Indirekter Malaria-Immunfluoreszenztest

Es gibt viele serologische Diagnosemethoden für Malaria: In diesem Abschnitt wird nur der häufig verwendete indirekte Immunfluoreszenztest vorgestellt. Zu untersuchende Personen: Personen mit offensichtlicher Erkältung, zitterndem Körper, blassem Teint, zyanotischen Lippen, trockener Haut, Reizbarkeit, Kopfschmerzen, Beschwerden, Magersucht und anderen Symptomen. Grundlegende Informationen Fachliche Einstufung: Untersuchung auf Infektionskrankheiten und Einstufung: Blutuntersuchung Anwendbares Geschlecht: ob Männer und Frauen Fasten anwenden: Fasten Analyseergebnisse: Unter dem normalen Wert: Normalwert: Nein Überdurchschnittlich: Negativ: Negativ <1:20, was darauf hinweist, dass keine Infektion mit Malaria vorliegt. Positiv: Die positive Nachweisrate der Fluoreszenzantikörpermethode ist im Allgemeinen höher als die Protozoen-Nachweisrate. Der Antikörpertiter für Patienten mit Falciparum-Malaria liegt bei 1:80 oder höher und kann als Marker für Träger oder kürzlich aufgetretene Malariainfektionen angesehen werden. Tipps: Essen Sie am Tag vor der Blutentnahme nicht zu fettige, proteinreiche Lebensmittel. Vermeiden Sie starkes Trinken. Der Alkoholgehalt im Blut wirkt sich direkt auf die Testergebnisse aus. Nach 20:00 Uhr am Tag vor der ärztlichen Untersuchung sollte 12 Stunden lang mit dem Fasten begonnen werden, um die Testergebnisse nicht zu beeinträchtigen. Normalwert Negativ <1:20. Klinische Bedeutung Die positive Nachweisrate der Fluoreszenzantikörpermethode ist im Allgemeinen höher als die Protozoen-Nachweisrate. Der Antikörpertiter für Patienten mit Falciparum-Malaria liegt bei 1:80 oder höher und kann als Marker für Träger oder kürzlich aufgetretene Malariainfektionen angesehen werden. Positive Ergebnisse können Krankheiten sein: Malaria, zerebrale Malaria, Lungenmalaria, Malaria Vor der Inspektion: 1, essen Sie nicht zu fettiges, proteinreiches Essen am Tag vor dem Blut, um starkes Trinken zu vermeiden. Der Alkoholgehalt im Blut wirkt sich direkt auf die Testergebnisse aus. 2. Ab 20 Uhr am Tag vor der ärztlichen Untersuchung sollten Sie 12 Stunden mit dem Fasten beginnen, um die Testergebnisse nicht zu beeinträchtigen. 3, sollten sich entspannen, wenn Sie Blut nehmen, um die Kontraktion der Blutgefäße zu vermeiden, die durch Furcht verursacht werden, erhöhen Sie die Schwierigkeit der Blutansammlung. Nach der Inspektion: 1. Nach der Blutabnahme ist eine lokale Kompression an der Lochblende für 3-5 Minuten erforderlich, um die Blutung zu stoppen. Hinweis: Nicht reiben, um kein subkutanes Hämatom zu verursachen. 2 sollte die Presszeit ausreichend sein. Es gibt einen Unterschied in der Gerinnungszeit für jede Person, und einige Leute brauchen etwas länger, um zu gerinnen. Wenn die Oberfläche der Haut zu bluten scheint, wird die Kompression sofort gestoppt und das Blut kann aufgrund einer unvollständigen Blutstillung in die Haut eindringen. Daher ist die Kompressionszeit länger, um die Blutung vollständig zu stoppen. Wenn die Tendenz zum Ausbluten besteht, sollte die Kompressionszeit verlängert werden. 3, nach der Blutabnahme Symptome der Ohnmacht wie: Schwindel, Schwindel, Müdigkeit, etc. sollten sofort hinlegen, eine kleine Menge Sirup trinken und dann eine körperliche Untersuchung unterziehen, nachdem die Symptome gelindert sind. 4. Bei lokaler Verstopfung nach 24 Stunden ein warmes Handtuch verwenden, um die Resorption zu fördern. Inspektionsprozess 1. Prinzip des indirekten Immunfluoreszenztests auf Malaria Der Anti-Plasmodium-Antikörper im Testserum wird mit dem Plasmodium-Antigen auf der Blutscheibe kombiniert, gefolgt vom fluoreszenzmarkierten Anti-Human-IgG-Antikörper, der auf das Human-IgG auf der Blutscheibe einwirkt und an der Antigenstelle Fluoreszenz zeigt. 2, Reagenzien (1) Der Antigen-Blutfilm ist ein dünner Blutfilm von Plasmodium cynomolgus und ein dünner Blutfilm von Plasmodium falciparum. Professionelle Forschungseinrichtungen stehen zur Verfügung. In einem Gefrierschrank mit 4 ° C oder niedriger Temperatur lagern. (2) Fluoreszenzmarkiertes Anti-Human-IgG, das im Land kommerziell erhältlich ist. 3, die Operationsmethode (1) Das Serum wurde durch ein herkömmliches Verfahren gesammelt oder ein kreisförmiger Blot wurde mit einem Röhrchen aus einem Glas (Eisen) -Röhrchen mit 1,2 cm Durchmesser auf das Filterpapier gedrückt. Blut wird aus dem Ohr oder Finger des Probanden entnommen und mit einem Kreis gefüllt. Das Blutvolumen beträgt ca. 20 μl (ca. 10 μl Serum). Nach dem Trocknen wird es in einen versiegelten Plastikbeutel mit Trockenmittel gegeben und bei 4 ° C ins Labor transportiert. Außer für ein halbes Jahr können -20 ° C 2 Jahre gelagert werden. Während des Tests wurden die getrockneten Blutstropfen in die Vertiefungen der Reaktionsplatte geschnitten, 0,2 ml (pH 7,2) 0,01 mol / l Phosphatpuffer wurden zugegeben und die Serumverdünnung entsprechend 1:20 wurde durch Einweichen über Nacht bei 4 ° C erhalten. (2) Entfernen Sie den Antigen-Blutfilm aus dem Kühlschrank und blasen Sie ihn sofort mit einem elektrischen Ventilator trocken. Teilen Sie jedes Antigenblatt mit einem Spezialstift in mehrere kleine Zellen auf. Versuchen Sie es mit 1 Probe oder 1 Titer pro Zelle und geben Sie 1 Serum pro Zelle hinzu. Tropfen. Für jede Versuchsreihe waren negative, positive Referenzserum- und PBS-Blindkontrollen erforderlich. Unmittelbar nach der Zugabe von Serum wurde das Gemisch in eine Nassbox überführt und nach 30-minütiger Inkubation bei 37 ° C langsam mit 0,01 mol / l PBS (pH 7,2) gewaschen und dann 5 bis 10 Minuten in einen PBS-Zylinder getaucht. (3) Verdünnen Sie den 1: 10 mit 0,01 mol / l PBS (pH 7,2) verdünnten Anti-Human-IgG-Fluoreszenz-Antikörper und legen Sie ihn 30 Minuten lang bei 37 ° C in die Feuchtkammer. Eine gleiche Menge gemischte Lösung oder destilliertes Wasser wurde auf Deckblätter aufgebracht und die Ergebnisse der Reaktion wurden unter einem Fluoreszenzmikroskop untersucht. (4) Interpretation der Ergebnisse: Die Fluoreszenzintensität und die Strukturklarheit von Schizont- und Trophozoitenzytoplasma werden unterschieden, keine Fluoreszenz ist (-), die Fluoreszenz ist schwach, die morphologische Struktur ist unklar (±), die Fluoreszenz ist schwach und die morphologische Struktur Es ist immer noch klar (+) und wird entsprechend der Zunahme der Fluoreszenzhelligkeit und der Strukturdefinition weiter in (2+) bis (4+) unterteilt. Im Allgemeinen wird die Fluoreszenzintensität (+) oder mehr bei einer Serumverdünnung von 1:20 als positiv beurteilt. Nicht für die Menge geeignet Wer keine Indikation zur Untersuchung hat, sollte diese Prüfung nicht durchführen. Nebenwirkungen und Risiken Im Allgemeinen keine Komplikationen und Schäden.