Essai de neutralisation

Le test de neutralisation est basé sur la détermination du pouvoir infectieux du virus et sur la capacité de l’immun sérum à neutraliser le virus sur la base de la comparaison du pouvoir infectieux résiduel du virus après neutralisation par le sérum immun. Lorsqu'un animal est infecté par un virus, un anticorps neutralisant spécifique est produit dans le corps et se lie spécifiquement au virion correspondant, empêchant ainsi le virus de s'adsorber sur la cellule sensible ou d'inhiber son invasion, de sorte que le virus perd son pouvoir infectieux. Informations de base Classification de spécialiste: Examen des maladies infectieuses et classification: examen immunologique Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: pas le jeûne Résultats d'analyse: En dessous de la normale: Valeur normale: Non Au-dessus de la normale: Négatif: Moins de 10 est négatif et pas de virus. 10 à 49 sont suspects. Positif: En règle générale, un indice de neutralisation supérieur à 50 est considéré comme positif et un virus est présent. Conseils: Faites attention aux habitudes alimentaires normales et à l'hygiène personnelle. Valeur normale Méthode du virus à dilution du sérum fixe: pour les virus, l’indice de neutralisation est supérieur à 50, 10 à 49 sont suspects et moins de 10 sont négatifs. Test de neutralisation valeur normale: le corps humain est dans un état d'équilibre dynamique et en bonne santé. Signification clinique Ce test est principalement utilisé pour détecter les anticorps du sérum à tester ou pour détecter les virus du matériel pathogène, diagnostiquant ainsi les infections virales; 2 pour vérifier les toxines contenues dans le matériel contenant du sérum anti-toxine ou pour identifier le type de toxines de la bactérie; Sérum viral ou titre anti-toxine 4; Identification et typage des virus nouvellement isolés, le test de neutralisation peut être effectué non seulement chez des animaux de laboratoire sensibles, mais également sur des cultures cellulaires ou des embryons de poulet. Les méthodes de test comprennent principalement un test qualitatif simple, une méthode du virus à dilution sérique fixe, une méthode du sérum à dilution virale fixe et une méthode de réduction de la plaque. Des résultats positifs peuvent être des maladies: oreillons, SIDA, dengue, encéphalite japonaise, éruption cutanée du virus Coxsackie, fièvre aphteuse, précautions contre la rage Interdit avant l'examen: Faites attention aux habitudes alimentaires normales et à l'hygiène personnelle. Conditions d'inspection: coopérer activement avec le médecin. Processus d'inspection (1) Simple test de neutralisation qualitative Cette méthode est principalement utilisée pour détecter le virus dans le matériel de la maladie et peut également être identifiée ou finalisée initialement. Les animaux d’essai (ou embryons de poulet, culture cellulaire) et les voies d’inoculation sont d’abord sélectionnés en fonction de la sensibilité virale. Le matériau est broyé et dilué à une certaine concentration (environ 100 DL50 ~ 1000 LD50 ou TCID50). Les matériaux contaminés doivent être additionnés d'antibiotiques (200 à 1000 unités de pénicilline et de streptomycine) ou filtrés avec un filtre bactérien, mélangés avec un antisérum connu (dilué de manière appropriée ou non) et dilué avec du sérum normal. Pour comparaison. Après mélange, les cellules ont été inoculées à 37 ° C pendant 1 heure et au moins 3 animaux de chaque groupe. Isolement alimentaire, observation de la morbidité et de la mortalité. Les animaux témoins sont morts, tandis que les animaux du groupe de neutralisation ne sont pas morts, ce qui a confirmé que la maladie contenait le virus correspondant à l'antisérum. Cette méthode peut également être utilisée pour l'identification et le typage de toxines (telles que les toxines). (2) Méthode du virus à dilution sérique fixe Dans cette méthode, le virus a été dilué 10 fois par incréments, deux tubes ont été placés, la première colonne a été ajoutée avec du sérum normal (groupe témoin) et la deuxième colonne a été ajoutée avec le sérum à tester (groupe testé). Après mélange, les cellules ont été ensemencées à 37 ° C pendant une heure, et chaque mélange de tubes a été ensemencé séparément dans les animaux testés sélectionnés, et 3 à 5 animaux ont été utilisés pour chaque dilution. Après l'inoculation, observer quotidiennement et noter le nombre de décès, puis calculer la DL50 et l'indice de neutralisation (Tableau 7-1, Tableau 7-2). Cette méthode est applicable à la détection d'un grand nombre d'échantillons. Cette méthode est principalement utilisée pour détecter les anticorps neutralisants dans le sérum à tester: pour les virus, l'indice de neutralisation est généralement supérieur à 50 et est positif, 10 à 49 est suspect, et moins de 10 est négatif. (3) Méthode du sérum à dilution virale fixe Cette méthode est utilisée pour déterminer le prix de neutralisation du sérum antiviral.Le sérum à tester est dilué 2 fois et la solution virale ayant la même valeur toxique est ajoutée (mélangée à du sérum, chaque dose contient le virus 100LD50), agitez bien. Les animaux testés ont été inoculés à 37 ° C pendant 1 heure. Note: [1] Dose d'inoculation 0,1 ml, contenant le virus 100LD50. [2] fait référence à la dilution après mélange avec le virus. [3] Le dénominateur est le nombre d'inoculations et le numérateur, le nombre de protection. [4] PD50 est une demi-protection et sa méthode de calcul est identique à celle du calcul de la DL50. (4) méthode de réduction de la plaque Le test de neutralisation du virus a été effectué sur culture cellulaire et, ces dernières années, la méthode de réduction de la plaque a été fréquemment utilisée. Premièrement, le virus est dilué à une concentration appropriée, de sorte que 80 à 100 UFP (unité formant des plaques) par 0,2 ml soient mélangés aux différentes dilutions du sérum à tester et placés à 37 ° C pendant 1 h à 2 h pour mesurer le PFU, respectivement. Une dilution au sérum de 50% de la plaque est le prix de neutralisation du sérum. Voir le tableau 7-4. Tableau 7-4 Exemple de test de neutralisation pour la méthode de réduction de la plaque Note: [1] Le sérum a été dilué par incréments de 4 fois. [2] La plaque est réduite de 50% de la dilution du sérum et la méthode de calcul est identique à celle de la DL50. Ne convient pas à la foule Les personnes présentant une fonction hématopoïétique réduite, telle que la leucémie, une anémie variée, le syndrome myélodysplasique ou les thrombocytopéniques doivent faire attention à la prise de sang et ne doivent pas en prélever plus ou plus. Effets indésirables et risques 1. Une fois le sang prélevé, n'appuyez pas sur le trou de l'aiguille pour éviter un hématome sous-cutané. S'il y a une petite ecchymose dans le sang, elle est légèrement sensible, ne paniquez pas, vous pouvez faire une compresse chaude après 24 heures pour favoriser l'absorption du sang. La petite quantité générale de congestion sera absorbée progressivement au bout de 3 à 5 jours et la couleur deviendra plus claire et reviendra à la normale. 2. Après le prélèvement de sang, les symptômes comme les vertiges, les vertiges, la fatigue, etc. doivent être immédiatement couchés, boire une petite quantité de sirop, puis se soumettre à un examen physique après le soulagement des symptômes.