การกำหนดความเข้มข้นของโปรตีน

การกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนเป็นการกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนโดยวิธีทางเคมีหรือทางกายภาพและเป็นวิธีการสำคัญที่ใช้ในการคำนวณอัตราการฟื้นตัวของวิธีการทำให้บริสุทธิ์ วิธี biuret วิธี biuret เป็นวิธีแรกในการตรวจสอบความเข้มข้นของโปรตีนโดย colorimetry ซัลเฟอร์แอมโมเนียมไม่รบกวนการพัฒนาสี Cu2 + และพันธะเปปไทด์โปรตีนและไทโรซีนสารตกค้างที่ซับซ้อนในรูปแบบสีม่วงสีน้ำเงิน สารประกอบนี้มีค่าการดูดกลืนแสงสูงสุดที่ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตร วิธี biuret มักใช้สำหรับการหาค่าของสารละลายโปรตีนในช่วง 0.5 g / L ถึง 10 g / L ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกการตรวจหัวใจและหลอดเลือด: การตรวจเลือด บังคับเพศ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: การอดอาหาร ผลการวิเคราะห์: ต่ำกว่าปกติ: พบได้บ่อยในโรคต่าง ๆ เช่นการขาดสารอาหาร ค่าปกติ: ค่าปกติ: 60-80g / L เหนือปกติ: ที่พบบ่อยในโรคต่าง ๆ เช่นโรคอ้วน เชิงลบ: บวก: เคล็ดลับ: อย่ากินอาหารที่มันโปรตีนสูงเกินไปและหลีกเลี่ยงการดื่มหนัก ค่าปกติ ค่าปกติของร่างกายมนุษย์โดยทั่วไปคือ 60-80 กรัม / ลิตร ความสำคัญทางคลินิก ผลที่ผิดปกติ 1. วิธี Biuret: วิธี biuret เป็นวิธีแรกเพื่อตรวจสอบความเข้มข้นของโปรตีนโดย colorimetry ซัลเฟอร์แอมโมเนียมไม่ยุ่งเกี่ยวกับการพัฒนาสี Cu2 + และพันธะเปปไทด์โปรตีนและไทโรซีนตกค้างที่ซับซ้อนกลายเป็นสีม่วง คอมเพล็กซ์สีน้ำเงินซึ่งมีการดูดกลืนแสงสูงสุดที่ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตร วิธี biuret มักใช้สำหรับการหาค่าของสารละลายโปรตีนในช่วง 0.5 g / L ถึง 10 g / L 2. วิธีโลว์รีย์: Cu + ก่อตัวเป็นคอมเพล็กซ์ที่มีโปรตีนในสารละลายอัลคาไลน์และจากนั้นคอมเพล็คจะลดฟอสฟอรัสโมลิบดีนัมฟอสฟอรัส - ฟอสฟอริกกรดรีเอเจนต์ (Folin-phenol reagent) และผลที่ได้คือสีฟ้าเข้ม วิธีนี้มีความไวมากกว่าวิธี biuret และเหมาะสำหรับการหาวิธีการแก้ปัญหาโปรตีนในช่วง 20 mg / L ถึง 400 mg / L 3. วิธีการดูดซับรังสีอัลตราไวโอเลต: โปรตีนส่วนใหญ่มีการดูดซึมสูงสุดที่ความยาวคลื่น 280nm นี่เป็นเพราะการปรากฏตัวของไทโรซีนทริปโตเฟนและฟีนิลอะลานีนในโปรตีนซึ่งสามารถใช้ในการกำหนดเนื้อหาของ 0.1-0.5mg / ml สารละลายโปรตีน คนที่ต้องตรวจสอบ มีคนที่อ่อนแอและอ่อนแอง่วงนอนผิวหนังเยื่อเมือกและไม่ตั้งใจ ผลลัพธ์ต่ำอาจเป็นโรค: การ ขาดสารอาหาร, ผล กล้ามเนื้อเสื่อม อาจเป็นโรคสูง: โรคอ้วน, ข้อควรระวังโรคอ้วนง่าย ข้อห้ามก่อนการทดสอบ: อย่ากินอาหารที่มันโปรตีนสูงเกินไปวันก่อนการทดสอบเพื่อหลีกเลี่ยงการดื่มหนัก ปริมาณแอลกอฮอล์ในเลือดมีผลโดยตรงต่อผลการทดสอบ หลัง 20.00 น. ในวันก่อนการตรวจสุขภาพคุณควรอดอาหาร ข้อกำหนดสำหรับการตรวจ: เมื่อทานเลือดคุณควรผ่อนคลายจิตใจเพื่อหลีกเลี่ยงการหดตัวของหลอดเลือดที่เกิดจากความกลัวและเพิ่มความยากลำบากในการเก็บเลือด ในการวัดจำนวนเล็กน้อยของสีย้อมโปรตีนจะถูกดูดซับบนผนังของ cuvette และปริมาณของการดูดซับของคอมเพล็กซ์นั้นเล็กน้อย หลังจากการตรวจวัดสามารถล้างด้วย cuvette สีน้ำเงินเอทานอล กระบวนการตรวจสอบ ผู้เข้าร่วมการวิจัยได้ทำการเก็บเลือดและตรวจร่างกายในเวลาที่ต้องแยกซีรัม วาดเส้นโค้งมาตรฐาน: ใช้แผ่นไมโครสเตรต 96 หลุมและเพิ่มรีเอเจนต์ หลังจากเติมรีเอเจนต์แล้วดูดซับสารละลายตัวอย่าง 20 ไมโครลิตรลงในมาตรฐานของเอนไซม์ได้อย่างถูกต้องเติมรีเอเจนต์ BCA 200 ไมโครลิตรเขย่าเบา ๆ บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 30-60 นาทีอุณหภูมิเย็นถึงห้องว่างเปล่าใช้เป็นตัวควบคุมและเปรียบเทียบที่ 590 นาโนเมตร สีที่มีเนื้อหาของซีรัมอัลบูมินในซีรั่มเป็น abscissa และการดูดกลืนแสงในขณะที่กำหนดให้วาดเส้นโค้งมาตรฐาน เมื่อใช้เส้นโค้งมาตรฐานว่างเปล่าเป็นตัวควบคุมปริมาณโปรตีนของตัวอย่างนั้นพบจากเส้นโค้งมาตรฐานโดยยึดตามการดูดกลืนแสงของตัวอย่าง ไม่เหมาะกับฝูงชน ผู้ที่มีแนวโน้มตกเลือดมาก ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ 1 เลือดออกใต้ผิวหนัง: เนื่องจากเวลากดน้อยกว่า 5 นาทีหรือเทคโนโลยีการดึงเลือดไม่เพียงพอ ฯลฯ อาจทำให้เกิดเลือดออกใต้ผิวหนัง 2, ความรู้สึกไม่สบาย: เว็บไซต์เจาะอาจปรากฏอาการปวด, บวม, ความอ่อนโยน, ฮ่อใต้ผิวหนังที่มองเห็นได้ด้วยตาเปล่า 3 วิงเวียนหรือเป็นลม: ในการดึงเลือดเนื่องจาก overstress อารมณ์ความกลัวสะท้อนที่เกิดจากความตื่นเต้นของเส้นประสาทเวกัส, ความดันโลหิตลดลง ฯลฯ เกิดจากการจัดหาเลือดไม่เพียงพอไปยังสมองที่เกิดจากการเป็นลมหรือเวียนศีรษะ 4. ความเสี่ยงของการติดเชื้อ: หากคุณใช้เข็มที่ไม่สะอาดคุณอาจเสี่ยงต่อการติดเชื้อ