การทดสอบความเปราะบางของเซลล์เม็ดเลือดแดง (ROFT)

การทดสอบนี้วัดความต้านทานของเซลล์เม็ดเลือดแดงต่อความเข้มข้นต่าง ๆ ของสารละลายไฮโปโทนิก ในน้ำเกลือ hypotonic น้ำแทรกซึมผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ทำให้เซลล์เม็ดเลือดแดงค่อยๆบวมและทำลาย การซึมผ่านของเซลล์เม็ดเลือดแดงขึ้นอยู่กับอัตราส่วนของพื้นที่ผิวต่อปริมาตรของเซลล์เม็ดเลือดแดง พื้นที่ผิวมีขนาดใหญ่และปริมาตรมีขนาดเล็กและความต้านทานต่อสารละลายเกลือมีขนาดใหญ่และในทางกลับกันความต้านทานจะมีขนาดเล็ก (ความเปราะจะเพิ่มขึ้น) อัตราส่วนพื้นผิว / ปริมาตรของเม็ดเลือดแดงทรงกลมลดลงซึ่งมีความไวต่อสารละลายไฮโปนิกส์เป็นพิเศษและความเปราะบางเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกการตรวจหัวใจและหลอดเลือด: การตรวจเลือด เพศที่ใช้บังคับ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: ไม่อดอาหาร คำเตือน: ต้องเตรียมน้ำยาให้ถูกต้องควรเปลี่ยนรีเอเจนต์หนึ่งครั้งหรือสองครั้งต่อเดือนความเข้มข้นของ NaCl สามารถเพิ่มขึ้นได้เนื่องจากการระเหยของน้ำ ค่าปกติ ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเริ่มต้นที่ 4.2-4.6 g / L NaCl (71.8-78.6 mmoL / L) ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกที่สมบูรณ์ 2.8-3.29g / L NaCl (47.9-54.7mmoL / L) ความสำคัญทางคลินิก 1. ผลการทดสอบของความเปราะบางเพิ่มขึ้นเมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุมปกติและมีความหมายที่จะเพิ่มขึ้น 0.04% พบใน spherocytosis ทางพันธุกรรม, โรคโลหิตจาง hemolytic autoimmune กับ spherocytosis, ยังเห็นใน polycythemia รูปไข่ทางพันธุกรรมและผู้ป่วยบางรายที่มี polycythemia ทางพันธุกรรม 2. ลดความเปราะ: พบในโรคโลหิตจางขาดธาตุเหล็ก, โรคโลหิตจางเมดิเตอร์เรเนียน, โรคโลหิตจางเซลล์โซ่, polycythemia เป้าหมาย, ฮีโมโกลบิน, ตัดม้าม, โรคตับ, โรคดีซ่านอุดกั้น ข้อควรระวัง (1) ควรมีการควบคุมตามปกติสำหรับการตรวจแต่ละครั้งและความแตกต่างระหว่างการควบคุมปกติและเรื่องคือ 0.04% ซึ่งมีนัยสำคัญทางคลินิก (2) ต้องมีการเตรียมรีเอเจนต์อย่างถูกต้องรีเอเจนต์ควรถูกแทนที่หนึ่งครั้งหรือสองครั้งต่อเดือนและความเข้มข้นของ NaCl สามารถเพิ่มขึ้นได้เนื่องจากการระเหยของน้ำ (3) ป้องกันความเสียหายของเซลล์เม็ดเลือดแดงเมื่อรับประทานเลือด (4) ควรใช้สารกันเลือดแข็งเฮปารินเพื่อกำจัดเลือดไฟบรินกรดซิตริกหรือออกซาเลตซึ่งสามารถเพิ่มความแข็งแรงของไอออนิกและส่งผลต่อแรงดันออสโมติก (5) หากผลลัพธ์ของภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเริ่มต้นและสมบูรณ์นั้นยากที่จะตัดสินได้สามารถสังเกตได้หลังจากการปั่นแยก (6) ความเปราะบางทางออสโมติกของธาลัสซีเมียลดลงและควรตรวจสอบสารละลาย NaCl ที่มีความเข้มข้นต่ำ (7) สำหรับโรคโลหิตจางรุนแรงควรกำหนดสูตร RBC เป็นความเข้มข้น 50% และดีซ่านควรล้างเซลล์เม็ดเลือดแดง (8) ไม่ควรเก็บตัวอย่างเลือดในตู้เย็นนานกว่า 6 ชั่วโมง กระบวนการตรวจสอบ 1. เตรียมสารละลาย NaCl ที่มีความเข้มข้นต่างกัน ขั้นแรกกำหนดค่า 100 มิลลิลิตรของสารละลายโซเดียมไฮโปโทนิก 1% จากนั้นไปที่หลอดสะอาดขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางเดียวกันจำนวน 12 หลอดหมายเลขบนชั้นวางหลอดทดลองเพิ่มสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 1% และน้ำกลั่นให้แต่ละหลอดตามตารางต่อไปนี้ผสมและผสมกำหนดค่า 12 สารละลาย NaCl แบบไฮโปโทนิคที่มีความเข้มข้นต่างกันจาก 0.68% ถึง 0.24% 2. สารละลาย NaCl 0.85% และสารละลายยูเรีย 1.9% ถูกแยกทิ้ง ใช้หลอดขนาดเล็กอีก 3 หลอดซึ่งมีหมายเลข 13 ~ 15 ตามลำดับซึ่งมีสารละลาย NaCl 2.5 มิลลิลิตรเท่ากับ 0.85% สารละลายยูเรีย 1.9% และน้ำกลั่น 3 ไอโอดีนฆ่าเชื้อแอลกอฮอล์ของผิวด้วยหมันแห้งหัวฉีดเฮเฮ 2 ซม. จากตรงกลางของหลอดเลือดดำศอกสนใจตัวเอง 1 มล. ซึ่งถูกเพิ่มลงในหลอดทดลองเลือดที่เหลือเพิ่ม 1 หยดต่อแต่ละหลอดทดลอง 15 ผสมเบา ๆ 4. สังเกตการเปลี่ยนแปลงของหลอด 13, 14 และ 15 หลอดที่เหลืออีก 12 หลอดได้รับอนุญาตให้ยืนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมงจากนั้นสังเกตสีและความโปร่งใสของส่วนผสม (1) ของเหลวในหลอดทดลองกลายเป็นสีแดงโปร่งใสอย่างสมบูรณ์แสดงว่าเซลล์เม็ดเลือดแดงแตกหักทั้งหมดและมันก็เป็น hemolyzed อย่างสมบูรณ์ (2) ชั้นล่างของของเหลวในหลอดทดลองเป็นสีแดงขุ่นและชั้นบนเป็นสีแดงโปร่งใสแสดงให้เห็นว่าส่วนหนึ่งของแพ็คเก็ตกาลักน้ำเสียซึ่งเรียกว่าการแตกของเม็ดเลือดแดงไม่สมบูรณ์ (3) ชั้นล่างของหลอดทดลองเป็นสีแดงขุ่นและชั้นบนไม่มีสีและโปร่งใสแสดงว่าเซลล์เม็ดเลือดแดงไม่แตก 5. บันทึกผลการทดสอบ ซึ่งรวมถึงชื่อเรื่องและช่วงของความเปราะบางของเม็ดเลือดแดงออสโมติก (เช่นความเข้มข้นของ NaCl ของความต้านทานขั้นต่ำและความเข้มข้นของ NaCl ของความต้านทานสูงสุด) และผลลัพธ์ของหลอด 13-15 6. นำหลอดที่ 6 และหลอดที่ 13 จำนวน 1 หยดลงบนสไลด์แก้วปิดฝาแก้วและสังเกตสัณฐานวิทยาของเซลล์เม็ดเลือดแดงใต้กล้องจุลทรรศน์ ไม่เหมาะกับฝูงชน ไม่มีข้อห้าม ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ ไม่มีภาวะแทรกซ้อน