ไฟบริโนเปปไทด์ A

Fibrinopepide-A (FPA) เป็นความแตกแยกของเปปไทด์โซ่ระหว่างสเปิร์ม -16 และ glycine-17 ของ fibrinogen α (A) โซ่ภายใต้การกระทำของ thrombin และประกอบด้วยกรดอะมิโน 1 ถึง 16 ไฟบรินเปปไทด์ A. มันเป็นตัวบ่งชี้ที่เชื่อถือได้ของกิจกรรมการแข็งตัวในร่างกายและการก่อตัวสุดท้ายของก้อนในไฟบริน ระดับพลาสม่า FPA ที่เพิ่มขึ้นสะท้อนให้เห็นถึงการเปิดใช้งานระบบการแข็งตัวและการสร้าง thrombin ดังนั้นจึงพบได้ในภาวะ hypercoagulable และโรคลิ่มเลือดอุดตันการบ่งชี้การละลายลิ่มเลือดระดับประถมศึกษาและมัธยมศึกษาและตัวชี้วัดการติดตามในระหว่างการรักษาด้วยยาต้านการแข็งตัวของเลือด ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกประเภทการเจริญเติบโตและการพัฒนา: การตรวจเลือด บังคับเพศ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: การอดอาหาร เคล็ดลับ: การเก็บเลือดไม่ควร> 45 วินาทีและควรทิ้ง 2 มล. ครั้งแรกเข็มฉีดยาควรเป็นซิลิเกตหรือเข็มฉีดยาพลาสติก ค่าปกติ 1.2 ± 0.8 μg / ลิตร ความสำคัญทางคลินิก ระดับพลาสม่า FPA ที่เพิ่มขึ้นสะท้อนให้เห็นถึงการเปิดใช้งานระบบการแข็งตัวและการสร้าง thrombin ดังนั้นจึงพบได้ในภาวะ hypercoagulable และโรคลิ่มเลือดอุดตันการบ่งชี้การละลายลิ่มเลือดระดับประถมศึกษาและมัธยมศึกษาและตัวชี้วัดการติดตามในระหว่างการรักษาด้วยยาต้านการแข็งตัวของเลือด ผลลัพธ์ที่สูงอาจเป็นโรค: การแข็งตัวของหลอดเลือดในเด็ก, การตั้งครรภ์ที่มีโรคลิ่มเลือดอุดตัน, การแข็งตัวของหลอดเลือดในผู้สูงอายุ (1) การเก็บเลือดควรราบรื่นและไม่ควร> 45 วินาทีและควรทิ้ง 2 มล. ครั้งแรกเข็มฉีดยาควรเป็น silicided หรือเข็มฉีดยาพลาสติก (2) ทันทีหลังจากเก็บเลือดฉีดเข้าไปในหลอดทดลองที่มีสารกันเลือดแข็งและผสมอย่างรวดเร็วในน้ำน้ำแข็งหากจะต้องได้รับการเก็บรักษาไว้จะเหมาะที่ -20 ° C หลังจากการรักษาด้วยการดูดซับเบนโทไนท์ กระบวนการตรวจสอบ (1) การเก็บตัวอย่างพลาสมา: เลือดดำ 4.5 มล. ถูกนำมาอย่างราบรื่นด้วยเข็มฉีดยาพลาสติก (2 มิลลิลิตรแรกถูกทิ้ง) และหลอดทดลองที่มีสารกันเลือดแข็ง 0.5 มล. (heparin sodium 500u และ aprotinin 5000u ทันที) Centrifuge ที่ 3000 r / นาทีเป็นเวลา 20 นาทีแยก plasma และดึง plasma ส่วนบนไปยังหลอดอื่นเพื่อการรักษาทันทีหรือเก็บไว้ที่ -20 ° C (2) การรักษาด้วยเบนโทไนท์การดูดซับของตัวอย่างพลาสมา: จุดประสงค์คือการกำจัดไฟบริน เบนโทไนต์ 40 มิลลิกรัมถูกเพิ่มลงในหลอดหมุนเหวี่ยงโพลีโพรพีลีนพลาสติกขนาด 45 มล., เพิ่มบัฟเฟอร์การดูดซับ 0.5 มล. และผสมให้เข้ากันอย่างละเอียดพลาสม่า 1 มล. ผสมเข้าด้วยกันเขย่าและผสมกับเครื่องปั่นพายุไซโคลน Centrifuge ที่ 5,000r / นาทีเป็นเวลา 15 นาทีดูดซับส่วนเหนือไปยังหลอดอื่นแล้วปฏิบัติต่อทันทีด้วยเบนโทไนท์ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น จากนั้นนำส่วนที่เกิน 1 มิลลิลิตรมาสำลักและเติมลงในหลอดทดลองที่บรรจุ 50 μlของสารละลาย 20 g / LTween 20 และผสม ตัวอย่างสุดท้ายได้รับการเจือจาง 20 ครั้ง (3) การเคลือบ FPA: 1 μg / ml ของ FPA ถูกละลายในบัฟเฟอร์การเคลือบ, เพิ่มแผ่นปฏิกิริยาสไตรีน, 200 μl / well, ต่อยอด, และค้างคืนที่ 37 ° C หลุมถูกยกเลิกในวันถัดไป จานถูกล้าง 5 ครั้งด้วยน้ำยาซักผ้า 3 นาทีในแต่ละครั้งแห้งและงดเว้น (4) มาตรฐาน FPA: ความเข้มข้นต่างกัน 6 ชนิดเช่น 25, 12.5, 6.25, 3.12, 1.56, 0.78 ng / ml แยก 0.9 aspirated เป็นชุดของหลอดทดลองขนาดเล็กและ 0.1 มล. ความเข้มข้นการทำงานของ FPA ต่อต้านมนุษย์กระต่ายถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละหลอด ตัวอย่างพลาสมาที่จะทำการทดสอบโดยการดูดซับเบนโทไนต์นั้นได้ดำเนินการตามข้างต้นและมีความเข้มข้น 1: 2, 1: 4 เท่าดังกล่าวข้างต้น แต่ละหลอดข้างต้นทำปฏิกิริยาที่ 37 ° C เป็นเวลา 3 ชั่วโมง (5) 200 μlของหลอดที่กล่าวถึงข้างต้นหลังจากการบ่มแต่ละครั้งถูกปิเปตลงในแต่ละหลุมของ FPA ที่เคลือบและจานถูกบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 2 ชั่วโมงล้าง 5 ครั้งและทำให้แห้ง (6) แต่ละหลุมถูกเพิ่มด้วย IgG ต่อต้านแพะ - กระต่าย IgG (เจือจางกับความเข้มข้นการทำงานโดยการเจือจางมาตรฐาน) 200 ไมโครลิตร / หลุมและจานถูกบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 2 ชั่วโมงล้าง 5 ครั้งและแห้ง (7) เพิ่ม 200 μlของสารละลายสารตั้งต้นที่เตรียมใหม่ให้กับแต่ละหลุมและทำปฏิกิริยาอย่างแม่นยำที่ 37 ° C เป็นเวลา 3 นาทีในที่มืดและเพิ่ม 3 mol / L H 2 SO 450 μlทันทีเพื่อยุติการเกิดปฏิกิริยา ค่า A (492 nm) ของแต่ละหลุมถูกกำหนดบนฉลากของเอนไซม์ ไม่เหมาะกับฝูงชน ฮีโมฟีเลียและกระจายการแข็งตัวของหลอดเลือด ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ ความเสี่ยงของการติดเชื้อ: หากคุณใช้เข็มที่ไม่สะอาดคุณอาจเสี่ยงต่อการติดเชื้อ