beta-lactamasa

La β-lactamasa se refiere a una enzima inactivadora capaz de catalizar la hidrólisis de un enlace amida en un anillo de β-lactama en una biomolécula. La producción bacteriana de β-lactamasa es el principal mecanismo de resistencia bacteriana a los antibióticos β-lactámicos. Los antibióticos de Β-lactamasa, que incluyen penicilinas, cefalosporinas, β-lactámicos atípicos, etc., son los fármacos más utilizados, los más estudiados y los más utilizados. Información básica Clasificación de especialistas: inspección y clasificación de enfermedades infecciosas: examen bioquímico Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican en ayunas: no en ayunas Consejos: De acuerdo con el estado nutricional de todo el cuerpo, se dan leche, huevos, frutas, leche de soya, etc. en la comida. Valor normal El tipo y la proporción de la flora en el cuerpo son normales, y el cuerpo humano está en un equilibrio dinámico. Importancia clínica El mecanismo de resistencia bacteriana: 1. Enzimas inactivadas, principalmente betalactamasas (más de 200 tipos), que hacen que los antibióticos sean ineficaces. 2, el objetivo cambia: el objetivo cambia con antibióticos, de modo que disminuye la función de los antibióticos. 3, el cambio de la permeabilidad de la membrana bacteriana, por lo que los antibióticos no pueden entrar o raramente en la bacteria para alcanzar el objetivo. El desarrollo de resistencia bacteriana de cepas hospitalarias (como Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus) a cepas extrahospitalarias (como Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae), resistencia a la resistencia a un solo medicamento El medicamento se convierte en resistencia a múltiples medicamentos, como la resistencia a Staphylococcus aureus a la penicilina; la cepa ESBL es resistente a una variedad de antibióticos de uso común. Resultados anormales Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae y otras infecciones, pero el uso de antibióticos no es efectivo o el efecto no es obvio, las bacterias producen resistencia a los medicamentos. Las personas que necesitan un examen tienen pacientes con las condiciones anteriores. Precauciones Muchedumbre inapropiada: No. Prohibido antes del examen: Preste atención a los hábitos alimenticios normales y preste atención a la higiene personal. Requisitos para la inspección: cooperar activamente con el médico. Proceso de inspección Detección de β-lactamasa En muestras clínicas, recientemente se descubrió que Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae y algunas cepas de Enterococcus son resistentes a la penicilina y la ampicilina. Dado que la cepa anterior produce β-lactamasa, el antibiótico mencionado anteriormente se hidroliza. Los siguientes métodos se utilizan para detectar la enzima: 1. Método de desaparición de la actividad microbiana Este método es una cepa indicadora de Bacillus subtilis que es altamente sensible a la penicilina.Si la cepa a analizar produce β-lactamasa y destruye la penicilina, hay un crecimiento de Bacillus subtilis en ambos lados de la línea; de lo contrario, el indicador sigue siendo muy grande. Anillo antibacteriano. 2, determinación de almidón-yodo La betalactamasa destruye el anillo betalactámico, y el yodo se combina con el anillo betalactámico abierto para convertir el complejo azul almidón-yodo en incoloro. MÉTODOS: Se preparó una suspensión de penicilina 6000 μg / ml con una solución tampón de fosfato de pH 6.0.1.1 ml de la solución se colocó en un pocillo de una placa de microdilución. Agregue 2 gotas de solución de almidón, agregue 1 gota de solución de yodo, mezcle y observe el cambio de color inmediatamente. Cuando la persona positiva agrega solución de yodo, aparecerá azul inmediatamente, como desaparecer en 10 minutos, lo que sugiere que la bacteria produce β-interior Amidasa 3. Medida ácida La penicilina se hidroliza mediante β-endasa a ácido penicilínico, el valor del pH cae por debajo de 6,8, con indicador rojo fenol, de color rojo (púrpura) (solución madre: tampón citrato pH 8,5) → amarillo (pH 6,8 Lo siguiente). 4, reacción de color de cefalosporina tiofeno El anillo de β-lactama de nitrocefina se abre mediante β-lactamasa y la matriz cambia de amarillo a rojo. Método líquido: se disolvieron 10 mg de cefa nitrotiofeno en 1 ml de dimetilsulfóxido y luego se diluyeron 1:20 con 0.1 mol / L de PBS (pH 7.0), y finalmente la concentración fue de 500 μg / m1, y la solución fue amarilla o naranja pálida. Almacenar de 4 a 10 ° C durante varias semanas. Tome 0,05 ml de la solución en el pocillo de la placa de microdilución o en el tubo de ensayo pequeño, elija la colonia de la prueba, haga una suspensión espesa, mezcle con el líquido de la matriz en el orificio cóncavo y cambie la cefalosporina nitrotiofeno de amarillo a temperatura ambiente a temperatura ambiente durante 10 a 30 minutos. El rojo es positivo. Si el color no es obvio, la observación puede extenderse por 6 horas. Se ha informado que los resultados del método en papel para la detección de β-lactamasa por Haemophilus influenzae y Neisseria gonorrhoeae son precisos, pero para algunas cepas, una pequeña cantidad de β-lactamasa, que está fuertemente unida a las células bacterianas, como el saprofito Staphylococcus, etc., mejor por método líquido. El control de calidad se aplica a cualquiera de los métodos de detección anteriores. No apto para la multitud. Generalmente no hay tabúes. Reacciones adversas y riesgos En general no hay complicaciones y daños.