Beta-Lactamase

Die β-Lactamase bezieht sich auf ein inaktivierendes Enzym, das die Hydrolyse einer Amidbindung in einem β-Lactamring in einem Biomolekül katalysieren kann. Die bakterielle Produktion von β-Lactamase ist der Hauptmechanismus der bakteriellen Resistenz gegen β-Lactam-Antibiotika. Β-Lactamase-Antibiotika, einschließlich Penicilline, Cephalosporine, atypische β-Lactame usw., sind die am häufigsten verwendeten, am häufigsten untersuchten und am häufigsten verwendeten Arzneimittel. Grundlegende Informationen Fachklassifizierung: Inspektion und Klassifizierung von Infektionskrankheiten: biochemische Untersuchung Anwendbares Geschlecht: ob Männer und Frauen Fasten anwenden: nicht Fasten Tipps: Je nach Ernährungszustand des ganzen Körpers werden Milch, Eier, Früchte, Sojamilch usw. in die Mahlzeit gegeben. Normalwert Die Art und der Anteil der Flora im Körper sind normal und der menschliche Körper befindet sich in einem dynamischen Gleichgewicht. Klinische Bedeutung Der Mechanismus der Bakterienresistenz: 1. Inaktivierte Enzyme - hauptsächlich Beta-Lactamasen (mehr als 200 Arten), die Antibiotika unwirksam machen. 2, Zieländerungen - das Ziel ändert sich mit Antibiotika, so dass die Rolle von Antibiotika abnimmt. 3, die Veränderung der Permeabilität der Bakterienmembran - damit Antibiotika nicht oder nur selten in die Bakterien eindringen können, um das Ziel zu erreichen. Die Entwicklung einer bakteriellen Resistenz von Krankenhausstämmen (wie Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus) bis zu Stämmen außerhalb des Krankenhauses (wie Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae), Resistenz gegen ein einzelnes Arzneimittel Das Medikament entwickelt Resistenzen gegen mehrere Medikamente, wie z. B. Staphylococcus aureus-Resistenz gegen Penicillin, und der ESBL-Stamm ist resistent gegen eine Vielzahl häufig verwendeter Antibiotika. Abnormale Ergebnisse Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae und andere Infektionen, aber die Verwendung von Antibiotika ist nicht wirksam oder die Wirkung ist nicht offensichtlich, Bakterien produzieren Arzneimittelresistenz. Die untersuchungsbedürftigen Personen haben Patienten mit den oben genannten Erkrankungen. Vorsichtsmaßnahmen Unangemessene Menge: Nein. Vor der Untersuchung verboten: Achten Sie auf normale Essgewohnheiten und persönliche Hygiene. Voraussetzungen für die Inspektion: Aktiv mit dem Arzt zusammenarbeiten. Inspektionsprozess Nachweis von β-Lactamase In klinischen Proben wurde kürzlich festgestellt, dass Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae und einige Enterococcus-Stämme resistent gegen Penicillin und Ampicillin sind. Da der vorstehende Stamm β-Lactamase produziert, wird das vorgenannte Antibiotikum hydrolysiert. Die folgenden Methoden werden zum Nachweis des Enzyms verwendet: 1. Methode zum Verschwinden der mikrobiellen Aktivität Bei dieser Methode handelt es sich um einen Indikatorstamm von Bacillus subtilis, der sehr empfindlich auf Penicillin reagiert.Wenn der zu testende Stamm β-Lactamase produziert und Penicillin zerstört, kommt es zu einem Wachstum von Bacillus subtilis auf beiden Seiten der Linie, andernfalls ist der Indikator immer noch sehr groß. Antibakterieller Ring. 2, Stärke-Jod-Bestimmung Die Beta-Lactamase zerstört den Beta-Lactam-Ring und das Jod verbindet sich mit dem geöffneten Beta-Lactam-Ring, um den blauen Stärke-Jod-Komplex in farblos umzuwandeln. METHODEN: Eine Suspension von Penicillin 6000 & mgr; g / ml wurde mit einer Phosphatpufferlösung mit einem pH-Wert von 6,0 hergestellt. 0,1 ml der Lösung wurden in eine Vertiefung einer Mikroverdünnungsplatte gegeben. Mehrere Kolonien des Teststamms wurden ausgewählt und darin suspendiert, 30 min geschüttelt und 1 h bei Raumtemperatur stehen gelassen. 2 Tropfen Stärkelösung zugeben, 1 Tropfen Jodlösung zugeben, mischen und sofort die Farbveränderung beobachten.Wenn die positive Person Jodlösung zugibt, erscheint sie sofort blau, z Amidase. 3. Säuremessung Penicillin wird durch β-Endase zu Penicillinsäure hydrolysiert, der pH-Wert fällt mit Phenolrot-Indikator von roter (violetter) Farbe ab (Stammlösung: Citratpuffer pH 8,5) → gelb (pH 6,8) Das Folgende). 4, Cephalosporin-Thiophen-Farbreaktion Der β-Lactamring von Nitrocefin wird durch β-Lactamase geöffnet und die Matrix wechselt von gelb nach rot. Flüssigmethode: 10 mg Cefa-Nitrothiophen wurden in 1 ml Dimethylsulfoxid gelöst und dann 1:20 mit 0,1 mol / l PBS (pH 7,0) verdünnt, und schließlich betrug die Konzentration 500 ug / ml, und die Lösung war gelb oder blassorange. Bei 4 bis 10 ° C mehrere Wochen lagern. Nehmen Sie 0,05 ml der Lösung in die Vertiefung der Mikroverdünnungsplatte oder in das kleine Reagenzglas, wählen Sie die Kolonie des Tests aus, machen Sie eine dicke Suspension, mischen Sie mit der Matrixflüssigkeit im konkaven Loch und ändern Sie das Cephalosporin-Nitrothiophen für 10 bis 30 Minuten von gelb auf Raumtemperatur bei Raumtemperatur. Rot ist positiv. Wenn die Farbe nicht offensichtlich ist, kann die Beobachtung um 6 Stunden verlängert werden. Es wurde berichtet, dass die Ergebnisse des Papierverfahrens zum Nachweis von β-Lactamase durch Haemophilus influenzae und Neisseria gonorrhoeae genau sind, aber für einige Stämme eine kleine Menge von β-Lactamase, die fest an die Bakterienzellen gebunden ist, wie z. B. Saprophytikum Staphylococcus usw. besser durch flüssige Methode. Die Qualitätskontrolle wird auf jede der oben genannten Nachweismethoden angewendet. Nicht für die Menge geeignet Generell keine Tabus. Nebenwirkungen und Risiken Im Allgemeinen keine Komplikationen und Schäden.