่เป็นพิษเป็นภัยไม่กี่ (เช่นตับอักเสบ, โรคตับแข็ง, meningioma อ่อนโยน ฯลฯ ) ผลลัพธ์ในเชิงบวกอาจเป็นโรค: neuroblastoma, มะเร็งลำไส้ใหญ่, มะเร็งเต้านม, มะเร็งกระเพาะอาหาร, มะเร็งตับ, มะเร็งต่อมลูกหมาก, มะเร็งลำไส้ใหญ่, มะเร็งเซลล์ไต, มะเร็งต่อมไทรอยด์ ในปีที่ผ่านมา "telomere สมมติฐาน telomerase" ได้รับการยืนยันโดยการวิจัยมากขึ้นโดยใช้ระดับกิจกรรม telomerase เป็นตัวบ่งชี้ทางชีวภาพและการพยากรณ์โรคสำหรับการวินิจฉัยโรคมะเร็ง 1. ให้ความสนใจเพื่อป้องกันการปนเปื้อนในห้องปฏิบัติการและเท็จบวกหรือลบเท็จ 2. ให้ความสนใจในการลบสารยับยั้งโพลีเมอเรสที่อยู่ในชิ้นงานเนื้อเยื่อเพื่อลดค่าลบที่ผิดพลาด 3. เทคโนโลยีวิเคราะห์ประกายแวววาววิธี ELISA ในวิธีการผสมลูกผสมมีความน่าเชื่อถือมากกว่าวิธี TRAP กระบวนการตรวจสอบ ตรวจสอบการทำงาน: DNA ของจีโนม 0.1 ไมโครกรัมบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยโพแทสเซียมคลอไรด์ 50 มิลลิโมล / ลิตร, 10 มิลลิโมล / LTris-HCl (pH 8.4), คลอไรด์แมกนีเซียมคลอไรด์ 1.5 มิลลิโมล / ลิตร, 100 ไมโครกรัมเจลาตินแต่ละไพรเมอร์ 0.25 ไมโครโมล / ลิตร; dTIP คือ 200 μmol / L แต่ละ DNA polymerase คือ 2.5 U และปริมาตรสุดท้ายคือ 100 μl เพิ่มพาราฟินเหลวสองสามหยดเพื่อป้องกันการระเหย รอบปฏิกิริยา: 1 denaturation: 90 ° C 30 ~ 60 s; 2 ไพรเมอร์และอุณหภูมิการหลอมแม่แบบ: 40 ~ 60 ° C 30 ~ 60s; 3 ส่วนขยาย: 72 ° C 1-2 นาที หลังจากรอบซ้ำ 30 ถึง 40 ครั้งส่วนขยายไพรเมอร์ 7 ° 72 ° C สุดท้ายจะสิ้นสุดลงเป็นเวลา 7 นาที หลังจากการกำจัดพาราฟินเหลวผลิตภัณฑ์จะพร้อมสำหรับการวิเคราะห์ หลังจากอิเล็กโตรโฟรีซิสบนเจลอะกาโรสเปื้อนด้วยเอทิเดียมโบรไมด์และพบความยาวของแถบฟลูออเรสเซนต์ที่คาดการณ์ไว้โดยการฉายรังสีด้วยหลอด UV ผลิตภัณฑ์นี้ยังสามารถนำไปผสมกับ Southern blot หรือ spot blot ด้วยเครื่อง oliolonucleotide ที่มี radiolabeled หรือ non-radiolabeled สะดวกกว่าที่จะใช้เครื่องมืออัตโนมัติ PCR หลังจากเพิ่มรีเอเจนต์ปฏิกิริยาเทมเพลต DNA และโพลิเมอเรส Taq-DNA ลงในหลอดทดลองจะถูกนำไปใช้ในขั้นตอนการปรับเปลี่ยนนั่นคืออุณหภูมิเวลาที่ต้องการและการขยายของอุณหภูมิและเวลาที่เกี่ยวข้อง ปฏิกิริยาจะดำเนินการในเครื่องมืออัตโนมัติเพื่อให้ได้ผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียงที่น่าพอใจ ไม่เหมาะกับฝูงชน ผู้ที่ไม่มีการทดสอบที่เหมาะสมไม่ควรทดสอบ ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ 1. การติดเชื้อ: ให้ความสนใจกับการทำงานที่ปลอดเชื้อเมื่อเก็บเลือดหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของน้ำและส่วนอื่น ๆ ในบริเวณที่เก็บเลือดเพื่อหลีกเลี่ยงการติดเชื้อในพื้นที่ 2 เลือดออก: หลังจากเลือดจะได้รับเวลาการบีบอัดเต็มรูปแบบโดยเฉพาะอย่างยิ่ง coagulopathy มีเลือดออกมีแนวโน้มที่จะหลีกเลี่ยงการฉีดเข้าไปใต้ผิวหนังท้องถิ่นช้ำและบวม