Ratten-Erythrozyten-Girlanden-Bildungsassay

B-Lymphozyten sind an der Antikörpersynthese beteiligt und sind Effektorzellen für humorale Immunantworten. Die Oberfläche von B-Zellen trägt Immunglobulin (SmIg), Fc-Rezeptoren und Komplementrezeptoren auf der Membranoberfläche. Es bindet stark an den Fc-Anteil des Antigen-Antikörper-Komplexes. Rote Blutzellen von Hühnern oder Schafen werden ausgewählt und mit entsprechenden Anti-Erythrozyten-Antikörpern zu EA-Komplexen sensibilisiert.Der Fc-Rezeptor von B-Zellen kann mit EA eine Girlande bilden, die als EA-Kranz bezeichnet wird. Wenn der EA-Komplex zum Komplement hinzugefügt wird und an den Komplementrezeptor von B-Zellen bindet, wird eine EAC-Rosette gebildet. Es gibt murine RBC-Rezeptoren auf der Oberfläche von B-Zellen, die an Maus-RBCs binden können, um Maus-Erythrozyten-Rosetten (M-RFC) zu bilden, die hauptsächlich an B-Zellen mit IgM-Rezeptoren binden, und M-RFCs sind meist naive B-Zellen. Dieser Test wird hauptsächlich verwendet, um die Anzahl der B-Lymphozyten zu bestimmen und den Grad der humoralen Immunität zu bestimmen. Grundlegende Informationen Facharztklassifikation: Untersuchungsklassifikation: Blutuntersuchung Anwendbares Geschlecht: ob Männer und Frauen Fasten anwenden: Fasten Analyseergebnisse: Unter dem normalen Wert: Der Prozentsatz der ME-Rosetten war jedoch ohne Agammaglobulinämie und schwere kombinierte Immunschwäche verringert oder nicht vorhanden. Normalwert: ME-Anteil im weiblichen peripheren Blut: 5% -10% Überdurchschnittlich: Der Prozentsatz der ME-Kränze im peripheren Blut von Patienten mit chronischer lymphatischer Leukämie liegt zwischen 60% und 80%. Negativ: Positiv: Tipps: Bitte entspannen Sie sich beim Überprüfen. Normalwert Ergebnisse 200 Lymphozyten wurden unter dem Mikroskop gezählt.Die Lymphozyten, die 3 oder mehr rote Mausblutkörperchen adsorbierten, waren B-Lymphozyten, und der Prozentsatz an Mauszellgirlanden (ME-Kränze) wurde berechnet. Der prozentuale Anteil der ME-Rosette im normalen peripheren Blut des Menschen beträgt 5% bis 10%. Klinische Bedeutung Der Prozentsatz der ME-Kränze im peripheren Blut von Patienten mit chronischer lymphatischer Leukämie beträgt 60% bis 80%, es gibt jedoch keine Gammaglobulinämie, schwere kombinierte Immundefekte usw., und der Prozentsatz der ME-Girlanden ist verringert oder fehlt. Geringe Ergebnisse können Krankheiten sein: X-chromosomale No-Gammaglobulinämie bei Kindern, hohe Inzidenz von sekundären Immundefekten bei Kindern kann Krankheit sein: Vorsichtsmaßnahmen bei chronischer lymphatischer Leukämie (1) Inkubationszeit: Der Prozentsatz an ME stieg mit der Inkubationszeit allmählich an: Nach 1-stündiger Inkubation betrug der ME-Prozentsatz 7,4 ± 3,1% und die Inkubation wurde nach 18 h auf 18,3 ± 3,8% erhöht. Sie fiel allmählich auf 3,4 ± 7,1%. (2) Kulturlösung: Es ist am besten geeignet, Tc199-Kulturlösung zu verwenden, und die Ergebnisse und die Wiederholbarkeit sind gut. Das Waschen und Resuspendieren von Lymphozyten und roten Blutkörperchen mit Hepes-gepuffertem RPM11640-Medium führte dazu, dass Zellen dazu neigten, sich zu aggregieren und große Zellen zu bilden, was zu unzuverlässigen Ergebnissen führte. (3) Wenn das optimale Verhältnis von roten Blutkörperchen zu Lymphozyten etwa 35: 1 beträgt, das Verhältnis> 60: 1 beträgt oder das Verhältnis <25: 1 beträgt, kann die Anzahl der ME-Kränze verringert werden. (4) Konservierung der MRBC-Kulturlösung: In Alsever-Lösung erzeugt MRBC, das 1 Woche bei 4 ° C gelagert wurde, immer noch eine stabile Anzahl von Girlanden, während MRBC, das in PBS, Kochsalzlösung oder Tc199-Kulturmedium gelagert wurde, bei verlängerter Lagerzeit die Anzahl der Kränze Nach 72-stündiger Lagerung sind allmählich nur noch kleine oder garlandenbildende Zellen zu erkennen. Inspektionsprozess (1) 1 ml der obigen Maus-Erythrozytensuspension entnehmen, 3 ml physiologische Kochsalzlösung zugeben, gut mischen, 1500 U / min, 10 Minuten zentrifugieren, insgesamt dreimal waschen und schließlich 1% -ige Maus-Erythrozytensuspension mit physiologischer Kochsalzlösung herstellen (ca. 1,4 × 10 8) Zelle / ml). (2) 1,5 ml Heparin wurden zur Antikoagulation genommen, Lymphozyten wurden durch Lymphozyten-Stratifizierung abgetrennt und die Zellkonzentration wurde mit 20% Kalbserum-Hank-Lösung auf 2 × 10 7 / ml eingestellt. (3) Nehmen Sie 0,1 ml Lymphozytensuspension, geben Sie eine gleiche Menge 1% -iger Maus-Erythrozytensuspension hinzu, mischen Sie diese und stellen Sie sie 10 Minuten lang in ein 37 ° C warmes Wasserbad mit 500 U / min. (4) 0,05 ml Überstand pipettieren, 1 Tropfen 2 g / l blaue Lösung zugeben, vorsichtig drehen, um zu mischen, 1 Tropfen der Mischung auf den Objektträger geben, das Deckglas abdecken, nachdem die Zellen gesunken sind, Mit einem Hochleistungsmikroskop prüfen. Nicht für die Menge geeignet Es gibt keine unangemessene Menge. Nebenwirkungen und Risiken Es ist eine sichere Überprüfung und ist harmlos für den Körper.