การทดสอบการดูดซับด้วยเอนไซม์รวม

การทดสอบเอนไซม์ที่เชื่อมโยงอิมมูโนซอร์เบนท์ (ต่อไปนี้เรียกว่า ELISA) เป็นเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในเอนไซม์อิมมูโนแอสเซย์ มันถูกใช้เพื่อตรวจจับแอนติเจน (หรือแอนติบอดี) ที่จะทดสอบซึ่งถูกเคลือบในบ่อของแผ่นโซลิดเฟส นั่นคือแอนติบอดีจะถูกระบุด้วยเอนไซม์และแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่รู้จักกันถูกดูดซับบนพื้นผิวของตัวส่งสัญญาณของแข็งและปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดีจะถูกดำเนินการบนพื้นผิวของตัวส่งสัญญาณของแข็งและส่วนที่เป็นอิสระในเฟสของเหลวจะถูกชะล้างออกไป สีจะถูกพัฒนาหลังจากวัสดุพิมพ์เพื่อตัดสินผลลัพธ์ ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกประเภทการเจริญเติบโตและการพัฒนา: การตรวจสอบทางชีวเคมี บังคับเพศ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: การอดอาหาร เคล็ดลับ: ปฏิบัติตามคำแนะนำของแพทย์เมื่อตรวจสอบ ค่าปกติ อัตราส่วนของซีรัมที่จะทดสอบกับซีรัมเชิงลบที่รู้จัก (P / N) คือ <2.1 และค่า OD ของซีรัมที่จะทดสอบคือ <0.4 ซึ่งถูกตัดสินว่าเป็นค่าลบ ความสำคัญทางคลินิก ผลลัพธ์ที่ผิดปกติ: อัตราส่วนของซีรัมที่จะทดสอบกับซีรัมเชิงลบที่รู้จัก (P / N) ≥ 2.1 และค่า OD ของซีรัมที่จะทดสอบคือ≥ 0.4 ซึ่งถือว่าเป็นบวก จำเป็นต้องตรวจสอบฝูงชน: ตรวจจับแอนติเจนและแอนติบอดี ข้อควรระวัง ข้อห้ามก่อนการตรวจสอบ: เตรียมโซลูชันบรรจุภัณฑ์ที่หลากหลายและกำหนดความเข้มข้น ข้อห้ามเมื่อตรวจสอบ: 1. ควบคุมปัจจัยที่มีผลต่อประสิทธิภาพของการติดฉลากอย่างเคร่งครัดเช่นอุณหภูมิ, เวลา, pH, เอนไซม์และปริมาณแอนติบอดี 2. เมื่อติดตั้งคอลัมน์ทำให้คอลัมน์เหมือนกันพื้นผิวทรงกระบอกไม่มีฟองอากาศหรือรอยแตก กระบวนการตรวจสอบ วิธี ELISA ที่ใช้กันทั่วไป ได้แก่ วิธีแซนด์วิชแอนติบอดีสองวิธีและวิธีทางอ้อมซึ่งเป็นวิธีแรกในการตรวจหาแอนติเจนของ macromolecular และวิธีหลังสำหรับการตรวจวัดแอนติบอดีจำเพาะ ทางอ้อม ELISA วิธีนี้ส่วนใหญ่จะใช้เพื่อตรวจหาแอนติบอดี ขั้นตอนสำหรับ ELISA ทางอ้อมมีดังนี้ (1) วัสดุ 1 น้ำยาเคลือบ, น้ำยาซักผ้า, น้ำยาถนอมความร้อน, สารตั้งต้น, และน้ำยาหยุด แอนติเจน 2DVH เคลือบเอนไซม์ต่อต้านแอนติบอดีเซรั่มอ้างอิง DVH เชิงลบและเชิงบวก เครื่องตรวจจับ ELISA 3 เครื่อง, ตัวอย่าง, โพลีสไตรีน microplate (2) ขั้นตอนวิธี 1 บวกการเคลือบแอนติเจน→ 4 ° C ค้างคืนล้างสามครั้งโยนแห้ง 2 บวกเซรั่มที่จะทดสอบ→ 37 ° C เป็นเวลา 2 ชั่วโมงล้างสามครั้งโยนแห้ง 3 เพิ่มแอนติบอดีที่มีป้ายเอนไซม์→ 37 ° C เป็นเวลา 2 ชั่วโมงล้างสามครั้งโยนให้แห้ง 4 เพิ่มโซลูชันพื้นผิว→ 37 ° C เป็นเวลา 30 นาทีเพิ่มโซลูชันหยุด 5 ค่า OD วัดโดยเครื่องตรวจจับ ELISA และคำนวณอัตราส่วน P / N 2. แซนวิชแอนติบอดีสองครั้ง ELISA วิธีนี้ส่วนใหญ่จะใช้ในการตรวจหา macromolecular antigens 1 เพิ่มการเคลือบแอนติบอดี→ 4 ° C ค้างคืนล้างสามครั้งโยนให้แห้ง 2 เพิ่มแอนติเจนที่จะทดสอบ→ 37 ° C เป็นเวลา 30 นาทีล้างสามครั้งโยนให้แห้ง 3 เพิ่มแอนติบอดีที่มีป้ายเอนไซม์→ 37 ° C เป็นเวลา 30 นาทีล้างสามครั้งโยนให้แห้ง 4 เพิ่มโซลูชันพื้นผิว→ 37 ° C เป็นเวลา 15 นาทีเพิ่มโซลูชันหยุด 5 ค่า OD ถูกวัดโดยเครื่องทดสอบ ELISA ไม่เหมาะกับฝูงชน ไม่เหมาะสำหรับฝูงชน: ไม่ ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ ไม่มีภาวะแทรกซ้อนหรืออันตรายที่เกี่ยวข้อง