beta-lactamase

Ss-lactamasen henviser til et inaktiverende enzym, der er i stand til at katalysere hydrolysen af ​​en amidbinding i en ß-lactamring i et biomolekyle. Bakteriel produktion af ß-lactamase er den vigtigste mekanisme for bakteriel resistens over for ß-lactam antibiotika. Β-lactamase-antibiotika, herunder penicilliner, cephalosporiner, atypiske ß-lactamer osv., Er de mest anvendte, de mest studerede og de mest anvendte lægemidler. Grundlæggende information Specialistklassificering: Inspektion og klassificering af infektionssygdomme: biokemisk undersøgelse Gældende køn: om mænd og kvinder anvender faste: ikke faste Tip: I henhold til ernæringstilstanden for hele kroppen gives mælk, æg, frugter, sojamælk osv. I måltidet. Normal værdi Type og andel af floraen i kroppen er normal, og den menneskelige krop er i en dynamisk balance. Klinisk betydning Mekanismen for bakteriel resistens: 1. Inaktiverede enzymer - hovedsageligt beta-laktamaser (mere end 200 typer), der gør antibiotika ineffektive. 2, målændringer - målet ændres med antibiotika, så antibiotikas rolle blev mindre. 3, ændringen af ​​bakteriel membranpermeabilitet - så antibiotika ikke eller sjældent kan komme ind i bakterierne for at nå målet. Udviklingen af ​​bakteriel resistens fra hospitalstammer (såsom Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus) til stammer uden for hospitalet (såsom Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae), modstand mod resistens mod et enkelt lægemiddel Lægemidlet udvikler sig til multimedicinresistens, såsom Staphylococcus aureus-resistens over for penicillin; ESBL-stammen er resistent over for en række almindeligt anvendte antibiotika. Unormale resultater Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae og andre infektioner, men brugen af ​​antibiotika er ikke effektiv, eller effekten er ikke indlysende, bakterier producerer medikamentresistens. De mennesker, der har behov for undersøgelse, har patienter med ovenstående tilstande. Forholdsregler Upassende skare: Nej. Forbudt før undersøgelse: Vær opmærksom på normale spisevaner og vær opmærksom på personlig hygiejne. Krav til inspektion: Samarbejde aktivt med lægen. Inspektionsproces Påvisning af ß-lactamase I kliniske prøver blev Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae og et par stammer af Enterococcus for nylig fundet at være resistente over for penicillin og ampicillin. Da ovennævnte stamme producerer ß-lactamase, hydrolyseres det førnævnte antibiotikum. Følgende metoder bruges til at detektere enzymet: 1. Mikrobiel aktivitetsforsvindemetode Denne metode er en indikatorstamme af Bacillus subtilis, der er meget følsom over for penicillin. Hvis stammen, der skal testes, producerer ß-lactamase og ødelægger penicillin, er der Bacillus subtilis-vækst på begge sider af linjen, ellers er indikatoren stadig meget stor. Antibakteriel ring. 2, stivelse-iodbestemmelse Betalaktamasen ødelægger beta-lactamringen, og joden kombineres med den åbne beta-lactamring for at omdanne det blå stivelses-jodkompleks til farveløs. METODER: En suspension af penicillin 6000 ug / ml blev fremstillet med pH 6,0 phosphatbufferopløsning 0,1 ml af opløsningen blev anbragt i en brønd i en mikrofortyndingsplade. Flere kolonier af teststammen blev valgt og suspenderet deri, rystet i 30 minutter og fik lov at henstå ved stuetemperatur i 1 time. Tilsæt 2 dråber stivelsesopløsning, tilsæt 1 dråbe jodopløsning, bland og observer øjeblikkeligt farveændringen. Når den positive person tilføjer jodopløsning, vil den straks vises blå, såsom at forsvinde blå inden for 10 minutter, hvilket antyder, at bakterierne producerer β-indre lactamase. 3. Syremåling Penicillin hydrolyseres af ß-endase til penicillinsyre, pH-værdien falder til under 6,8 med en fenolrød indikator, fra rød (lilla) farve (stamopløsning: citratbuffer pH 8,5) → gul (pH 6,8 Følgende). 4, cephalosporin-thiophen-farvereaktion Ss-lactamringen i Nitrocefin åbnes med ß-lactamase, og matrixen ændres fra gul til rød. Flydende metode: 10 mg cefa nitrothiophen blev opløst i 1 ml dimethylsulfoxid og fortyndet derefter 1:20 med 0,1 mol / L PBS (pH 7,0), og til sidst blev koncentrationen 500 ug / ml, og opløsningen var gul eller lys orange. Opbevares 4 til 10 ° C i flere uger. Tag 0,05 ml af opløsningen i brønden på mikrofortyndingspladen eller i det lille reagensglas, vælg testkolonien, lav en tyk suspension, bland med matrixvæsken i det konkave hul, og skift cephalosporin-nitrothiophen fra gul til stuetemperatur ved stuetemperatur i 10 til 30 minutter. Rød er positiv. Hvis farven ikke er indlysende, kan observationen forlænges i 6 timer. Det er rapporteret, at resultaterne af papirmetoden til påvisning af ß-lactamase af Haemophilus influenzae og Neisseria gonorrhoeae er nøjagtige, men for nogle stammer er en lille mængde ß-lactamase, der er tæt bundet til bakteriecellerne, såsom saprophytic Staphylococcus osv., Bedre ved flydende metode. Kvalitetskontrol anvendes til en af ​​ovennævnte detektionsmetoder. Ikke egnet til mængden Generelt ingen tabuer. Bivirkninger og risici Generelt ingen komplikationer og skade.