gonorrea
Introducción
Introducción a la gonorrea. La gonorrea es una infección purulenta del sistema genitourinario causada por Neisseria gonorrhoeae (conocida como Neisseria gonorrhoeae). También puede invadir los ojos, la faringe, el recto y la pelvis, así como infecciones diseminadas. Es una de las enfermedades de transmisión sexual más comunes. . La gonorrea se transmite a través de las relaciones sexuales, y una pequeña cantidad también se puede transmitir a través de los contaminantes de pus del paciente, que se pueden transmitir al bebé a través del canal de parto. Conocimiento basico La proporción de enfermedad: 0.012% Personas susceptibles: ocurren principalmente en hombres y mujeres jóvenes. Modo de transmisión: contacto de transmisión sexual. Complicaciones: prostatitis, vesiculitis seminal, epididimitis, uretritis, estenosis uretral, enfermedad inflamatoria pélvica, absceso pélvico, dolor abdominal
Patógeno
Causa de la gonorrea
Morfología y tinción (25%):
Las Neisseria gonorrhoeae son ovales o con forma de frijol. La longitud de la bacteria es de 0.6-0.8 m y el ancho es de aproximadamente 0.5 m. A menudo están dispuestas en pares, y las caras adyacentes son planas o ligeramente cóncavas, como dos frijoles emparejados, sin flagelos, sin esporas. En el cuerpo de infección aguda, su morfología es más típica, principalmente en el citoplasma, en la fase crónica está fuera de la célula, la tinción de Gram gonocócica es negativa, cuando se tiñe con azul de metileno alcalino, las bacterias son azules, se tiñen con Pappehheim Saathof En ese momento, las celdas son rojas y el fondo es azul cielo, lo cual es muy claro. Neisseria gonorrhoeae tiene cinco formas diferentes de colonias en medio artificial, a saber, T1, T2, T3, T4, T5, de las cuales T1 y T2 son virulencia, T3 y T4 son cabellos estériles y no pueden infectar a los humanos.
Estructura celular (20%):
La patogenicidad de Neisseria gonorrhoeae está estrechamente relacionada con la estructura exterior de las células. La estructura externa de Neisseria gonorrhoeae es la membrana externa. Los componentes principales de la membrana externa son proteínas de membrana, lipopolisacárido y pili, y las proteínas de membrana pueden adherirse a la mucosa humana. A través de la fagocitosis celular en células humanas, la multiplicación en las células, lo que conduce a la desintegración celular, la propagación del gonococo a la submucosa para causar infección, los pili tienden a adherirse a la superficie de la cavidad uterina y las células epiteliales orales, patógenas e infecciosas.
Resistencia (25%):
Neisseria gonorrhoeae es más delicada, tiene más miedo a la sequedad, es adecuada para el crecimiento bajo humedad, temperatura de 35 ~ 36 ° C, que contiene 2.5% ~ 5.0% de dióxido de carbono, el pH óptimo para el crecimiento es 7.0 ~ 7.5, los factores fisicoquímicos de Neisseria gonorrhoeae La resistencia es bastante pobre. Morirá en 1 a 2 h en un ambiente completamente seco. Sin embargo, si está adherida a la ropa interior y a la ropa de cama, puede sobrevivir de 18 a 24 horas. Puede sobrevivir durante varios días con pus espeso u objetos húmedos. 50 ° C solo puede sobrevivir durante 5 minutos, Neisseria gonorrhoeae es muy débil contra los fungicidas mucobacterianos de uso común, es especialmente sensible a las sales de plata solubles, la solución de nitrato de plata 1: 4000 puede hacer que muera en 7 minutos, por lo que Neisseria gonorrhoeae en pus 2 minutos Dentro de la muerte, la solución de fenol (ácido carbónico) al 1% puede matarlo en 3 minutos Además de la cepa resistente, Neisseria gonorrhoeae es sensible a los antibióticos, pero la concentración inhibitoria mínima de antibióticos se mejora gradualmente.
El patógeno es Neisseria gonorrhoeae, también conocido como gonococo, denominado Neisseria gonorrhoeae, perteneciente a la familia Neisseria, Neisseria.
1. En 1879, Neisser aisló la gonorrea de 35 secreciones de uretritis aguda, vaginitis y conjuntivitis aguda neonatal, y en 1885, Bumm se usó en suero de coagulación humano, bovino u ovino. El cultivo de Neisseria gonorrhoeae fue exitoso y se pudieron producir los mismos síntomas al inocular la tensión en la uretra de personas sanas. En este punto, se ha establecido la conclusión de que Neisseria gonorrhoeae es el patógeno de la gonorrea.
2. Las características de cultivo y bioquímicas crecen bien en un medio que contiene proteínas animales como sangre, suero, yema de huevo, ascitis, etc. La temperatura adecuada para el cultivo es de 35-36 ° C, el pH adecuado es de 7,5 y debe cultivarse en un entorno de dióxido de carbono al 5%. .
En la uretra humana, la glucosa puede ser fermentada, pero la fructosa no puede ser fermentada, por lo tanto, esta característica puede usarse como prueba de fermentación de glucosa para identificar con meningococo, que no produce una matriz de esputo y sulfuro de hidrógeno. La producción de oxidasas tiene cierta importancia en la identificación temprana.
3. Clasificación de nutrientes Según la base nutricional de aminoácidos y ácidos nucleicos requerida para el cultivo de gonococos, la Neisseria gonorrhoeae se puede dividir en 35 tipos de nutrientes, entre los cuales Arg, Hyx, Ura tipo Neisseria gonorrhoeae puede causar gonorrea asintomática y gonorrea diseminada. Resistente al suero, pero sensible a la penicilina y otras drogas.
Patogenia
(1) Afinidad al epitelio: Neisseria gonorrhoeae tiene una afinidad especial por el epitelio columnar y el epitelio de transición. La uretra masculina y femenina, el cuello uterino femenino cubre el epitelio columnar y el epitelio de transición, por lo que es susceptible a la invasión gonocócica, mientras que el escafoides vagina y la vagina masculina El epitelio escamoso estratificado está cubierto con una fuerte resistencia, generalmente no invadida, o la inflamación es muy leve, por lo que la vaginitis gonocócica es rara en mujeres adultas. Debido a que la mucosa vaginal es epitelio columnar, la niña es susceptible a la infección y la piel no es fácilmente gonocócica. Infección, casos raros de infección primaria de la piel por gonococos, los humanos no tienen inmunidad innata a las bacterias gonocócicas, la reinfección puede ocurrir después de la recuperación.
(2) Adhesión: el receptor específico en los pilos gonocócicos puede unirse a la parte correspondiente de la célula mucosa; la proteína de la membrana externa II puede mediar el proceso de adhesión; también puede liberar la enzima de descomposición de IgAl para resistir el rechazo de la célula, por lo tanto, Neisseria gonorrhoeae y las células epiteliales se adhieren rápidamente entre sí, y el pH en el microambiente, el puente iónico, la estructura hidrófoba y las hormonas sexuales también pueden promover el proceso de adhesión.
(3) Invasión e infección: Neisseria gonorrhoeae se adsorbe en las microvellosidades de las células epiteliales, y la proteína de la membrana externa I se transfiere a la membrana celular, y luego Neisseria gonorrhoeae se fagocita en las células, y la Neisseria gonorrhoeae puede adsorberse rápidamente en el esperma, que puede adsorberse rápidamente en el esperma, que puede adsorberse rápidamente en el esperma, que puede adsorberse rápidamente en el esperma. Ascendiendo al canal cervical, el moco del cuello uterino puede prevenir temporalmente Neisseria gonorrhoeae a la cavidad uterina, y en las células epiteliales columnares del cuello uterino, causará la enfermedad. Una vez que las células gonocócicas invaden las células, proliferarán y dañarán las células epiteliales. Cocos hacia el espacio submucoso, causando infección de la submucosa.
(4) Formación de lesiones: Neisseria gonorrhoeae invade la capa submucosa y continúa proliferando. Se multiplicará en la primera generación en 36 horas. Mediante la acción sinérgica del lipopolisacárido de endotoxina, el complemento y la IgM, formará una reacción inflamatoria, causando enrojecimiento e hinchazón de la mucosa, y al mismo tiempo, debido a los glóbulos blancos. Agregación y muerte, necrosis y desprendimiento de células epiteliales, apareció pus, y las lesiones fueron más graves en las glándulas y aberturas de criptas.
(5) propagación: la inflamación causada por una infección gonocócica puede propagarse a lo largo del tracto urinario, la propagación del tracto genital, en los hombres puede extenderse a la próstata, las vesículas seminales, el conducto deferente y el epidídimo, en las mujeres puede extenderse al útero, las trompas de Falopio y la pelvis, grave Neisseria gonorrhoeae puede ingresar al torrente sanguíneo y extenderse a varios tejidos y órganos en todo el cuerpo, lo que lleva a una infección diseminada.
Prevención
Prevención de gonorrea
La prevención de la gonorrea también debe tenerse en cuenta que los pacientes con gonorrea deben tener prohibido dormir con niños, especialmente niñas, baños o baños públicos, toallas de baño, etc. En áreas con alta prevalencia, todos los recién nacidos deben ser tratados con solución de nitrato de plata u otros antibióticos efectivos. Gotas para los ojos
1. Promover el conocimiento de las enfermedades de transmisión sexual, promover la moral noble y prohibir la prostitución.
2. Use un condón para reducir la incidencia de infección gonocócica.
3. El uso profiláctico de antibióticos puede reducir el riesgo de infección. Puede tomar norfloxacina o amoxicilina antes y después de las relaciones sexuales, lo que puede prevenir eficazmente las infecciones de transmisión sexual.
4. Las parejas sexuales son tratadas al mismo tiempo.
5. Los pacientes prestan atención a la higiene personal y al aislamiento, no a la cama con la familia, los niños, especialmente las niñas y el baño.
6. Implemente un sistema de solución de nitrato de plata neonatal u otras gotas de antibióticos para prevenir la oftalmia gonocócica.
Complicación
Complicaciones de la gonorrea Complicaciones Prostatitis Vesiculitis seminal Epididimitis Uretritis Estenosis uretral Enfermedad inflamatoria pélvica Absceso pélvico Dolor abdominal
Complicaciones de la gonorrea masculina
1, gonorrea combinada con síntomas de prostatitis: 1 día o medio día antes del inicio de la prostatitis aguda a menudo detienen la reducción de pus o pus, los pacientes tienen fiebre alta, micción frecuente y dolor, el examen rectal mostró agrandamiento de la próstata, sensibilidad, orina Turbiedad líquida, si el tratamiento no es oportuno, la próstata puede formar abscesos, los pacientes con prostatitis crónica generalmente no tienen síntomas obvios, la primera micción después de despertarse, la abertura de la uretra tiene un fenómeno de sellado, se libera una pequeña cantidad de secreciones blancas cuando se aprieta el pene, secreciones El examen puede revelar células epiteliales, algunas células de pus y gonococo.
2, gonorrea combinada con síntomas de vesiculitis seminal: fiebre aguda, micción frecuente, disuria, turbidez terminal de la orina y sangre, el examen rectal puede tocar la vesícula seminal inflamada y sensibilidad severa, síntomas crónicos, sin examen rectal Muestra que la vesícula seminal es dura y fibrótica.
3, gonorrea con síntomas de epididimitis: generalmente combinada con uretritis aguda, fiebre unilateral, en su mayoría baja, hinchazón y sensibilidad epididimaria, la ingle ipsilateral y la parte inferior del abdomen tienen dolor reflejo, la palpación muestra inflamación epididimaria, hay Sensibilidad intensa, turbidez urinaria.
4, la gonorrea masculina se puede combinar con estenosis uretral: la gonorrea repetida puede causar estenosis uretral, un pequeño número de conductos deferentes o incluso infarto, y luego quiste de semen secundario e infertilidad.
Complicaciones de la gonorrea femenina
La gonorrea femenina y los síntomas de la enfermedad inflamatoria pélvica gonocócica, que incluyen salpingitis aguda, endometritis, absceso ovárico secundario de las trompas de Falopio y absceso pélvico causado por ruptura, peritonitis, etc., debido al tratamiento, maltrato, pacientes con gonorrea femenina, extrema Es fácil de desarrollar desde una infección genitourinaria hasta infecciones pélvicas y accesorias, causando graves consecuencias como infertilidad, dolor abdominal e incluso potencialmente mortales.
Síntoma
Síntomas de gonorrea Síntomas comunes Falta de dolor de espalda, moco blanco, orina, náuseas, libido, dolor intenso, inflamación, pérdida de apetito, picazón anal
Las manifestaciones clínicas de la infección gonocócica dependen del grado de infección, la sensibilidad del organismo, la virulencia de la bacteria, la ubicación de la infección y la duración de la infección. Al mismo tiempo, está relacionado con la salud del cuerpo, si la vida sexual es excesiva y el alcoholismo. Según las manifestaciones clínicas, la gonorrea se puede dividir en sin gonorrea y gonorrea comórbida; gonorrea asintomática y sintomática; gonorrea diseminada y gonorrea aguda y crónica.
Primero, no hay complicación gonorrea
(a) masculino sin complicaciones gonorrea
Uretritis gonocócica aguda (gonorrea aguda): el período de incubación es de 1-14 días, a menudo de 2-5 días. Desde el principio, uretritis aguda, enrojecimiento, picazón y hormigueo leve de la uretra, seguido de un fino flujo de moco, que causa molestias al orinar.Después de aproximadamente 2 días, la secreción se volvió pegajosa, la uretra se desbordó y el pus fue profundo. Amarillo o amarillo verdoso, acompañado de síntomas aumentados de molestias en el tracto urinario, enrojecimiento e hinchazón desarrollados en todo el glande del pene y parte de la uretra, micción frecuente, urgencia, disuria, dificultad para orinar, movimientos inconvenientes y frecuentes erecciones del pene por la noche. Puede haber inflamación de los ganglios linfáticos inguinales, enrojecimiento y dolor, y también puede ser purulento. La primera semana de síntomas agudos es la más grave. Si no se trata, los síntomas disminuyen o desaparecen gradualmente después de aproximadamente un mes. Dos semanas después del inicio de la uretritis anterior aguda, aproximadamente el 50-70% de los pacientes tienen invasión gonocócica de la uretra posterior, que se caracteriza por dificultad urinaria, micción frecuente y retención urinaria aguda. La característica de la disuria es que el dolor o el dolor se exacerban al final de la micción y es similar a la acupuntura. A veces hay dolor perineal y puede no haber hematuria. Después de 1-2 semanas, los síntomas desaparecieron gradualmente. Los síntomas sistémicos son generalmente leves, algunos pueden tener fiebre de hasta 38 ° C, malestar general, pérdida de apetito, etc.
Uretritis gonocócica crónica (gonorrea crónica): los síntomas que duran más de 2 meses se denominan uretritis gonocócica crónica. Debido a que el tratamiento no es completo, Neisseria gonorrhoeae puede ocultarse en el cuerpo uretral, las glándulas parauretrales y las criptas uretrales para hacer que el curso de la enfermedad sea crónico. Si la constitución del paciente es débil, padece anemia, tuberculosis, la afección comienza con un proceso crónico, principalmente para la infección combinada de uretra anterior y posterior, buena invasión del bulbo uretral, membrana y próstata. Las manifestaciones clínicas de la uretra a menudo tienen sensación de picazón, ardor u hormigueo leve, flujo fino de orina, debilidad al orinar, goteos. La mayoría de los pacientes tienen una pequeña cantidad de sello seroso de esputo en el tracto urinario a primera hora de la mañana. Si se aprietan las raíces genitales o del pene, el moco fino se desborda. La orina es básicamente clara, pero hay seda.
(2) Mujeres sin complicación gonorrea
La parte principal de la infección gonocócica primaria femenina es el cuello uterino. Neisseria gonorrhoeae puede adherirse al epitelio escamoso estratificado. El sitio de infección de Neisseria gonorrhoeae se observa en la unión del epitelio escamoso-columnar del cuello uterino. Los pacientes con cervicitis por gonorrea a menudo no tienen síntomas en una etapa temprana, por lo que el período de incubación es difícil de determinar. Congestión cervical, sensibilidad, aumento de las secreciones purulentas, a menudo picazón genital y sensación de ardor, ocasionalmente dolor abdominal inferior y dolor lumbar. Estos síntomas atípicos hacen que los pacientes a menudo no vayan a la clínica, por lo que se convierten en la principal fuente de infección; la uretritis gonocócica a menudo ocurre 2-5 días después de la relación sexual, congestión uretral, sensibilidad y secreciones purulentas, leves Micción frecuente, urgencia, disuria, sensación de ardor al orinar, secreción purulenta en la uretra; inflamación de la glándula vestibular gonocócica a menudo unilateral, enrojecimiento e hinchazón en la abertura de la glándula, dolor intenso, formación de abscesos graves. Hay fiebre y otros síntomas sistémicos; la vaginitis gonocócica es menos común, los síntomas de los ancianos son leves, algunos pacientes tienen hinchazón abdominal, dolor de espalda, flujo vaginal, algunos pacientes tienen dolor abdominal inferior y menorragia; mujeres vulva gonocócica Vaginitis, que se manifiesta como inflamación vulvar y vaginal. Hay más secreciones purulentas vaginales, a veces secreciones amarillas y verdes en la vagina y la uretra, micción dolorosa y enrojecimiento en la vulva. Las secreciones pueden fluir hacia el ano, causando irritación. En casos severos, puede infectar el recto y causar proctitis gonocócica.
Segundo, hay complicaciones de la gonorrea.
(a) Los hombres tienen gonorrea comórbida:
La uretritis por gonorrea tiene varias comorbilidades, principalmente prostatitis, vesiculitis seminal, epididimitis.
1. Prostatitis: la prostatitis aguda es causada por el tubo de descarga y la glándula de Neisseria gonorrhoeae que ingresa a la próstata, con fiebre, escalofríos, dolor perineal e infecciones del tracto urinario acompañadas de disuria. La próstata está inflamada y sensible cuando se examina. Sin embargo, Neisseria gonorrhoeae no es una causa común de prostatitis aguda. La próstata causada por Neisseria gonorrhoeae se caracteriza principalmente por lesiones crónicas. Los síntomas son leves, hay molestias perineales, dolor en el pene, hay un fenómeno de "boca" en la abertura uretral de la mañana y se observa la linfa en la orina. El líquido de masaje de próstata tiene pus y lecitina. , frotis o cultivo para encontrar gonococos, el examen anal puede tocar pequeños nódulos en la próstata, y hay molestias o dolor, el drenaje de pus cerca del tubo de drenaje para formar una contracción de la cicatriz afecta la eyaculación, lo que resulta en infertilidad.
2. Epididimitis: generalmente ocurre después de la uretritis aguda, principalmente en un lado. Hay fiebre baja, dolor de hinchazón del epidídimo, la ingle ipsolateral y la parte inferior del abdomen tienen dolor reflejo, los límites iniciales y testiculares son claros, gradualmente poco claros, sensibilidad testicular, hinchazón, sensibilidad severa. La orina a menudo está turbia. Puede haber vesiculitis prostática y seminal al mismo tiempo.
3. Vesiculitis seminal: fiebre, micción frecuente, urgencia, disuria, sin turbidez urinaria y sangre. El examen rectal puede tocar la vesícula seminal inflamada y tener sensibilidad severa. La vesiculitis seminal crónica generalmente no presenta síntomas. El examen rectal muestra que la vesícula seminal es dura y fibrótica.
4. Inflamación de la glándula uretral: ocurre en el perineo o alrededor, hay nódulos del tamaño de los dedos, dolor, supuración aguda y ulceración, compresión de la uretra y disuria, pueden tener síntomas sistémicos como fiebre, progreso lento.
5. Estenosis uretral: los autores repetidos pueden causar estenosis uretral, pueden producirse un pequeño número de conductos deferentes u obstrucción, disuria, adelgazamiento del tracto urinario y retención urinaria severa. Vaso deferente secundario, quistes de vesículas seminales e infertilidad.
(2) Las mujeres tienen gonorrea comórbida
La principal complicación de la gonorrea femenina es la inflamación de la caja gonocócica, como salpingitis aguda, endometritis, absceso ovárico secundario de las trompas de Falopio y absceso pélvico causado por ruptura, peritonitis. Inicio repentino después de la menstruación, fiebre alta, escalofríos, dolor de cabeza, náuseas, vómitos, dolor abdominal bajo, aumento de leucorrea purulenta. Ambos lados del accesorio están engrosados y tiernos.
Tercero, otras partes de la gonorrea:
1. Conjuntivitis por gonorrea: los recién nacidos aparecen más de 2-3 días después del nacimiento, principalmente bilaterales, hinchazón de los párpados, secreciones purulentas, adultos en su mayoría autoinoculados, a menudo unilaterales, que muestran el mismo recién nacido. Debido al desbordamiento de pus, si el "ojo de pez" se retrasa, la córnea está húmeda y la córnea está perforada. Llevar a la ceguera.
2. Faringitis gonocócica: se observa principalmente en el sexo oral, los llamados homosexuales o heterosexuales occidentales "boca" son más comunes, se manifiestan como faringitis aguda o amigdalitis aguda, fiebre ocasional y linfadenopatía cervical. Hay síntomas como molestias de garganta seca, dolor de garganta, dolor de garganta.
3. Neisseria gonorrea: se observa principalmente en la homosexualidad masculina. Las mujeres son causadas principalmente por infecciones vaginales. La mesa es urgente y pesada, hay pus y sangre, congestión de la mucosa del canal anal, secreción purulenta, cultivo gonocócico positivo.
Cuarto, infección gonocócica diseminada
La infección gonocócica diseminada se debe a la propagación de bacterias gonocócicas a través del torrente sanguíneo a todo el cuerpo, lo que resulta en una infección sistémica más grave. La tasa de incidencia es de aproximadamente el 1% de los pacientes con gonorrea. La mayoría de las cepas que causan infección gonocócica diseminada son AHU-nutritivas. La cepa tiene resistencia estable al suero humano normal. Además, el suero humano normal tiene anticuerpos IgM contra el lipopolisacárido gonocócico. Con la ayuda del complemento, es grande. La mayoría de los gonococos tienen un efecto bactericida, y los pacientes que carecen de componentes del complemento C5, C6, C7 y C8 son propensos a la sepsis gonocócica o meningitis gonocócica.
(1) sepsis gonocócica: el paciente comienza a tener fiebre, la temperatura corporal puede ser de hasta 40 ° C, pero generalmente entre 38 ° C y 40 ° C, los escalofríos no son comunes, algunos pacientes tienen pápulas cutáneas, equimosis, pústulas, hemorrágicas O daño necrotizante de la piel, algunas lesiones cutáneas tienen síntomas de dolor. En las lesiones, la inmunotinción fluorescente se puede utilizar para detectar el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae o Neisseria gonorrhoeae cultivada, y la PCR para detectar el ADN de Neisseria gonorrhoeae positivo. El tejido patológico de la lesión es úlcera superficial con formación de pus, inflamación difusa de la dermis y tejido subcutáneo, infiltración de leucocitos polimorfonucleares, afectación de pequeños vasos sanguíneos, trombosis y necrosis localizada.
(B) artritis gonocócica: hinchazón articular, dolor, para una o varias artritis sépticas. Generalmente asimétrico, rara vez afecta las articulaciones de cadera, hombro y columna vertebral. La prueba de líquido articular tiene presencia de gonorrea, que puede provocar fibrosis causada por la destrucción ósea y la rigidez de los huesos y las articulaciones.
(C) queratosis gonocócica: puede deberse a gonocócica o sus toxinas, no puede encontrar lesiones gonocócicas en las lesiones cutáneas, a menudo con artritis gonocócica, las lesiones cutáneas son buenas para las manos y los pies, el tobillo, el talón y la cintura . Parches o placas que generalmente están aplanados y ligeramente hinchados, cónicos, amarillos o rojo cobre o blanco grisáceo. Las lesiones cutáneas del esputo palmar mostraron hiperplasia córnea y gran queratinización.
(D) endocarditis gonocócica: el gonococo es el principal patógeno de la endocarditis en las primeras décadas de uso de antibióticos, la endocarditis gonocócica es casi invisible, la endocarditis gonocócica y otros tipos La endocarditis tiene las mismas manifestaciones clínicas. La endocarditis a menudo implica válvula aórtica o mitral, endocarditis subaguda o aguda debido a la rápida destrucción de la válvula, que conduce a la muerte.
(5) meningitis gonocócica: poco frecuente, puede estar asociada con artritis y una erupción cutánea típica para distinguir la meningitis meningocócica.
Quinto, el impacto de la gonorrea en el embarazo y los recién nacidos.
Cuando una mujer tiene gonorrea con salpingitis, puede provocar infertilidad. La incidencia de infertilidad causada por la gonorrea femenina es de aproximadamente el 20%, y la incidencia de infertilidad aumenta con el aumento en el número de infecciones. Para las mujeres infectadas con gonorrea más de tres veces, la incidencia de infertilidad puede alcanzar el 70%. La inflamación gonocócica cervical puede conducir a la ruptura temprana de membranas, infección intraamniótica, infección intrauterina, retraso del crecimiento intrauterino y parto prematuro. Los recién nacidos tienen una alta morbilidad y mortalidad debido al parto prematuro, bajo peso corporal y sepsis. La infección aguas arriba de las bacterias gonocócicas después del nacimiento puede causar endometritis, fiebre puerperal, sepsis posparto severa, conjuntivitis gonocócica neonatal y vulvitis vaginal vaginal.
Examinar
Examen de gonorrea
Inspección de laboratorio:
Las pruebas de laboratorio de Neisseria gonorrhoeae incluyen frotis, cultivo para verificar Neisseria gonorrhoeae, detección de antígeno, prueba de susceptibilidad a medicamentos y determinación de PPNG, y diagnóstico genético.
(1) Examen de frotis:
Tome las secreciones uretrales o las secreciones cervicales del paciente para la tinción de Gram y encuentre Gram-negativo en los leucocitos polimorfonucleares.
Diplococcus, frotis para pacientes con uretritis anterior gonocócica simple con una gran cantidad de secreciones purulentas, la tasa positiva de este método es de aproximadamente 90%, se puede diagnosticar inicialmente, secreciones de colon femenino, más bacterias, poca sensibilidad y especificidad La tasa positiva es solo del 50-60%, y hay un falso positivo. Por lo tanto, la Organización Mundial de la Salud recomienda usar un método de cultivo para controlar a las pacientes. La gonorrea crónica tiene menos bacterias gonocócicas positivas en las secreciones, por lo que la tasa positiva es baja. Por lo tanto, se debe tomar la solución de masaje de próstata. Aumentar la tasa de detección.
El frotis faríngeo descubrió que el diplococo gramnegativo no podía diagnosticar la gonorrea, porque otras especies de Neisseria son normales en la faringe, y el frotis positivo para síntomas atípicos debe examinarse más a fondo.
(2) Entrenamiento e inspección:
El cultivo de Neisseria gonorrhoeae es una evidencia importante para el diagnóstico. El método de cultivo es un método sensible para hombres con síntomas leves o asintomáticos. Mientras el cultivo sea positivo, el diagnóstico puede ser confirmado. Antes del diagnóstico genético, la Organización Mundial de la Salud recomienda el cultivo. La única forma de detectar la gonorrea es usar medio modificado de Thayer-Martin (TM) y medio de la ciudad de Nueva York (NYC). El uso doméstico de agar chocolate o medio de agar sangre contiene antibióticos, opcionalmente Inhibe el crecimiento de muchas otras bacterias, cultivo a 36 ° C, 70% de humedad, 5% -10% de CO2 (vela), observación de 24-48 horas, morfología de colonias, tinción de Gram, oxidación Identificación por prueba enzimática y prueba de fermentación de azúcar, la tasa positiva de cultivo es 80% -95% para hombres y 80-90% para mujeres.
(tres) detección de antígeno
1. Inmunoensayo enzimático en fase sólida (EIA): se puede usar para detectar antígenos gonocócicos en muestras clínicas, se puede usar en poblaciones de mujeres en áreas con altas tasas de prevalencia y no se pueden cultivar o se deben enviar muestras durante mucho tiempo. Para diagnosticar infecciones gonocócicas.
2. Ensayo de inmunofluorescencia directa: detección directa por detección de anticuerpos monoclonales contra la proteína de la membrana externa I de Neisseria gonorrhoeae
Prueba de fluorescencia epidémica, pero actualmente la sensibilidad de las muestras bipolares masculinas y femeninas no es alta, la especificidad es pobre y el nivel de juicio del experimentador, por lo que el experimento no puede recomendarse para el diagnóstico de infección gonocócica.
(cuatro) diagnóstico genético
1. Diagnóstico por sonda genética de Neisseria gonorrhoeae
Las sondas para sondas de genes gonocócicos son: sondas de ADN plasmídico, sondas de genes cromosómicos y sondas de genes de ARNr.
(1) Sonda de ADN plasmídico
1 Sonda de ADN de plásmido oculto, el plásmido Neisseria gonorrhoeae se divide en tres tipos: plásmido de cigosidad, la molécula más grande, ADN de 36 kb; el plásmido resistente a los medicamentos consta de dos plásmidos, longitud de ADN de 5,6 kb y 7,1 kb, respectivamente; plásmido oculto de 4,2 kb, El plásmido críptico está presente en el 96% de los aislados clínicos de Neisseria gonorrhoeae. Otras Neisserias no contienen este plásmido, por lo que su secuencia puede usarse como una sonda de ADN específica para detectar Neisseria gonorrhoeae. Torres utiliza tecnología de hibridación de ácido nucleico para detectar Neisseria gonorrhoeae. Para ocultar el plásmido, la sonda se utilizó para detectar 134 cepas de Neisseria gonorrhoeae y 131 cepas relacionadas.124 cepas de Neisseria gonorrhoeae fueron positivas para la hibridación, lo que representa el 93%. También podrían reaccionar de forma cruzada con otras especies de Neisseria. La prueba de sensibilidad de la aguja mostró que se podían detectar 102 UFC de Neisseria gonorrhoeae. Se demostró que la secuencia del gen CPPB en el plásmido críptico estaba en todos los cromosomas gonocócicos (incluidas las cepas sin el plásmido), por lo que la sonda del gen CPPB tiene buena especificidad y sensibilidad. Sex, Torres et al.utilizaron la sonda del gen CPPB para detectar 201 muestras clínicas utilizando un sistema de etiquetado de digoxina no radiactivo con una sensibilidad y especificidad del 95% y 98%, respectivamente.
2 sonda de ADN plasmídico resistente a fármacos
Los plásmidos resistentes a Neisseria gonorrhoeae se pueden dividir en:
1 La bacteria gonocócica productora de toxina (PPNG) es positiva para la -lactamasa;
2 tiene un alto nivel de resistencia mediada por plásmidos a la tetraciclina gonocócica (TRNG).
La cepa PPNG se aisló por primera vez en el laboratorio en 1976. La cepa contiene un gen que codifica una enzima productora de serotonina. El gen se puede integrar en el cromosoma o en el ADN plasmídico, y este último se llama principalmente azul. Plásmido de la enzima toxina, dos tipos de plásmidos, 7,4 kb y 5,3 kb, respectivamente. Pescador diseñó una sonda específica para detectar el gen de la -lactamasa gonocócica en 1998, que se marcó mediante quimioluminiscencia enzimática, hibridación en fase líquida. La medición fotométrica es la cantidad de híbridos específicos.104-105 UFC de la cepa PPNG se pueden detectar en 4 h. Aunque la cepa TRNG es resistente a la tetraciclina, generalmente es sensible a los antibióticos -lactamasa y quinolona. Por lo tanto, en el experimento La prueba de susceptibilidad puede clasificarse como bacteria sensible. Pescador utiliza una sonda de oligonucleótidos contra el gen tetm tetraciclina gonocócica (TRNG), que está mediada por tetraciclina, marcada con quimioluminiscencia enzimática e hibridada en fase líquida. 1.5 × 104 UFC de Neisseria gonorrhoeae que contiene el gen tetm se detectó directamente a partir de muestras clínicas.
(2) sonda de cromosoma
Las sondas cromosómicas incluyen sondas genéticas conocidas, como sondas de ADN pili y sondas genéticas paI, que desempeñan funciones importantes en el proceso de infección gonocócica de células humanas; sondas genéticas de función desconocida, estas sondas La secuencia es complementaria a la secuencia específica del cromosoma, pero actualmente no se conoce la función de estas secuencias de genes. Las dos sondas cromosómicas anteriores tienen un número de detección bajo debido al bajo número de copias de la secuencia complementaria en Neisseria gonorrhoeae, por lo que la sensibilidad de detección es baja, por lo que generalmente no se usa a menos que Hay propósitos especiales de investigación.
(3) sonda génica de rRNA
La sonda del gen rRNA utiliza un ADN complementario al rRNA como sonda, y la secuencia objetivo de la sonda es una secuencia de rRNA, y la sonda del gen del rRNA se caracteriza por:
1 puede aumentar la sensibilidad de la detección de la sonda, la sonda del gen rRNA puede detectar simultáneamente las moléculas de rRNA y las moléculas de ADN;
2rRNA se conserva evolutivamente;
3 método de hibridación es simple y rápido;
4 Debido a que el contenido de ARNr es alto, no es necesario enriquecer la muestra. La sonda de detección gonocócica PACE C producida por Gen-Probe en los Estados Unidos utiliza ARNr y su gen como secuencia diana de detección, y se etiqueta radiactivamente y se puede detectar en 2 horas. Peter usó esta sonda para detectar 395 muestras clínicas. La sensibilidad y especificidad fueron 92.9% y 99.4%, respectivamente. Creía que el sistema PACE C era un método confiable para detectar bacterias gonocócicas en muestras clínicas. La sonda también puede detectar Infecciones gonocócicas asintomáticas, que actualmente son difíciles de lograr.
2, detección de amplificación génica de genes gonocócicos
La técnica de sonda descrita anteriormente detecta el método gonocócico, aunque tiene una gran mejora en la sensibilidad, especificidad y conveniencia que el método de cultivo, pero aún tiene ciertas limitaciones, como la Neisseria gonorrhoeae que requiere muestras en la mayoría de los casos. La concentración es muy alta, y la aparición de la tecnología de PCR y la reacción en cadena de la ligasa mejora aún más la sensibilidad de detección de Neisseria gonorrhoeae. Tiene las ventajas de ser rápida, sensible, específica y simple, y puede detectar directamente una cantidad muy pequeña de patógenos en muestras clínicas.
(1) Extracción de ADN de Neisseria gonorrhoeae
1 extracción de ADN del cultivo
La Neisseria gonorrhoeae cultivada se disolvió en un lisado alcalino a una concentración de 102 ufc / ml. El lisado consistía en NaCl 1 M NaOH 1 M y dodecil sulfato de sodio al 1%. El lisado se mezcló y se hirvió durante 1 min, luego 100 l. El lisado alcalino se neutralizó con Tris 1 M, pH 7,0, se extrajo una vez con fenol de equilibrio Tris, se extrajo una vez con fenol-cloroformo y luego se precipitó con etanol absoluto o isopropanol. El ADN extraído se disolvió en 30 l de agua destilada o tampón TE. En el liquido.
2 extracción clínica de muestras de hisopos de algodón
Las torundas de algodón con las secreciones se exprimieron en 2 ml de solución salina fisiológica estéril o tampón PBS durante 1 minuto para disolver las muestras en la solución tanto como sea posible, y las torundas de algodón se descartaron, y la suspensión fue de 2-3000 r / Centrifugar durante 5 min a min, aspirar el sobrenadante y volver a disolver las células en 100 l de tampón de PCR 1 × que contiene Tween 20 al 0,4% y 200 g / ml de proteinasa K. La suspensión celular se calentó a 50-60 ° C durante 1 h, luego se calentó a 95 ° C durante 10 min. La proteinasa K inactivada se centrifugó a 12000 r / min durante 10 minutos, y el sobrenadante contenía una plantilla de ADN.
(2) Diseño de cebadores de PCR
Dado que el gen CPPB de Neisseria gonorrhoeae está presente en el cromosoma gonocócico y en el plásmido críptico de 4,2 kb, y en el 96% de Neisseria gonorrhoeae, muchos cebadores de PCR están diseñados en la región del gen CPPB.
Longitud del fragmento de secuencia del cebador del gen diana (pb)
CPPB NG1 5'GTT TGG CTG GTT GAT TCA AG 3 '633
NG2 5'GCA AGA TTT CCG ATTT GGC G 3 '
CPPB HO1 5'GCT ACG CAT ACC CGC GTT GC 3 '390
HO2 5'CGA AGA CCT TCG AGC AGA CA 3 '
rRNA Primer 1 5'-AGG CTG TTG CCA ATA TCG GC-3 '206
Primer 2 5'-ACA CTC GAG TCA CCC AGT TC-3 '
CPPB GC1 5'CTT ATC GTT TGG CTG GTT GAT TC 3 '435
GC2 5'ACC AAG ACC AAA GGT TTG ACA CTG 3 '
GC3 5'ATT TTC CAG TGT CAA AC 3 '241
GC4 5'TAT TCA AGC CCT ATC TG 3 '
(3) amplificación por PCR
Tome 2 l de extracto de ADN de Neisseria gonorrhoeae y agregue 28 l de la solución de reacción.La solución de reacción de PCR final contiene 100 mol / L de dNTP, 0.5 mol / L de cebadores, 1 U de ADN polimerasa Taq, 1.5 mmol / L de Mg2 + y aceite de parafina estéril. 30 l, centrifugación a 1000 r / min durante 30 s, ciclo de amplificación por PCR, condiciones de reacción: desnaturalización 94 ° C 1 min, luego 94 ° C 30 s, 57 ° C 1 min, 72 ° C 1 min, un total de 30 ciclos y finalmente 72 ° C extensión 5 min.
El producto amplificado se sometió a electroforesis en un gel de agarosa al 2% durante 30 minutos, se tiñó con bromuro de etidio y se observó la banda fluorescente de ADN amplificada bajo luz ultravioleta. El tamaño de la molécula amplificada debería ser consistente con el tamaño de la secuencia objetivo amplificada.
(4) Sensibilidad y especificidad de la PCR
Dado que CPPB también contiene el gen CPPB en el cromosoma gonocócico que no contiene el plásmido críptico, el 96% de las bacterias gonocócicas tendrá un plásmido críptico. Por lo tanto, los cebadores que usan CPPB como secuencia objetivo tienen una sensibilidad extremadamente alta. Los experimentos demuestran que la tradición general El método de PCR de un solo paso (GC1-GC2) puede detectar tres Neisseria gonorrhoeae, mientras que la PCR anidada de un solo tubo (GC2-GC4) puede detectar 0.3 Neisseria gonorrhoeae (9 genes CPPB). Estos cebadores se probaron por especificidad. Puede amplificar el ADN de Neisseria gonorrhoeae, pero no produce productos específicos para N. gonorrhoeae.
(5) Método de PCR anidada de un solo tubo
Basado en la PCR anidada tradicional, se diseñaron especialmente dos pares de cebadores de PCR: los dos cebadores externos (GC1, GC2) fueron 25b, la temperatura de recocido fue relativamente alta (68 ° C) y los dos cebadores internos anidados, GC3-GC4. Para que la temperatura de recocido 17b sea más baja (46 ° C), los otros componentes de la solución de reacción de PCR son los mismos que los de la PCR general, de modo que el cebador externo se amplifica primero controlando la temperatura de recocido (68 ° C), después de 20-30 ciclos (primera vez) PCR), y luego reduzca la temperatura de recocido (46 ° C) para hacer que los cebadores internos usen el primer producto de PCR como plantilla para la amplificación anidada, la sensibilidad de la PCR puede alcanzar 0.3 Neisseria gonorrhoeae.
(6) Método de detección de reacción en cadena de ligasa de Neisseria gonorrhoeae (LCP)
En la actualidad, el método para la detección por PCR de Neisseria gonorrhoeae es ampliamente utilizado, y su especificidad y sensibilidad se mejoran continuamente.Al mismo tiempo, otra tecnología de diagnóstico genético, la reacción en cadena de la ligasa (LCP), también se aplica con su alta especificidad y alta sensibilidad. En la detección de cocos, LCP difiere de PCR en que LCP usa cuatro pares de cebadores, la enzima utilizada es la ligasa, la ligasa puede conectar dos cebadores adyacentes y los dos cebadores pueden usarse como plantillas para los otros dos cebadores. Este último puede ligarse bajo la acción de la ligasa y puede usarse como plantilla durante 30-40 ciclos. El método de tratamiento de plantilla utilizado para LCP es equivalente a la preparación de la plantilla de PCR. La sonda utilizada para LCP puede diseñarse en el gen CPPB. Diseñado en secuencias de genes cromosómicos, como el gen opa-1, Abbott Laboratories diseñó cuatro sondas LCP en la región de 48 pb del gen opa-1, ya que el gen opa-1 está 11 veces en el cromosoma gonocócico. Repita, por lo tanto, el conjunto de sondas LCP tiene alta sensibilidad y especificidad, proceso de reacción LCP:
La plantilla se añadió a la solución de reacción LCP, solución de reacción LCP: 20 mmol / L Tris-HCl pH 7.6; 100 mmol / L KCl 10 mmol / L MgCl2; 1 mmol / L EDTA; 10 mmol / L NAD +; 10 mmol / L DTT , dos sondas adyacentes con etiquetado de 40 fmol / L, sonda sin etiquetar de 40 fmol / L, ligasa resistente al calor 15U, condiciones de reacción: 97 ° C 1s, 55 ° C 1s, 62 ° C 50s, 40 ciclos Se añadieron 100 l del producto de reacción a la microplaca de la microplaca, y se llevó a cabo la reacción de color. Finalmente, el valor de la luz fue leído por un lector de microplacas. Según el experimento de Buimer, la sensibilidad del LCP en la detección de la muestra de torunda de algodón uretral masculina fue del 100%, y se obtuvo la orina. La muestra fue del 88,9%, la muestra de torunda cervical femenina fue del 95,4% y la especificidad del método LCP fue tan alta como del 100%, que fue significativamente mayor que la especificidad de la PCR y evitó la aparición de falsos positivos.
3. Precauciones para el diagnóstico genético clínico de Neisseria gonorrhoeae
En la actualidad, el método de diagnóstico genético para la detección clínica de Neisseria gonorrhoeae adopta principalmente el método de PCR, pero este método debe prestar atención a varios problemas en la detección clínica.
(1) Diseño del cebador Además de los cebadores de PCR gonocócicos enumerados anteriormente, también se pueden diseñar a partir de otros genes, pero
Es la secuencia del cebador que debe ser específica, ya que el cromosoma de la bacteria es grande, muchas secuencias de genes no están claras; al mismo tiempo, existe una cierta homología entre las bacterias, y también hay homología entre las secuencias de plásmidos contenidas en las bacterias. Por lo tanto, los cebadores deben diseñarse para el análisis comparativo de las bases de datos de genes, y deben realizarse experimentos de especificidad y sensibilidad, y los cebadores deben seleccionarse para la detección clínica.
(2) Procesamiento de muestras clínicas Para muestras clínicas, cuanto más puras sean los requisitos de la plantilla de PCR, mejor se debe tomar la posición al recolectar muestras.Para pacientes asintomáticos, se debe realizar un muestreo apropiado para asegurar la recolección de bacterias patógenas. Además, debido a la complejidad de las muestras clínicas, a veces la amplificación por PCR de las muestras no es ideal. Esto puede deberse a impurezas excesivas, que requieren una purificación adicional. Por ejemplo, la purificación por extracción con fenol-cloroformo mejorará. Este método de purificación es engorroso, y un kit de purificación de ADN disponible comercialmente está disponible actualmente para la extracción relativamente fácil de ADN de alta pureza de muestras clínicas.
(3) Método de detección de productos de PCR Recientemente, la detección clínica por PCR de Neisseria gonorrhoeae casi todos utiliza electroforesis para identificar productos de PCR. Este método tiene muchos problemas, como resultados falsos positivos y falsos negativos debido a la subjetividad de la observación macroscópica. La colorimetría híbrida se usa actualmente en lugar de la electroforesis para mejorar la especificidad y la sensibilidad de los resultados.
En conclusión, el método de PCR y el método de LCP han mejorado mucho la sensibilidad y la especificidad en comparación con el método de cultivo tradicional, y el tiempo también se acorta considerablemente. Con la mejora continua de la tecnología de diagnóstico de genes, el método de PCR y el método de LCP se detectan en el gonococo Se convertirá en un método de detección de rutina.
(5) Prueba de susceptibilidad: prueba de susceptibilidad adicional después del cultivo positivo, prueba de sensibilidad por método de difusión en papel o concentración inhibitoria mínima (MIC) por método de dilución en placa de agar para guiar la selección de antibióticos.
(6) Detección de PPNG : -lactamasa, usando el método cuantitativo de acidez del papel, usando el papel de filtro Whatman I PP-NG, la cepa puede hacer que su color cambie de azul a amarillo, positivo para PPNG, negativo para N-PPNG.
Diagnóstico
Diagnóstico de gonorrea
1. Enfermedades identificadas por hombres y mujeres con gonorrea
(1) Uretritis no específica: a menudo hay causas obvias de la enfermedad, como la inserción del catéter, la sonda uretral, el tracto genitourinario o la inflamación de los órganos adyacentes, y la mancha de frotis de secreción puede detectar cocos grampositivos.
(2) NGU: los síntomas clínicos son similares a los de la gonorrea, pero más ligeros, el período de incubación es más largo que la gonorrea, hasta 1 a 3 semanas, la secreción es pequeña y serosa, la disuria es rara, no hay síntomas sistémicos y se toman secreciones para su examen. A menudo se puede encontrar clamidia o micoplasma.
(3) sentadilla blanda: el daño generalmente se localiza en el área genital externa, ocurre en la uretra, la fosa escapular tiene secreciones purulentas, enrojecimiento uretral y dolor intenso, las úlceras pueden detectar Ducrey Haemophilus.
(4) Herpes genital: causado por el VHS, el daño es una ampolla en racimo, generalmente ubicada en los genitales externos, perianal, ocasionalmente en el cuello uterino, ocurre en la uretra, puede haber una pequeña cantidad de secreciones y hormigueo o molestias uretrales, a menudo acompañado de sensación de ardor local. El dolor es obvio y puede repetirse.
(5) erupción farmacológica fija: hay antecedentes de medicación o medicamentos inyectables, causados principalmente por sulfonamidas, barbitúricos, salicilatos o tetraciclinas, a menudo se producen en la piel genital, unión de la mucosa, eritema, edema, ampollas, Erosión y exudación, etc., con picazón o dolor, sin enrojecimiento y valgo en la uretra.
(6) uretritis tuberculosa: puede tener hormigueo uretral y una pequeña cantidad de secreciones, pero no hay antecedentes de contacto sexual, no se puede encontrar gonococo, se puede encontrar tuberculosis, acompañada de otras partes de los síntomas de la tuberculosis.
2. Enfermedades identificadas por la gonorrea masculina.
(1) Balanitis del prepucio: común en el prepucio es demasiado largo o fimosis, causada principalmente por estimulación del esmema e infección piógena secundaria, hoja interna intracapsular, glande y enrojecimiento del surco coronario, más suciedad y secreciones purulentas. , sin síntomas del tracto urinario y enrojecimiento e hinchazón de la uretra, pus, etc.
(2) Turbiedad de la orina: la orina es de color blanco lechoso y hay sedimento cristalizado de sal después de estar de pie, sin síntomas acompañantes.
3. Enfermedades identificadas por la gonorrea femenina.
(1) Vaginitis por Candida: picazón de apertura genital y vaginal, más secreción vaginal, como aguada o cuajada, enrojecimiento de la mucosa vaginal, erosión, puede tener una película blanca adherida a la pared vaginal, tomar un examen microscópico de frotis de película blanca bacterias visibles Seda y esporas.
(2) vaginitis por Trichomonas: prurito conscientemente vaginal en la vagina, secreciones vaginales a menudo espuma rosada, mucosa vaginal más sangrado, el cuello uterino puede tener protuberancias parecidas a fresas y hemorragia puntiforme, secreciones vaginales Trichomonas puede ser detectado.
(3) Vaginosis bacteriana: principalmente leucorrea refractaria, blanco grisáceo, no supurativo, con un olor a "pescado", se pueden detectar bacilos de Gardner y bacterias anaerobias a partir de las secreciones vaginales.
(4) vulvitis de Staphylococcus aureus hembra joven: más común en niñas en edad preescolar o escolar, ocurre en verano, vulva, enrojecimiento perianal, pústulas o secreciones purulentas, acompañado de dolor o picazón, frotis de secreción Se detectaron cocos grampositivos.
4. Enfermedades identificadas con GPID
Hay apendicitis aguda, aborto infeccioso, endometriosis pélvica, embarazo ectópico, torsión o ruptura del pedículo del quiste ovárico.
